و 1 Journal of Education and Science (ISSN X), Vol: 29, No: 3, 2020 ( ) Detection of MTHFR (A1298C) Gene Polymorphism in Women Suffer fr

النسخ

1 و 1 Detection of MTHFR (A1298C) Gene Polymorphism in Women Suffer from Different Types of Abortion in Mosul City Zahra J. Ramadan 1, Owayes M. Hamed 2* 1,2 Department of Biology, College of Science, University of Mosul, Mosul, Iraq 1 Zahra.jasem2018@gmail.com, 2 *Owsbio31@uomosul.edu.iq (Received April 13, 2020; Accepted May 16, 2020; Available online September 01, 2020) DOI: /edusj , 2020, College of Education for Pure Science, University of Mosul. This is an open access article under the CC BY 4.0 license ( Abstract: Genetic basis of recurrent abortion is poorly understood, Single gene mutations, polygenic, and cytogenetic factors are all found to show association with recurrent abortion. The analysis of single nucleotide polymorphisms in the genes coding for enzymes which responsible for regulatory of metabolic pathways (e.g. methylene tetra hydrofolate reductase), clotting factors (Factor V leiden and prothrombin) and hormones and hormone receptors (progesterone receptor). This study included (85) pregnant women who suffer from problems during pregnancy and the age range was between (25-35) years. The samples were divided into four groups,the first included pregnant women who suffer from recurrent spontaneous abortion, while the second included pregnant women with missed abortion, the third group included pregnant women with recurrent spontaneous abortion and positive TORCH examination and the final group was considered a control group. The result of the study showed a relationship between cases of pregnancy disorder and genetic mutations of MTHFR gene at the (A1298C) site, the result of the study for a group of women with RSA showed that the distribution of the mutant genotype CC was the highest 40% and the repetitive alleles for this group was 57.5% for mutant allele C and 42.5% for normal allele A. Also the group of missed abortion showed that the distribution of the mutant genotype CC was the highest 40% and the repetitive alleles for this group was 52.5% for mutant allele C and 47.5% for normal allele A. Whereas the group of women with positive TORCH showed that the distribution of heterozygous genotype was the highest 50% and the repetitive alleles for this group was 32.2% for mutant allele C and 67.8% for normal allele A. Key words: Abortion, MTHFR gene, gene polymorphism, Mutation. تحديد التباين الو ارثي للجين MTHFR في الموقع A1298C لدى النساء اللواتي يعانين من حاالت االجهاض المختلفة في مدينة الموصل زهرة جاسم رمضان 1 اويس موفق حامد 2* 2 قسم علوم الحياة كلية العلوم جامعة الموصل الموصل الع ارق 130

2 الخالصة إن األساس الو ارثي لحاالت االجهاض المتكرر يكون غير واضح جدا اذ ان الطف ارت الجينية وحاالت التعدد الجيني وعوامل الو ارثة الو ارثية الخلوية جميعها وجدت مت اربطة مع حاالت االجهاض المتكرر ولتفسير بعض حاالت االجهاض المتكرر فقد تم تحليل التباينات االيضية SNP single nencleotied polymeorphism ومنها الجين المسؤول عن تكوين انزيم في عدة عوامل منها الجينات المشفرة لإلنزيمات التي تنضم الفعالية gene( )MTHFR وان الطف ارت المؤثرة على عوامل التخثر مثل طف ارت PT, FVL والطف ارت المؤثرة على انتاج الهرمونات او المؤثرة على مستقبالت مثل مستقبالت بروجستيرون. شملت الد ارسة الحالية )85( ام أرة من النساء الحوامل اللواتي يعانين من مشاكل اثناء الحمل وبفئة عمرية تت اروح بين )25-35( سنة وتم تقسيم العينات على اربع مجاميع يعانين تتضمن المجموعة االولى النساء الحوامل اللواتي يعانين من حاالت اجهاض متكرر والمجموعة الثانية تتضمن النساء الحوامل اللواتي يعانين من حاالت اجهاض متكرر )الجنين الميت(, والثالثة تتضمن النساء اللواتي من حاالت اجهاض متكرر تلقائي وبفحص TORCH موجب النتيجة اما المجموعة ال اربعة من النساء فقد اعتبرت مجموعة سيطرة تم سحب )5( مل من الدم الوريدي من النساء وتم تقسيمه على ج أزين الجزء االول تم وضعه في انابيب تحتوي على مادة مانعة للتخثر EDTA والتي استخدمت في استخالص الدنا المجيني لالختبا ارت الجزيئية والجزء الثاني تم وضعه في انابيب خالية من مانع التخثر الج ارء االختبا ارت الكيموحيوية. اظهرت نتائج الد ارسة وجود عالقة بين حاالت اضط اربات الحمل والطف ارت الو ارثية التي تصيب الجين MTHFR في الموقع A1298C إذ اظهرت نتائج الد ارسة لمجموعة النساء اللواتي يعانين من االجهاض المتكرر بان نسبة توزيع الط ارز الو ارثي الطافر CC كانت هي االعلى %40 وقد كان التك ارر االليلي لهذه المجموعة بان االليل الطافر C فقد تكرر بنسبة %57.5 بينما االليل الطبيعي A فقد تكرر بنسبة %42.5. في حين اظهرت النسب لمجموعة النساء اللواتي يعانين من حاالت الجنين الميت بان نسبة توزيع الط ارز الو ارثي الطافر CC ايضا كانت هي االعلى %40 اما التك ارر االليلي فقد بينت الد ارسة لهذه المجموعة بان االليل الطافر C تكرر بنسبة %52.5 بينما االليل الطبيعي A فقد تكرر بنسبة %47.5. اما بالنسبة لمجموعة النساء اللواتي يعانين من فحص TORCH الموجب بان نسبة توزيع الط ارز الو ارثي المتباين AC كانت هي االعلى %50 وان التك ارر االليلي لهذه المجموعة بين بان االليل الطافر C فقد تكرر بنسبة %32.2 في حين أن االليل الطبيعي A تكرر بنسبة %67.8. الكلمات المفتاحية: االجهاض, الطف ارت, التباين الو ارثي, الجين MTHFR المقدمة تعاني النساء الحوامل من مشاكل واضط اربات كثيرة خالل فترة الحمل ويعتبر االجهاض المشكلة االكثر تعقيدا وشيوعا في الحمل اذ يؤثر على %15 من حاالت الحمل المشخصة سريريا في المجتمع وتشير االحصائيات الى ان عدد حاالت االجهاض في المجتمع تكون اكبر من عدد حاالت الحمل الفعلي [1,2]. ان االساس الو ارثي لحاالت االجهاض المتكرر يكون غير واضح جدا حيث ان الطف ارت الجينية وحاالت التباين الو ارثي وعوامل الو ارثة الخلوية جميعها وجدت مت اربطة مع حاالت االجهاض المتكرر ولتفسير هذه الحاالت وان الطف ارت المؤثرة على عوامل التخثر مثل الطف ارت التي تصيب جينات عوامل التخثر ومنها الهرمونات او المؤثرة على مستقبالت الهرمونات مثل مستقبالت هرمون بروجستيرون [3]. Factor V Lieden و جين Prothrombin والطف ارت المؤثرة على انتاج يعتبر جين MTHFR المسؤول عن تكوين انزيم methylene tetra hydro folatereductase وهو انزيم أساس يحفز تحويل 5,10-methylen tetra hydrofolate الى 5-methylen tetra hydrofolate وهو الشكل المنتشر والسائد للفوليت ويشارك 131

3 في عملية مثيلة الهوموسستين )المعتمدة على فيتامين B12 ) الى الميثونين الذي بدوره يتحول الى s-adenosyl-methionine والذي يعمل كواهب لمجموعة المثيل في عملية مثيلة ال DNA والبروتينات والنواقل العصبية والدهون المفسفرة وان التباين الجيني وفي النساء الحوامل يعد ذلك احد عوامل ل MTHFR يرتبط بشكل عام مع حالة فرط الهوموسستين hyper homocystinemia وحدوث حاالت االجهاض المتكرر وان هناك عدة الخطورة لحدوث خلل وظيفي في االنبوب العصبي neural tube defect د ارسات سجلت الت اربط بين زيادة مستوى الهوموسستين مع حاالت فقدان الحمل المبكر االول ويوجد نوعان من التغايير الو ارثي في والذي ينتج عنه تغيير االلنين الى فالين في المسار التحفيزي النزيم ال MTHFR وهذه الحالة تجعل االنزيم جين MTHFR عرضة للتلف وتقلل من فعاليته [4,5,6,7]. كذلك تعتبر متالزمة االجسام المضادة للدهون المفسفرة من مسببات االجهاض اذ تكون هذه المتالزمات كاضط ارب في النظام المناعي يتميز بحدوث زيادة او فرط في تخثر الدم ومضاعفات اخرى لدى النساء الحوامل )اجهاض مبكر ووالدة مبكرة وموت الجنين( و وجود اجسام مضادة لل antiphophlipid في الدم )مثل anti-cardiolipin و lupus anticoagulant وتشمل اضط اربات التخثر المرتبطة بمتالزمة االجسام المضادة للفوسفوليبيد: الجلطة وجلطات الدم في عمق الساقين )تجلط الدم الوريدي العميق( والتجلطات في الرئتين )االنسداد الرئوي( وان المرضى الذين يعانون من هذه المتالزمة يحصل لديهم جلطات دموية وايضا phospholipid antibody لديهم اضداد فوسفوليبيد قابلة للكشف عن طريق فحص الدم وايضا تسمى هذه المتالزمة ب. [8,9] cardiolipin antibody syndrome وايضا متالزمة االجسام المضادة للكارديوليبين syndrome في الجين single nencleotied polymeorphism SNP تحليل التباينات الو ارثية وتهدف هذه الد ارسة الى MTHFR( الجين المسؤول عن تكوين انزيم وهو methylentetrahydrofolatereductase (MTHFR) gene ) methylentetrahydrofolatereductase المواد وط ارئق العمل شملت الد ارسة الحالية (85( ام أرة من النساء الحوامل اللواتي يعانين من مشاكل اضط اربات الحمل وبنفس الفئة العمرية تت اروح بين )35-25( سنة من الم ارجعات الى مستشفى الخنساء التعليمي في فترة زمنية ت اروحت من شهر تموز الى شهر تشرين االول من عام 2019 وتم االعتماد على تشخيص الطبيب المقيم في المستشفى والذي اعتبر كمشرف ميداني لحاالت االسقاط في اختيار العينات 132 وتم تقسيم العينات على اربع مجاميع : المجموعة االولى: تتضمن هذه المجموعة 21 ام أرة من النساء الحوامل اللواتي يعانين من حاالت اجهاض متكرر تلقائي, المجموعة الثانية: تتضمن هذه المجموعة 30 ام أرة من النساء الحوامل اللواتي يعانين من حاالت اجهاض متكرر )الجنين الميت(, المجموعة الثالثة: تتضمن هذه المجموعة النساء اللواتي ام أرة 14 يعانين من حاالت اجهاض متكرر تلقائي وبفحص TORCH موجب النتيجة, المجموعة ال اربعة: تتضمن هذه المجموعة 20 ام أرة من النساء الحوامل اللواتي ال يعانين من اي مشاكل اثناء الحمل وتم اعتمادها كمجموعة سيطرة. جمع وحفظ نماذج الدم Collection of Blood sample تم سحب )5( مل من الدم الوريدي من النساء وتم تقسيمه الج ارء اختبا ارت متالزمة االجسام المضادة للفوسفولبيد على جز أين الجزء االول من الدم وحفظ بانابيب خالية من مانع التخثر Phospholipid Screen Cardiolipin Ab الELISA. وجزء اخر طريقة وضع في انابيب تحتوي على مادة مانعة للتخثر EDTA والتي استخدمت في استخالص ال باالعتماد على تقنية DNA.[10] Iranpur, and Esmailizadeh واجريت االختبار ات الجزيئية باالعتماد على تقنية ال باالعتماد على Amplification

4 و 1 (ARMS-PCR) refractory mutation system وقد حددت تركيز عينة ال )25ng\µic( DNA باستخدام جهاز النانودروب عن وجود الطفرة وكشف A 1298 C 4 باضافة )10( بيكومول من كل بادئ خاص بالطفرة مايكروليتر وبتركيز )100( نانوغ ارم من الدنا القالب و 1 A1298C المجهز من قبل شركة macrogen الكورية الى مايكروليتر محتويات ال بتركيز Master. [11].mix primer Sequence tm Band size F-outer GAAGAAGTTTGCATGCTTGTGGTTG bp R-outer CAGGCAAGTCACCTGGGAGAGA 66.0 F-inner GGCAAAGAACGAGACTTCAAAGACACATT bp R-inner GAGGAGCTGACCAGTGATGC bp بعدها تم ادخال انابيب التفاعل في جهاز المبلمر الح ارري Thermocycler إلج ارء التفاعل التضاعفي وباستخدام البرنامج الخاص للتفاعل اذ تم اضافة جميع البادئات الى التفاعل وكما موضح[ 11 ]. No. Stage Temperature Time Cycle number 1. Initial denaturation 95 5 min denaturation sec. 3. Annealing 61 1 min Extension 72 1 min. 5. Final extension 72 7 min Stop reaction 4 5 min 1 النتائج والمناقشة اظهرت نتائج الد ارسة كما هو موضح في الشكل ( 2( وجود عالقة بين حاالت االجهاض المتكرر والطف ارت الو ارثية التي تصيب الجين MTHFR في الموقع A1298C اذ يتبين عند مالحظة الشكل ناتج تفاعل الPCR الذي يكون بحجم 281, 361, 593 bp والتي تدل على ظهور التباين الو ارثي للجين وبجميع الطرز الو ارثية AA,AC,CC وبنسب مئوية مختلفة كما هو موضح في الجدول )1(: 133

5 الشكل )1( : تبين ناتج تفاعل ال PCR الخاص بالتباين الو ارثي للجين (A1298C) MTHFR في مجموعة النساء ذوات الجهاض المتكرر إذ إن M تمثل العينات الحاملة للنمط الو ارثي المتباين )AC( بناتج التفاعل يحوي ثالثة حزم بحجم 593 bp للجين الرئيسي )1,3,4,8 ) تمثل الدليل ألحجمي والعينات اما العينات (5,6,7,9) فهي تمثل العينات الحاملة للنمط الو ارثي الطبيعي والحزمة 281 bp تمثل االليل الطبيعي اما الحزمة 361 bp تمثل االليل الطافر, 361 bp,593 bp والتي تم فهي تمثل العينات الحاملة للنمط الو ارثي الطافر )CC( بناتج تفاعل )AA( بناتج تفاعل 281, bp,593 bp والعينات )2,10( ترحيلها في هالم االكاروز بتركيز %2. جدول )1(: توزيع النمط الو ارثي ومستوى المشاهدة االليلي للجين MTHFR في الموقع (A1298C) بين مجموعة السيطرة والنساء اللواتي يعانون من حاالت االسقاط التلقائي المتكرر. Genotypes Patients No. (20) Control No. (20) P value OR (95 % CI) No. % No. % AA Ref AC to CC to Alleles No. % No. % P value OR (95 % CI) A C to يبين الجدول )1( مستوى المشاهدة االليلي والنمط الو ارثي للجين MTHFR في الموقع A1298C علما بان االليل A هو االليل الطبيعي واالليل C هو االليل الطافر اذ اظهرت نتائج الد ارسة لمجموعة النساء اللواتي يعانون من االسقاط المتكرر بان نسبة توزرع الط ارز الو ارثي الطافر CC كانت هي االعلى %40 في حين نسبة الط ارز الو ارثي الطبيعي AA كانت هي االقل %25 اما بالنسبة للطارز الو ارثي المتباين AC فقد تواجد بنسبة %35 مقارنة مع مجموعة السيطرة, والتي كانت فيها نسب الطرز مختلفة اذ كانت نسبة تواجد الط ارز الو ارثي الطبيعي AA هي االعلى %70 في حين كانت نسبة الط ارز الو ارثي المتباين AC وهي %30 بينما لم تسجل اي ظهور للنمط الو ارثي الطافر CC في مجموعة السيطرة. اما بالنسبة لمستوى المشاهدة االليلي فقد بينت الد ارسة لهذه المجموعة بان االليل الطافر C كان مستوى المشاهدة االليلي %57.5 بينما االليل الطبيعي A كان مستوى المشاهدة االليلي 134

6 %42.5 مقارنة مع مجموعة السيطرة اذ كان مستوى المشاهدة االليلي لالليل الطبيعي %85 واالليل الطافر بنسبة %15. وقد اظهرت د ارسات سابقة بان هذه الطفرة تعتبر من المسببات الو ارثية لالجهاض المتكرر اذ تلعب دو ار مهما في زيادة مستوى الهوموسستين في الدم مما يؤدي الى حدوث حالة Hyper-homocystenemia والتي تؤدي الى خلل في ايض الفوليك وفرط التخثر في المشيمة وبالتالي حدوث حالة االجهاض كذلك اظهرت نتائج الد ارسة بان ةيمة ال O.R هي )9.6000( بالنسبة للط ارز الو ارثي الطافر CC وهذا يعتبر عامل خطورة وحدوث اضط اربات الحمل الناتجة عن خلل في عمل الجين.MTHFR [4,5,6,8]. وعند اج ارء اختبار هاردي_وينمبرغ تبين بان ةيمة P Value تساوي وهي اقل من 0.5 وهذا يدل بان هذه المجموعة غير متزنة وال تخضع لقانون HWE بسبب الطفرة التي اصابت الجين. MTHFR اظهرت نتائج الد ارسة كما هو موضح في الشكل )2( وجود التباين الو ارثي للجين MTHFR في الموقع A1298C وبجميع الطرز الو ارثية AA,AC,CC لدى النساء اللواتي يعانين من حاالت الجنين الميت. الشكل )2(: تبين ناتج تفاعل ال PCR الخاص بالتباين الو ارثي للجين (A1298C) MTHFR في مجموعة النساء ذوات الجنين الميت إذ إن M تمثل الدليل ألحجمي والعينات )3,7,10( تمثل العينات الحاملة للنمط الو ارثي الطبيعي )AA( بناتج التفاعل يحوي ثالثة حزم بحجم 593 bp للجين الرئيسي والحزمة 281 bp تمثل االليل الطبيعي اما الحزمة 361 bp تمثل االليل الطافر, اما العينات (2,4,5,8,9) فهي تمثل العينات الحاملة للنمط الو ارثي الطافر )CC( بناتج تفاعل 361 bp و 593, bp والعينات )1,6( فهي تمثل العينات الحاملة للنمط الو ارثي المتباين )AC( بناتج تفاعل 281bp,361 bp, 593bp والتي تم ترحيلها في هالم االكاروز بتركيز %2. كما يبين الجدول )2( توزيع النمط الو ارثي للجين MTHFR في الموقع A1298C اذ اظهرت نتائج الد ارسة لمجموعة النساء اللواتي يعانين من حاالت الجنين الميت نسبة الط ارز الو ارثي المتباين AC كانت هي االقل %25 اما بالنسبة بان نسبة توزيع الط ارز الو ارثي الطافر CC كانت هي االعلى %40 في حين ان للطراز زلر ازثي الطبيعي AA فقد تواجد بنسبة %35 مقارنة مع مجموعة السيطرة, والتي كانت فيها نسب الطرز مختلفة اذ كانت نسبة تواجد الط ارز الو ارثي الطبيعي AA هي االعلى %70 في حين كانت نسبة الط ارز الو ارثي المتباين AC وهي %30 في حين لم تسجل اي ظهور للنمط الو ارثي الطافر CC في مجموعة السيطرة. اما بالنسبة لمستوى المشاهدة االليلي فقد بينت الد ارسة لهذه المجموعة بان االليل الطافر C فقد كان مستوى المشاهدة 135

7 االليلي %52.5 في حين ان االليل الطبيعي A فقد كان مستوى المشاهدة االليلي %47.5 مقارنة مع مجموعة السيطرة اذ كان مستوى المشاهدة االليلي لالليل الطبيعي %85 واالليل الطافر بنسبة %15. كذلك اظهرت نتائج الد ارسة بان ةيمة ال O.R هي )6.8571( بالنسبة للط ارز الو ارثي الطافر CC وهذا يعتبر عامل خطورة وحدوث اضط اربات الحمل الناتجة عن خلل في عمل الجين.MTHFR وعند اج ارء اختبار هاردي_وينمبرغ تبين بان ةيمة P Value تساوي وهي اقل من 0.5 وهذا يدل بان هذه المجموعة غير متزنة وال تخضع لقانون HWE بسبب الطفرة التي اصابت الجين. MTHFR جدول )2(: توزيع النمط الو ارثي ومستوى المشاهدة االليلي للجين MTHFR في الموقع (A1298C) بين مجموعة السيطرة والنساء اللواتي يعانون من حاالت الجنين الميت Genotypes Patients No. (20) Control No. (20) P value OR (95 % CI) No. % No. % AA Ref AC to CC to Alleles No. % No. % P value OR (95 % CI) A C to كما بينت د ارسات سابقة بان هذه الطفرة تؤدي الى حدوث نقص في فعالية االنزيم )hydrofolat-reductase والذي يلعب دو ار مهما في تحويل المركب المركب 5-Methylen tetra hydrofola Methylente-tetra-( 5,10-Methylen tetra hydrofolate الى وهو يعتبر الشكل المنتشر والسائد للفوليت وان طفرة A1298C سجلت على انها تقلل من فعالية ونشاط االنزيم ان االشخاص الحامليين للنمط الجيني متغايير الزيجوت يمتازون بزيادة مستوى الهوموسسين ونقصان مستوى الفوليت[ 12,13,14,15 ]. كما اظهرت نتائج الد ارسة بالنسبة لمجموعة النساء ذوات فحص ال TORCH الموجب كما هو موضح في الشكل )3( وجود التباين الو ارثي للجين MTHFR في الموقع A1298C وبجميع الطرز الو ارثية. AA,AC,CC 136

8 الشكل )3(: تبين ناتج تفاعل ال PCR الخاص بالتباين الو ارثي للجين (A1298C) MTHFR في مجموعة النساء ذوات فحص ال TORCH الموجب إذ إن M تمثل الدليل ألحجمي والعينات )1,7,9,10,11,14( تمثل bp للجين الرئيسي والحزمة 281 bp تمثل االليل الطبيعي, اما العينات العينات الحاملة للنمط الور اثي الطبيعي )AA( بناتج التفاعل يحوي حزمتين حزم بحجم 593 (,4,5,8) فهي تمثل العينات الحاملة للنمط الو ارثي الطافر )CC( بناتج تفاعل 361 bp و,593 bp والعينات )2,3,6,12,13( ترحيلها في هالم االكاروز بتركيز %2. فهي تمثل العينات الحاملة للنمط الو ارثي المتباين )AC( بناتج تفاعل 281bp,361 bp, 593bp والتي تم ويبين الجدول )3( مستوى المشاهدة االليلي والنمط الو ارثي للجين MTHFR في الموقع A1298C اذ اظهرت نتائج الد ارسة لمجموعة النساء اللواتي يعانين من فحص TORCH الموجب %50 في حين ان AA نسبة الط ارز الو ارثي الطافر CC بان نسبة توزيع الط ارز الو ارثي المتباين AC هي االعلى كانت هي االقل %7.2 اما بالنسبة للط ارز الو ارثي الطبيعي AA فقد تواجد بنسبة %42.8 مقارنة مع مجموعة السيطرة, والتي كانت فيها نسب الطرز مختلفة اذ كانت نسبة تواجد الط ارز الو ارثي الطبيعي هي االعلى %70 في حين كانت نسبة الط ارز الو ارثي المتباين AC وهي %30 بينما لم تسجل اي ظهور للنمط الو ارثي الطافر CC في مجموعة السيطرة. اما بالنسبة لمستوى المشاهدة االليلي فقد بينت الد ارسة لهذه المجموعة بان االليل الطافر C فقد كان مستوى المشاهدة االليلي %32.2 بينما االليل الطبيعي A فقد كان مستوى المشاهدة االليلي %67.8 مقارنة مع مجموعة السيطرة اذ كان مستوى المشاهدة لالليل الطبيعي %85 واالليل الطافر بنسبة %15. كذلك اظهرت نتائج الد ارسة بان ةيمة ال O.R هي )1.0( بالنسبة للط ارز الو ارثي الطافر CC وهذا ال يعتبرر عامل خطورة وحدوث اضط اربات الحمل الناتجة عن خلل في عمل الجين.MTHFR وعند اج ارء اختبار هاردي_وينمبرغ تبين بان ةيمة يدل بان هذه المجموعة متزنة وتخضع لقانون. HWE P Value تساوي وهي اعلى من 0.5 وهذا 137

9 جدول( 3 ) : توزيع النمط الو ارثي ومستوى المشاهدة االليلي للجين MTHFR في الموقع (A1298C) بين مجموعة السيطرة والنساء اللواتي يعانون من فحص TORCH الموجب علما ان االليل A هو االليل الطبيعي و االليل C هو االليل الطافر. Genotypes Patients No. (20) Control No. (20) P value OR (95 % CI) No. % No. % AA Ref. AC to CC to Alleles No. % No. % P value OR (95 % CI) A C to وقد اشارت بعض الد ارسات الى ان حدوث هذه الطفرة التي تؤدي الى تغير الحامض االميني االرجنين الى البرولين مما يؤدي الى تغيير في التعبيير الجيني لالنزيم reductase) ) Methylen tetra hydrofolate وايضا تسبب انخفاض التوافر الحيوي للفوليت B12 وفيتامين وزيادة تركيز الهوموسستين وبما انه العمليات الخلوية مثل التكاثر والتمايز تعتمد على الفوليت وفيتامين فان هذه B12 التاثي ارت قد تكون واضحة بشكل خاص في مرحلة مبكرة من التطور الجنيني عندما تعاني الخاليا تكاث ار وتماي از سريعين وهي تعتبر مسبب اضافي الى حاالت االجهاض في هذه المجموعة [16,17,18,19]. وقد اظهرت نتائج الد ارسة بعد ةياس متالزمات االجسام المضادة للفوسفولبيد لمجاميع الد ارسة بان الفحوصات الموجبة للجسم المضاد IgG تواجدت في مجاميع التي شملتها الد ارسة بالنسبة للنساء اللواتي يعانين من اضط اربات الحمل الد ارسة وكانت اعلى مستوى لدى مجموعة النساء موجبة فحص ال TORCH بمعدل ( % 100( اما بالنسبة للجسم المضاد IgM تواجدت في جميع المجاميع وكانت اعلى مستوى لدى مجموعة النساء ذوات الجنين الميت بمعدل ( 71%( وكما موضح في الجدول التالي. بين نتائج مضادات IgG & IgM لل Antiphospholipid في العينات التي شملتها الد ارسة U\mL( ) ml Antibody RSA (n=21) MIS (n=30) TORCH (n=14) Range IgG + 18 (85 %) (87 %) 26 (100 %) IgG - 3 (15 %) (13 %) IgM + 15 (71%) (53 %) 16 (7 %) IgM - 6 (29 %) (47 %) الجدول )4(: كما اظهرت نتائج الد ارسة بعد ةياس متالزمات االجسام المضادة للكارديولبين لمجاميع الد ارسة بان الفحوصات الموجبة للجسم المضاد IgG تواجدت في مجاميع التي شملتها الد ارسة بالنسبة للنساء اللواتي يعانون من اضط اربات الحمل وكانت اعلى مستوى لدى مجموعة النساء موجبة فحص ال TORCH بمعدل ( % 92( وكانت القيم اعلى مقارنة بمجموعة السيطرة, اما بالنسبة للجسم المضاد IgM فقد تواجدت في مجموعة النساء Recurrent Spontaneous Abortion ومجوعة Missed abortion وبنفس الدرجة %(.)15 138

10 الجدول )5(: بين نتائج مضادات IgG & IgM لل Anticardiolipin في العينات التي شملتها الد ارسة U\mL( ) Antibody RSA (n=21) MIS (n=30) TORCH (n=14) Range IgG + 18 (85 %) 28 (93 %) 13 (92 %) IgG - 3 (15 %) 2 (7 %) 1 (8 %) IgM + 3 (15 %) 3 (15 %) IgM - 2 (11 %) اشارت د ارسات عديدة الى ان هذه المتالزمة تعد في اضط اربا النظام المناعي يتميز بحدوث زيادة او فرط في تخثر الدم ومضاعفات اخرى لدى النساء الحوامل )اجهاض مبكر ووالدة مبكرة وموت الجنين( ووجود اجسام مضادة لل antiphophlipid في الدم وتشمل اضط اربات التخثر المرتبطة بمتالزمة االجسام المضادة للفوسفوليبيد: الجلطة وجلطات الدم في عمق الساقين )تجلط الدم الوريدي العميق( والتجلطات في الرئتين )االنسداد الرئوي( وقد ثبت بانها ترتبط بعدد من االم ارض وتشمل هذه االم ارض تجلط الدم غير الطبيعي )thrombosis( في الش اريين واالوردة واالجهاضات المبكرة والتلقائية وان المرضى الذين يعانون من هذه المتالزمة يحصل لديهم جلطات دموية وايضا لديهم اضداد فوسفوليبيد قابلة للكشف عن طريق فحص الدم.[8,9] االستنتاجات نستنتج من هذه وجود عالقة بين حاالت اضط اربات الحمل والطف ارت الو ارثية التي تصيب الجين MTHFR في الموقع.A1298C كما نستنتج بعد ةياس متالزمات االجسام المضادة للفوسفولبيد والكارديولبين فان النتائج الموجبة للجسم المضاد IgG تواجدت في مجاميع التي شملتها الد ارسة بالنسبة للنساء اللواتي يعانين من اضط اربات الحمل وكانت اعلى مستوى لدى مجموعة النساء موجبة فحص ال. TORCH شكر وتقدير: بعد انتهاء كل عمل يتوجب ان نتقدم بالشكر والعرفان لكل من ساعد وسهل من اتمام هذا العمل لذلك كثيرون من هم يتوجب علينا شكرهم لكننا نخص شكرنا لجامعة الموصل وكلية العلوم على اتمام هذا العمل. المصادر 1- Chaithra, P., Malini, S. and Kumar, C. Int J Hum Genet.,11(4) : (2011). 2- Cao, Y., Zhang, Z., Zheng, Y., Yuan, W., Wang, J., Liang, H., Chen, J., Du, J., and Shen, Y. Genes Nuter., 9(3) :1-8. (2014). 3- Daniel, V. Biomed J., 37(4): 1-14.(2015). 4- Aly, R., Taalab, M., Ghazy. HInternational journal of clinical and experimental pathology, 7:2571. (2014). 139

11 5- Huo, Y., Li, J., Qin, X., Huang, Y., Wang, X., Gottesman, R., Tang, G., Wang, B., Chen, D., He, M., Fu, J., Cai, Y., Shi, X., Zhang, Y., Cui, Y., Sun, N., LI, X., Cheng, X., Wang, J., Yang, X., Yang, T., Xiao, C., Zhao, G., Dong, Q., Zhu, D., Wang, X., Ge, J., Zhao, L., Hu, D., Liu, L. and Hou, F. JAMA, 313: (2015). 6- Wang, X., Fu, J., Li, Q. and Zeng, D. Geographical and ethnic distributions of the MTHFR C677T, A1298C and MTRR A66G gene polymorphisms in Chinese populations: a metaanalysis. PLoS ONE, 11:e (2016). 7- Negin, J., Mohammad, H., Ali, A. Electron J Gen Med., 15(4): (2018). 8- Michel, T., Ali, D., Robert, D., Eric, L., Lilach, O. and Amir, L. J Am Coll Cardiol., 69(18) : (2017). 9- Jahromi, A., Farjam, M., Mogharrab, F., Amiryam, M. and Makiani, M. Am. J. Infect. Dis., 6: (2010). 10- Iranpur, V. and Esmailizadeh, A. JBM Journal of Biological Methods. (2010) 11- Sahel, T., Taher, M. and Hossein, R. Obstet Gynecol Int J., 8(2):1-6. (2017). 12- Cortese, C. and Motti, C. Public Health Nutr., 4: (2001). 13- Crider, K., Zhu, J., Hao, L., Yang, Q., Yang, T., Gindler, J., Maneval, D., Quinlivan, E., Li, Z., Bailey, L., and Berry, R. Am J Clin Nutr., 93: (2011). 14- Sheikhha, M., Kalantar, S., Ghasemi, N. and Soleimanian, S. Iran J Pediatr Hematol Oncol., 2(3): (2012). 15- Zhu, B., Xiahou, Z., Zhao, H., Peng, B., Zhao, H. and Xu, X. Biochemical and biophysical research communications,447: (2014). 16- Wong, C. Hong Kong Med J., 21: (2015). 17- Chandran, J., Anderson, G., Kennedy, A., Kohn, M. and Clarke, S. Int J Eat Disord., 48: (2015). 140

12 18- Nakamura, T., Nishi, M., Rikitake, M., Koga, D., Eto, J., Tajima, D., Toda, S., and Matsuo, M. Brain Dev., 41(11) :1 5. (2018). 19- Zhang, X., Hou, C., Liu, P., Chen, L., Liu, Y., Tang, P. and Li, R. Front. Neurol., 9:1162. (2019). 141