1 التكامل بين معاملة بذور الزينيا بمحلول ومعاملة التربة بمستخلص الشمبالن والبايواميون في السيطرة على الفطر Fusarium culmorum المنقول بالبذور رحمن عيسى سعيد* مدرس مساعد قسم وقاية النبات كلية الز ارعة rahmanissa5@gmail.com المستخلص كامل سلمان جبر أستاذ جامعة بغداد Kamil_s_juber@yahoo.com نفذت هذه الد ارسة لتقييم فعالية بعض المستخلصات النباتية والمبيد Beltanol في مكافحة الفطر Fusarium culmorum الم ارفق لبذور الزينيا واختبار مقدرته االم ارضية. بينت النتائج ظهور الفطر في %7. من العينات وبمعدل تك ارر %7.59. اظهرت نتائج اختبار المقدرة االم ارضية بطريقة ورق النشاف أن العزالت الخمس المختبرة لهذا الفطر احدثت خفضا معنويا )0.05( في نسبة إنبات بذور الزينيا واعطت العزلة A أعلى نسبة خفض في النبات بلغت %19. بينت النتائج المختبرية أن مستخلص البايواميون بتركيز %1 اعطى 000 %75.5 أعلى نسبة تثبيط للعزلة A مقارنة التي بلغت تاله مستخلص الشمبالن بتركيز ملغم/لتر إذ %59.9 بينما لم اعطى يؤثر مستخلص اللوتس.Nymphaea nouchali ظهر من إختبار تقييم فعالية مستخلصي الشمبالن والبايواميون والمبيد بلتانول إنها احدثت خفضا معنويا في نسبة وشدة المرض للعزلة A. حققت معاملة الفطر + المبيد أعلى خفض معنوي في نسبة وشدة المرض إذ بلغتا بمعاملة القياس %9.5 و %90 التي اعطت بالتتابع. لم تظهر فروق معنوية في نسبة وشدة المرض بين %.5 و %11 المستخلصين والمبيد وال بين معاملتي المستخلصين. تفوق المستخلصان على المبيد في احداث زيادة معنوية في الوزن الرطب والجاف للنباتات مع هذه العزلة, وفي إختبار تقييم فعالية التكامل بين معاملة البذور بمحلول والتربة بالمستخلصين, لدت جميع المعامالت إلى إحداث خفض معنوي في نسبة وشدة المرض للفطر. احدثت معاملة البذور بمحلول سواء كان لوحده أم مع أحد المستخلصين خفضا معنويا في نسبة وشدة المرض إال أن هذا الخفض كان أقل من الخفض الحاصل في المعامالت التي لم يستخدم فيها. الكلمات المفتاحية: المقدرة االم ارضية, نسبة المرض, شدة المرض, بلتانول. *البحث مستل من رسالة ماجستير للباحث األول The Iraqi Journal of Agricultural Sciences 46(1): 1-10, 015 Saeed & Juber INTEGRATION BETWEEN ZINNIA SEEDS OSMOPRMING WITH SOLUTION AND SOIL TREATMENT WITH COONTAIL AND BIOIMMUNE EXTRACTS TO CONTROL FUSARIUM CULMORUM TRANSMITTED BY SEEDS R. I. Saeed* K. S. Juber Assist. Instructor Prof. Dept. of Plant Protection Coll. of Agric. Univ. of Baghdad rahmanissa5@gmail.com Kamil_s_juber@yahoo.com ABSTRACT This study was carried out to evaluate the efficiency of some plant extracts and Beltanol to control the Fusarium culmorum with Zinnia seeds, and test its pathogenicity. Results showed the existence of fungus in 7.% of seed samples with 7.59% mean frequency. Pathogenicity test by using blotter method showed that all the 5 isolates caused a significant reduction (0.05) in Zinnia seeds germination. Isolate A gave the highest decrease in percentage germination (19%). Laboratory result showed that the Bioimmune extract 1% caused the highest growth inhibition of isolate A (75.5%) followed by coontail extract 000 mg/l (59.9%) while lotus Nymphaea nouchali extract did not give any effect. It was found that the Coontail, Bioimmune and Beltanol caused a significant reduction in disease incidence and severity. Beltanol + A treatment gave the highest significant decrease in percentage of disease incidence and severity, it was.5% and 11% compared with 9.5%and 90% in the control treatment respectively. There were not significant differences in the disease incidence and severity between the two extracts and Beltanol and extracts themselves. The two extracts gave superior significant increase in fresh and dry weight compared with Beltanol treatment. Seed treatment with solution caused a significant reduction in disease incidence, but it was less than reduction in treatments without. Key words: Pathogenicity, disease incidence, disease severity, Beltanol. *Part of M.Sc. thesis of first author
المقدمة نبات الزينيا Zinnia elegans Jacq يتبع إلى العائلة النجمية Asteraceae وهو نبات حولي ذو أزهار جميلة ذات ألوان ازهية 5( و 6 (, ويعد واحدا من نباتات األزهار الشائعة صيفا وخريفا واألكثر شعبية في مختلف انحاء العالم )5 و 9 (, وتعد الفطريات الم ارفقة للبذور من أهم المسببات المرضية على هذا النبات إذ تؤدي إلى تعفن البذور وعدم إنباتها, وموت الباد ارت قبل البزوغ وبعده وتقرح الجذور واصابة األج ازء الخضرية والزهرية من النبات بأنواع التبقع والتقرح والذبول والموت )6 و 8 و 10 8(, 14 وتصاب نباتات الزينيا في م ارحل نموها المختلفة بأنواع مختلفة من الجنس Fusarium التي تسب الباد ارت قبل البزوغ وبعده وت ع الفطر ويعد Saccarado ف ن ب لها تعفن البذور وموت الجذور وقواعد )Smith( السيقان, culmorum Fusarium واحدا من هذه الفطريات التي تنتقل عن طريق البذور وتصيب الجذور, كما أنه ذو مدى عائلي واسع )1(, اشار وقد )5( Desjardins إلى إصابة باد ارت الزينيا بهذا الفطر في البيت الزجاجي, واشير في بعض الد ارسات أنه إلى يسبب تعفن منطقة التاج )14( ويعد أحد أربعة فطريات مهمة تلحق الضرر بنباتات الزينيا في الحدائق العامة ببولندا )1(, وقد استعملت المبيدات الكيمياوية للحد الفطر مثل Thiram اإلصابة بهذا من وCarbidazin وT65 )4 Sarfun و 9 ( إال أن المبيدات الفطرية الكيمياوية تسبب سلسلة من المشاكل البيئية الخطيرة, وذات تأثير سام على الكائنات الحية غير المستهدفة, فضال عن نشوء المقاومة ضدها في المسببات المرضية )4(, ط ارئق ومواد صديقة للبي seed priming إتجه لذلك الباحثون للكشف عن ئة ومن تلك الط ارئق معاملة البذور التي تعد طريقة آمنة ورخيصة في مكافحة األم ارض المتسببة عن فطريات البذور ومنع تدهورها الحيوي,)7( واستعمال مستخلصات بعض النباتات التي اظهرت كفاءة عالية في مقاومة المسببات المرضية والسيما الفطرية, إذ انها متوفرة ورخيصة وسهلة التحضير )1(. كما اتخذت بعض األساليب والتقنيات التي من شأنها االس ارع في عملية اإلنبات وتنظيمها لتوفير مخرج للهرب من االصابة كاستخدام )( polyethylene )9 و (. لذلك هدفت glycol هذه الد ارسة إلى استخدام أسلوب التداخل والتكامل بين معاملة بذور الزينيا بمحلول الشمبالن والبايواميون في مكافحة الفطر المنقول ببذور الزينيا والحد من تأثيره الضار. المواد والط ارئق عزل الفطر وتشخيصه جمعت سبع عينات من بذور ومعاملة التربة بمستخلص الزينيا F. culmorum Zinnia elegans Jacq من سبع مناطق في بغداد للفترة من 01/7/ حتى 01/10/17 ووضعت كل عينة في كيس من البولي اثيلين سجل عليه اسم منطقة الجمع وتأريخ الجمع وحفظت في الثالجة بدرجة الحصول على المعفرة 4 4 م لحين اج ارء العزل منها. كذلك تم عينات من بذور الزينيا المستوردة التي يمتد تأريخ صالحيتها إلى عام 017.)1 رقم العينة 1 4 5 6 7 8 9 10 11 جدول 1. مكان وزمان جمع عينات بذور الزينيا الصنف Pink zinnia Red zinnia Yellow zinnia Pompon liliput منطقة الجمع كلية الزراعة / ابو غريب حي البنوك الزعفرانية الكريعات مدينة الصدر الدورة الزوراء مستورد مستورد مستورد مستورد مالحظة : البذور المستوردة غير معفرة. عقمت غير )جدول تاريخ الجمع 01/07 /0 01/07 /14 01/08 /0 01/08 /11 01/09 /08 01/10 /07 01/10 /17 01/1 /0 01/1 /0 01/1 /0 01/0 /01 400 الصوديوم )1 بذرة من كل عينة سطحيا بمحلول هايبوكلوريت % كلور حر( لمدة دقيقتين. بعدها غسلت بالماء المعقم وجففت بورق ترشيح معقم, وزرعت في أطباق بتري قطر 9 سم حاوية على الوسط الزرعي أكار الديكستروز والبطاطا بذور/طبق. (PDA( Potato Dextrose Agar حضنت األطباق في درجة ح اررة 10 بمقدار ± 5 5 4 لمدة أيام. نقيت المستعم ارت الفطرية النامية حول البذور بزرعها على PDA بطريقة البوغ المنفرد, وحضنت في درجة ح اررة النوع ± إلى مستوى الفطر شخص أيام. 7 لمدة م 5 اعتمادا على شكل المستعمرة وطبيعة نموها وشكل وتركيب األبواغ وطريقة حملها والت اركيب األخرى التي يكونها الفطر وباالستعانة بالمفاتيح التصنيفية المعتمدة )4 و 7 (, وتم حساب النسبة المئوية لتك ارر الفطر في كل عينة على وفق المعادلة اآلتية:
% لتك ارر الفطر = عدد البذور التي نما عليها الفطر مقسوما على العدد الكلي للبذور معب ار عنها بنسبة مئوية وتم حساب النسبة المئوية لظهور الفطر في العينات وفق المعادلة االتية: على % لظهور الفطر = عدد العينات التي ظهر فيها الفطر مقسوما على العدد الكلي للعينات معب ار عنها بنسبة مئوية اختبار مقدرته االم ارضية على بذور الزينيا بأستعمال طريقة ورق النشاف Bioimmune والبايواميون )Ceratophyllum الج ارء هذا االختبار انتخبت 5 عزالت للفطر culmorum.f )A وB6 وB11 وB9 وH17 ( )جدول (, فضال عن معاملة السيطرة, ويهدف هذا االختبار إلى معرفة تأثير هذه العزالت الفطرية في إنبات بذور الزينيا باستعمال طريقة النشاف. ورق نميت العزالت الفطرية على الوسط الز ارعي,PDA وبعد 7 أيام من عمر المزرعة حضر العالق البوغي باضافة 10 سم ³ من الماء المقطر المعقم وبشكل تدريجي لكل طبق بإستعمال فرشاة ناعمة, جمع العالق البوغي لكل عزلة في دورق زجاجي, ورشح خالل طبقتين من قماش الشاش, اضيفت الشد السطحي إليه قطرتان من الزيت المعدني باستخدام شريحة العد على 1 6 10 Tween 0 لكسر ومنع تكتل األبواغ, وحسب تركيز األبواغ Haemocytometer بوغ/سم وضبط التركيز لكل عزلة فطرية. غمرت بذور الزينيا صنف Red zinnia بالعالق البوغي لكل عزلة ولمدة نصف ساعة, أما معاملة السيطرة فقد غمرت البذور المقطر المعقم فقط, بعدئذ زرعت البذور في كل طبق على طبق وبعد النسبة المئوية لإلنبات. أو ارق نشاف وبمقدار مرطبة بالماء فيها أطباق يحتوي 5 أسبوع حسب عدد البذور النابتة ومنها بذرة لكل حسبت جدول. العزالت التي اختبرت إم ارضيتها بطريقة ورق النشاف العزلة A B6 B11 رقم عينة العزلة 1 8 B9 H17 تقييم فعالية بعض المستخلصات النباتية في تثبيط نمو الفطر إستخدم في هذا االختبار المستخلص الكحولي لك نباتنبات الشمبالن المائي Coontail ل من واللوت س الشمبالن nouchali( Lotus كامال,)Nymphaea جمع نبات من منطقة اليوسفية, وأو ارق اللوتس من متنزه الزو ارء ببغداد في اكياس بولي أثيلين, وجففت العينات داخل المختبر مع تقليبها بصورة مستمرة للحيلولة دون تعفنها. سحقت العينات بإستعمال مجرشة ذات غربال بحجم مش. جمع مسحوق كل من النباتين في مثبت عليها 1.5 أكياس بولي اثيلين إسم النبات ووزنه وتاريخ الجمع, وحفظ على درجة ح اررة 0 م لحين االستخدام. الشمبالن نبات مائي مغمور ال توجد لديه جذور ويشكل مستعم ارت كثيفة تغطي مساحات واسعة من المسطحات المائية ويمكن أن يبلغ طول الساق أكثر من 15 قدما )1( وظهر من تحليل هذا النبات أنه يحتوي على العديد من المركبات الفينولية المضادة لنمو المسببات المرضية ) و 6 (. اللوتس أو زنبق الماء يتبع العائلة Nymphaeaceae موطنه األصلي شبه القارة الهندية واست ارليا وتنمو جذوره سيقانه داخل الماء وتطفو فوق سطح الماء )(, أو ارقه و أزهاره وظهر في التحليل الكيمياوي ألو ارقه وجود السترويدات والفالفونيدات والتانينات وغيرها من المركبات المضادة لنمو ونشاط الكائنات المجهرية )6(. الحصول على مستخلص البايواميون تم من شركة الريف الخض ارء للتجارة العامة ببغداد وهو عبارة عن مستخلص لبعض االشنات البحرية ويعد مادة طبيعية تستخدم لمكافحة األم ارض الفطرية ويتصف أنه صديق للبيئة وال يحتاج مدة أمان حسب الشركة المذكورة, الشمبالن واللوتس باتباع طريقة إذ وضع حجم إلى وتم استخالص كل من Anessiny )(, وPerez 100 1 غم من مسحوق كل نبات في دورق زجاجي لتر, واضيف إليه 500 سم 4 وترك لمدة %70 جهاز الطرد المركزي كحول اثيلي بتركيز ساعة بعدها رسب المزيج باستخدام 000 دورة للدقيقة الواحدة لمدة 15 دقيقة, ورشح المستخلص بإستعمال قمع بخنر حاو على ورق ترشيح No.1.Whatman أعيد االستخالص مرتين وجمع ال ارشح الكلي وركز بجهاز المبخر الدوار evaporator Rotary عند درجة ح اررة م 40 فتكون مستخلص كثيف القوام وزنه و 5.98 اإلستعمال, للتخلص من المذيب, غم 6. غم للوتس ووضعا في المجمدة )-0 وحضر محلول للشمبالن لحين م ( أساس solution( )stock من demersum L.(
ح 1 ت 1 ح ت ح 1 ح 1 ت كل مستخلص بتركيز 0000 غم من كل مستخلص في 50 كل من المستخلصين بتركيز خالل اخذ إلى واضيف ملغم/لتر عن طريق إذابة 1 سم ماء مقطر معقم. استخدم 1000 1.5 سم و 5 سم 7.5 سم و 5 ملغم/لتر من و 000 من المحلول األساس سم المعقم والمبرد PDA وفق المعادلة االتية: إذ أن: : الحجم األول. : التركيز األول. : الحجم الثاني. : التركيز الثاني 1 ح بالتتابع, 1 ت = من الوسط الزرعي وقد تم حساب النتائج على ح 1000 50 = 0000 1.5 سم 000 50 = 0000 5 سم - 1 1 ح = - 1 ح = استخدم مستخلص و %1 (. المعقم والمبرد البايواميون اضيف كل مستخلص إلى درجة ح اررة بثالثة ت اركيز الوسط الزرعي مع )%1 و %6 PDA 45 صب الوسط في أطباق معقمة قطر م 9 الوسط لقحت األطباق في مركزها بقرص الوسط الزرعي بالتركيز المطلوب, سم. بعد تصلب 5 قطر PDA الحاوي على نموات العزلة ملم من A للفطر التي ثبتت ام ارضيتها العالية في االختبار السابق. 4 استخدمت لقحت بالفطر بمفرده, مكر ارت لكل معاملة,كما أطباق 4 استخدمت ووضعت األطباق في الحاضنة تحت درجة ح اررة ± 5 م على وفق التصميم تام التعشية, وقد جرى تنفيذ المعامالت االتية: سجلت النتائج بعد 7 أيام من الحضن بقياس القطرين المتعامدين لكل مكرر من مكر ارت كل معاملة, النسبة المئوية للتثبيط على وفق المعادلة اآلتية: وحسبت %للتثبيط = )متوسط قطر معاملة المقارنة متوسط قطر معاملة المعاملة ) مقسوما على متوسط قطر معاملة المقارنة معب ار عنها بنسبة مئوية. تقييم فعالية مستخلص الشمبالن والبايواميون والمبيد Beltanol في حماية النبات من االصابة بالفطر عقمت تربة مزيجية وبتموس ) عند درجة ح اررة التعقيم مرتين خالل 1 : وضغط م 11 أسبوع ولمدة وزعت الترب في اصص قطر حجم/حجم( بالموصدة 1.5 كغم/سم. كرر 60 17 دقيقة في كل مرة. سم بمقدار 100 F. غم تربة/اصيص واضيف لقاح العزلة A للفطر culmorum المنمى على بذور الدخن ال الى التربة بنسبة )وزن/وزن(. أما في معاملة السيطرة فقد اضيفت %1 إلى التربة بذور دخن معقمة وخالية من الفطر. كررت كل معاملة 4 م ارت. رطبت االصص وغلفت بأكياس البولي أثيلين المثقب لمدة أيام. بعد ذلك اضيف المستخلص الكحولي للشمبالن تركيز 000 ملغم/لتر ومستخلص البايواميون تركيز % 1 والبلتانول بتركيز %0.1 وبمقدار 40 أيام زرعت االصص ببذور الزينيا سطحيا بمقدار سم /أصيص وبعد Red zinnia 10 باكياس البولي اثيلين المثقب. المعقمة بذور/اصيص, وسقيت بحذر وغلفت أخرى رفعت أيام بعد مرور األكياس ووضعت االصص في البيت الزجاجي عند درجة م 7-0 ح اررة على وفق التصميم تضمنت التجربة المعامالت االتية: 1- العزلة + A مستخلص الشمبالن. - العزلة + A مستخلص البايواميون. - العزلة + A المبيد.Beltanol 4- العزلة A بمفردها. 5- سيطرة من دون فطر أو متخلص أو مبيد. 45 بعد المرض يوما من الز ارعة وقدر المرض سجلت تام التعشية, وقد النتائج بحساب نسبة وشدة باستخدام الدليل المرضي الذي وضعه Kiecana و )14( Mielncizuk مع ادخال بعض التحوير عليها وهو: الجذر و 0 ثلث إلى يمتد = تلون = النبات سليم و 1 = تلون أكثر من ثلث الجذر وحتى النصف و 1- العزلة A بمفردها. - مستخلص الشمبالن 1000 ملغم/ لتر + A. - مستخلص الشمبالن 000 ملغم/لتر +.A -4 مستخلص اللوتس 1000 ملغم/لتر +.A -5 مستخلص اللوتس 000 ملغم/لتر +.A -6 المستحضر الحيوي البايواميون % 1 +.A -7 البايواميون % 6 +.A -8 البايواميون % 1 +.A 4
م = تلون قاعدة الساق النبات, أكثر من نصف الجذر بقع وظهور = و 4 بنية على األو ارق وقدرت النسبة المئوية لشدة المرض تلون كامل الجذر مع = و 5 معادلة :)18( Mckinney 5 موت على وفق % لشدة المرض = )عدد النباتات من الدرجة 0 0 +..+عدد النباتات من الدرجة 5( 5 مقسوما على )العدد الكلي للنباتات ) معبر ا عنها بنسبة مئوية كما حسب الوزن الرطب والجاف للمجموع الخضري للنبات. تقييم كفاءة التكامل بين معاملة بذور الزينيا بال والتربة بمستخلصي الشمبالن والبايواميون الفطر F. culmorum 00 عوملت واخضعت لعملية التحضير حضرت في مكافحة بذرة بمحلول البولي اثيلين كاليكول أو التكييف.Osmopriming 9 قطر بتري أطباق 4 أو ارق ترشيح, صب في كل طبق اثيلين كاليكول ميغا باسكال سم ووضع في كل طبق 5 6000 )) سم من محلول البولي ذي قوة تناضحية 1.0.)0( وضع في كل طبق بذور بذرة من 50 الزينيا وختمت األطباق بالشمع ووضعت في حاضنة مظلمة عند درجة ح اررة ± 0 ذلك اخرجت أيام. بعد 5 لمدة البذور من األطباق وغسلت بماء الحنفية وغمرت في ماء مقطر معقم ثالث م ارت إل ازلة آثار. جففت البذور سطحيا بورق النشاف. اضيف لقاح العزلة A المنماة على بذور الدخن إلى االصص الحاوية على ترب معقمة على وفق ما ذكر في االختبار السابق. رطبت االصص وغلفت بأكياس البولي أثيلين المثقب لمدة الكحولي للشمبالن تركيز البايواميون تركيز مرور ايام, بعدها 000 %1 بمقدار 40 اضيف المستخلص ملغم/لتر, ومستخلص سم لكل أصيص. بعد أيام زرعت االصص ببذور الزينيا التي سبق أن عوملت بمحلول البولي أثيلين كاليكول بمقدار 10 بذور لكل أصيص, و 4 أصص لكل معاملة. وضعت االصص في البيت الزجاجي عند درجة ح اررة التصميم 7 على وفق م 0 تام التعشية. نفذت التجربة بالمعامالت اآلتية: 1 - بذور معاملة بمحلول و - الشمبالن + مستخلص + العزلة A بذور معاملة بمحلول + العزلة A + المستخلص البايواميون و - بذور معاملة بمحلول بمحلول فقط ( من دون فطر أو مستخلص ) بذور غير معاملة بفطر أو مستخلص. 45 بعد و 6 - يوما من الز ارعة سجلت النتائج بحساب نسبة وشدة المرض على وفق ما متبع في االختبار السابق. النتائج والمناقشة عزل الفطر وتشخيصه سجل الفطر Fusarium culmorum ظهو ار في عينات من مجموع 11 عينة وهي األولى والثانية والثامنة, أي أنه ظهر في %7. من العينات المدروسة, وبمعدل تك ارر قدره %7.59, وكان أعلى تك ارر له في العينة رقم التي جمعت من حي البنوك وهو %17.5, وقد اشار )1( Neergard إلى هذا الفطر كأحد األنواع الفطرية الم ارفقة للبذور وينتقل على سطحها وأنه ذو مدى عائلي واسع ويصيب المنظومة الجذرية, واشار )5( Desjarins إلى اصابته لباد ارت الزينيا تحت ظروف البيت الزجاجي, كما وجد Kiecana وMielniczuk )14( أنه يسبب تعفن منطقة التاج, فيما وجد )1( Szopinska أنه احد أربعة فطريات مهمة تلحق الضرر الشديد بنباتات الزينيا في الحدائق العامة ببولندا, ويعد تسجيل هذا الفطر على نباتات الزينيا األول في الع ارق. المقدرة اختبار االم ارضية بأستعمال طريقة ورق النشاف لعزالت الفطر على بذور الزينيا ظهر من نتائج هذا االختبار الذي اجري لمعرفة تأثير العزالت الخمس لهذا الفطر الم ارفق لبذور الزينيا بطريقة ورق النشاف أن جميع هذه العزالت احدثت خفضا معنويا في النسبة المئوية إلنبات بذور الزينيا قياسا بمعاملة السيطرة )جدول (, وقد ت اروحت نسبة االنبات في معامالت هذه العزالت بين 19 %84 قياسا بمعاملة السيطرة التي كانت نسبة اإلنبات في معاملتها اإلنبات في %98 واعطت العزلة A إذ كانت نسبة اإلنبات في معاملتها أعلى نسبة خفض %19, في حين اعطت العزلة H17 أقل نسبة خفض في اإلنبات بلغت %84 )شكل 1( على الرغم من أن نسبة الخفض في إنبات بذور الزينيا لمعظم عزالت هذا الفطر ليست عالية, أنها إال تعد مهمة حقليا, فضال عن تأثير بعض الفطريات والمسببات األخرى في الم ارحل اللالحقة من عمر النبات, في وتأثيرها المجموع الخضري والجذري وانعكاس ذلك على معدل نمو النبات وتزهيره )14(. قد يعزى التباين في تاثير العزالت في + العزلة A و 4 - العزلة A بمفردها و 5 - بذور معاملة 5
6 نسبة )1( إنبات بذور الزينيا والذي ربما يؤدي المحللة لخاليا العائل إلى السام التي تؤدي إلى فشل اإلنبات )15(. االختالف الو ارثي بين العزالت إلى االختالف في اف ارز األنزيمات أو اف ارز المواد االيضية ذات تأثير جدول. تأثير عزالت الفطر.F culmorum في إنبات بذور الزينيا النسبة المئوية لألنبات العزلة 19 A 6 B6 70 B11 64 B9 84 H17 98 السيطرة 7.91 L.S.D 0.05 شكل 1. تأثير العزلتين A وH17 في إنبات بذور الزينيا تقييم فعالية بعض المستخلصات النباتية في الفطر اوضحت نتائج هذا االختبار الذي جرى على العزلة )جدول تثبيط نمو A )4 أن المتستخلص الحيوي Bioimmune %1 احدث النسبة الشمبالن %75.5 تركيز أعلى نسبة تثبيط للعزلة تركيز A, وكانت هذه قياسا بمعاملة السيطرة تاله مستخلص 000 %59.9, بينما و 000 ملغم/لتر إذ كانت هذه النسبة لم يحدث مستخلص اللوتس بتركيزيه 1000 ملغم/لتر اي تثبيط لهذه العزلة. النتائج هذه اتفقت البيانات مع التي قدمتها شركة الريف الخض ارء عن المستخلص بايواميون والتي اشارت المستخلص ضد المسببات المرضية الفطرية. F. إلى فعالية هذا بالنسبة اما للشمبالن فإنه لم يستعمل سابقا كمادة مثبطة لنمو الفطريات, وظهور هذا المستوى المهم من التثبيط للفطر culmorum يؤكد وجود مواد مثبطة في هذا المتستخلص وهذا ما اكدته الد ارسات التي اجريت لتحليل هذا النبات كيميائيا فظهر القلويدات أنه يحتوي على نسبة مهمه من والكاليكوسيدات والفالفونيدات والمركبات الفينولية المثبطة لنمو مختلف أنواع الفطريات )16 و 6 (. جدول 4. تأثير المستخلصات النباتية في نمو العزلة A المعامالت مستخلص الشمبالن 1000 ملغم / لتر مستخلص الشمبالن 000 ملغم / لتر مستخلص اللوتس 1000 ملغم/ لتر مستخلص اللوتس 000 ملغم/ لتر المستخلص الحيوي البايواميون %1 البايواميون %6 البايواميون %1 السيطرة )العزلة بمفردها( L.S.D 0.05 نسبة التثبيط )%( 6.48 59.90 0.00 0.00 0.00 0.5 75.50 0.00.15 تقييم فعالية مستخلص الشمبالن والبايواميون والمبيد بلتانول في حماية النباتات من االصابة بالفطر احدث مستخلصا الشمبالن والبايواميون نسبة وشدة المرض للعزلة )جدول A خفضا معنويا في 5( قياسا بمعاملة السيطرة )الفطر بمفرده(, وحققت معاملة الفطر + المبيد أعلى خفض في نسبة وشدة المرض إذ بلغتا %.5 و %11 تلتها معاملة الفطر بايواميون فيها شمبالن + %5 و %15.5 ثم الفطر + %7.5 و %16 قياسا بمعاملة السيطرة %9.5 و %90 بالتتابع, إذ بلغتا ولم تظهر فروق معنوية بين المستخلصين والمبيد والبين المستخلصين في نسبة وشدة المرض, واحدث مستخلصا الشمبالن والبايواميون والمبيد زيادة معنوية في الوزن الرطب والجاف للنباتات قياسا بمعاملة السيطرة )الفطر بمفرده(, وتفوق المستخلصان على المبيد في إحداث زيادة معنوية في الوزن الرطب والجاف للنباتات مع هذه العزلة, إذ بلغ مستخلص بايواميون مستخلص الشمبالن الوزن الرطب معدل معاملة في الفطر + 1.05 غم 0.985 تلته غم ثم المبيد معاملة الفطر + 0.45 غم قياسا
7 بمعاملة السيطرة التي بلغ معدل الوزن الرطب فيها 0.85 غم, وبلغ معدل الوزن الجاف في معاملة الفطر + مستخلص البايواميون الشمبالن السيطرة 0.090 غم 0.087 غم ثم تلته المبيد معاملة 0.07 غم, 0.0 الفطر + مستخلص قياسا بمعاملة غم ولم تظهر فروق معنوية في الوزن الرطب والجاف بين معامالت المستخلصين. إن إنخفاض نسبة وشدة المرض معنويا وكذلك زيادة الوزن الرطب والجاف معنويا في جميع المعامالت التي إستخدم فيها مستخلصا الشمبالن والبايواميون والمبيد يدل على كفاءة المستخلصين في الحد من االصابة بالفطريات الممرضة فضال عن المبيد بلتانول الذي اثبتت الد ارسات السابقة انه ذو كفاءة عالية في السيطرة على األم ارض التي يسببها مدى واسع من الفطريات الممرضة )19(. جدول 5. تأثير مستخلصي الشمبالن والبايواميون والمبيد بلتانول في حماية نباتات الزينيا من الفطر culmorum F. 0.01 0.17 7.0 7.78 L.S.D 0.05 كما أن مستخلص البايواميون يحتوي على مواد مغذية ومنشطة للنبات تعمل على رفع كفاءته في الممرض وتقلل من مستوى االصابة كاألحماض واألمالح مقاومة الفطر األمينية والعناصر الكبرى والصغرى. كما يحتوي مستخلص الشمبالن على عناصر غذائية وأمالح ومعادن مغذية للنباتات ومنشطة لها )( تساعدها على مقاومة المسببات المرضية وتقلل من مستوى االصابة, ألنها تدعمها في بناء نسيج قوي يصعب على الفطر الممرض اخت ارقه وهذا ما يمكن مالحظته من خالل الزيادة المعنوية بالوزن الرطب والجاف للنباتات قياسا بالنباتات المعاملة بالمبيد, وربما تعمل هذه العناصر على تعزيز المقاومة الفسيولوجية للنبات من خالل تغيير مسار التفاعالت الحيوية كإنتاج األنزيمات والمواد الفينولية السامة للفطر الممرض,)0( أيضا على الكثير من المركبات مثل وااللديهايدات ويحتوي مستخلص الشمبالن القلويدات Alkaloids Aldehydes والكيتونات والفالفونيدات والفينوالت Flavonids والكاليكوسيدات Glycosides Phenols وغيرها ( المركبات بأجمعها مثبطة المرضية األخرى )5(. و 17 و 16 و 6 ( وهذه لنمو الفطريات والمسببات تقييم فعالية التكامل بين معاملة بذور الزينيا بال ومعاملة التربة بمستخلصي الشمبالن والبايواميون ادت جميع المعامالت إلى إحداث خفض معنوي في نسبة وشدة المرض الذي تحدثه العزلة A قياسا بمعاملة السيطرة )الفطر الممرض بمفرده( )جدول 6(, ولم تظهر فروق معنوية في نسبة وشدة المرض بين معاملتي الفطر + شمبالن ولا فطر + بايواميون كما في االختبار السابق, ومع أن معاملة البذور بمحلول سواء كان لوحده أو مع المستخلصين قد احثت خفضا معنويا في نسبة وشدة قياسا بمعاملة السيطرة إال أن هذا الخفض كان المرض لهذه العزلة أقل من الخفض الحاصل في المعامالت التي لم تستخدم فيها بذور معاملة ب فقد تفوقت معنويا المعامالت التي إستخدم فيها مستخلص الشمبالن والبايواميون في خفض نسبة وشدة المرض على معامالت البذور المعاملة ب العزلة, إذ بلغت نسبة وشدة المرض مع الشمبالن و %0.5 ومع البايواميون بمعاملة السيطرة )الفطر بمفرده( مع هذه %0 %5 و %19 إذ بلغتا فيها بالتتابع قياسا %95 و %91.5. كما اظهرت النتائج تفوق معاملة الفطر + معنويا على معاملة الفطر + + بايواميون في خفض نسبة وشدة المرض إذ بلغتا %55 و %51. قياسا بمعاملة الفطر + + بايواميون إذ بلغتا فيها %70 و %66.5 بالتتابع, ولم تظهر فروق معنوية بين معاملة الفطر + ومعاملة الفطر + + شمبالن, )6 أن جميع المعامالت المستعملة وبينت النتائج )جدول حققت زيادة معنوية في مؤش ارت النمو متمثلة في الوزن الرطب والجاف للنباتات المعاملة قياسا بمعاملة الفطر بمفرده, وقد تفوقت معاملة الفطر + شمبالن, والفطر + بايواميون معنويا في زيادة الوزن الرطب والجاف للنباتات على معامالت الفطر + إذ بلغ وزن الرطب والجاف لهذه المعامالت مع الشمبالن 0.985 غم و 0.08 غ ارم ومع البايواميون 1.14 غم و 0.094 غم قياسا بمعاملة الفطر + إذ بلغتا فيها 0.69 غم و 0.045 غم بالتتابع, ولم تظهر فروق معنوية في المعاملة الفطر+شمبالن الفطر+البايواميون الفطر+المبيد الفطر بمفرده بذور بمفردها نسبة المرض )%( شدة المرض )%( وزن النبات )غم( الجاف الرطب 0.087 0.985 0.090 1.050 0.07 0.45 0.0 0.85 0.079 0.810 Ketones 15.5 16.00 11.00 90.00.500 5.0 7.5.5 9.5.50
Fusarium 8 الوزن الرطب والجاف بين معاملة الفطر + إذ ومعاملة + شمبالن بلغتا في المعاملة األخيرة الفطر + 0.675 غم و 0.040 غم بالتتابع, بينما تفوقت معاملة الفطر على معاملة الفطر + + بايواميون معنويا + في زيادة الوزن الرطب والجاف غم و 0.0 بالتتابع. غم إذ بلغتا في المعاملة األخيرة إن انخفاض نسبة وشدة 0.61 المرض معنويا وزيادة الوزن الرطب والجاف معنويا في جميع المعامالت التي إستخدم فيها مستخلصا الشمبالن والبايواميون ومحلول قياسا بمعاملة السيطرة دليل على كفاءة هذه المركبات في الحد من االصابة بالفطريات الممرضة طريق اضعاف الفطر الممرض وتثبيطة إما عن )9(, أو عن طريق االس ارع في إنبات البذور وسرعة هروبها من االصابة )11(. جدول 6. تأثير التداخل بين مستخلص الشمبالن والبايواميون ومحلول في حماية نباتات الزينيا من شدة وزن النبات )غم( المرض الرطب الجاف )%( الفطر F. culmorum المعاملة نسبة المرض )%( 0.045 0.690 51. 55.0 فطر+ 0.040 0.675 55.00 60.0 فطر+ +شمبالن 0.0 0.610 66.5 70.0 فطر+ +بايو اميون 0.08 0.985 0.50 0.0 فطر+ شمبالن 0.094 1.14 19.00 5.0 فطر+ بايواميون 0.00 0.0 91.50 95.0 الفطر بمفرده 0.080 0.810 5.00 5.00 بذور بمفردها 0.095 0.890 1.5.50 بذور + 0.007 0.0 8.07 8.81 LSD 0.05 إن تاخر معاملة الفطر + عن معاملتي الفطر + شمبالن و الفطر + بايواميون في خفض نسبة وشدة المرض وزيادة الوزن الرطب والجاف تتفق مع النتائج التي ظهرت في د ارسات باحثين آخرين والتي لالصابة بأنواع الجنس اشارت إلى زيادة معنوية Fusarium بعد معاملة البذور ألن ذلك يؤدي إلى اخت ارق هذه الفطريات لهذه البذور والدخول إلى الجنين مما يوفر لها حماية ويمنع عنها المؤث ارت الخارجية ويوقف تأثير المستخلصات ) أما عن و 8 (. تفوق معاملة الفطر + على معاملة الفطر + + بايواميون وعدم وجود فروق معنوية بينها وبين معاملة الفطر + شمبالن في خفض نسبة وشدة المرض وزيادة الوزن الرطب والجاف, فهذا يتفق مع النتائج التي توصل اليها اظهرت )1( والتي أن مستخلص الكريب + Szopinska فروت حينما استخدم مع البذور المعاملة ب فأنه لم يكن له تأثير في أنواع الجنس ادى إلى نفوذ الفطريات المستخلص. إلى ألن محلول أعماق البذور وأوقف تأثير المصادر 1. Agarwal, V. K. and J. B. Sinclair. 1997. Principles of Seed Pathology. CRC Press. Boca Raton. FL. pp. 560.. Anessiny, G. and C. Perez. 199. Screening of plants used a green line. Folk medicine for antimicrobial activity. J. Ethnopharmacol. 9: 119-18.. Bankova, V., P. Ivanova, R. Christova and S. Dimitrova. 1995. Secondary metabolites of Ceratophyllum demersum. Hydrobiologia. 16: 59-61. 4. Booth, C. 1971. The Genus Fusarium, Commonwealth Mycological Institute, Kew, Surrey, England. pp. 7. 5. Desjardins, A. E. 006. Fusarium Mycotoxins Chemistry, Genetics and Biology, APS. Press. pp. 519. 6. Dimock, A. W. and J. H. Osborn. 194. An Alternaria disease of Zinnia. Phytopathology. : 7-81. 7. Domash, K. H., W. Gams and T. Anderson. 007. Compendium of Soil Fungi. Vol. I. Academic Press. Asubsidiary of Harcourt Brace. Jovanovich, Publ. pp. 859. 8. Gambogi, P., E. Triolo and G. Vannacci. 1976. Experments on the behaviour of the seed-borne fungus Alternaria zinniae. Seed Sci. Technol. 4: -40. 9. Gross, E. M., D. Erhard and E. Ivanyi. 00. Allelopathic activity of Ceratophyllum demersum L. and Najas marina spp. intermedia (wolfgang) Casper. Hydrobiologia. 506: 58-589. 10. Hagan, A. 009. Diseases of Zinnia in the Landscape and Their Control. Timely Information Agriculture and Natural Resources. Aburn University. pp. 676. 11. Halmer, P. 004. Methods to improve seed performance in the field. In: Seed Physiology: Applications to Agriculture (Eds. RL Benech Arnold, RA Sanchez), Food Product Press, New York, p. 15-166. 1. Hossain, M. M., K. M. Khalequzzaman, F. M. Aminuzzaman, M. R. A. Mollah and G. M. M. Rahman. 005. Effect of plant extract on
the incidence of seed-borne fungi of wheat. J. Agric. and Rural Develop. (1&): 9-4. 1. Jose, C. G., W. E. Kelso and D. A. Rutherford. 004. Spatial distribution of macron vertebrates inhabiting hydrilla and coontail beds in the Atchafalaya Basin. Louisiana. J. Aquat. Plant Manage 4: 85-91. 14. Kiecana, I. and E. Mielniczuk. 010. Fungi infected the Zinnia elegans Jacq.concerning susceptibility of cultivators to selected pathogens. Acta Sci. Pol. Hortorum 9(): 107-160. 15. Knogge, K. 1998. Fungal pathogenicity. Plant Biol. 1: 4-8. 16. Linn, J. G., R. D. Goodrich, J. C. Meiske and E. J. Staba. 197. Aquatic plant from Minnesota Part 4 Nutrient Composition, Water Resource Research Center, University of Minnesota. Bulletin. p. 0-55. 17. Lu, X. 007.Study on Chemical Constitutes of Ceratophyllum demersum L. M.Sc. Thesis, Northwest Univ. of Sci., Technol. pp. 54. 18. Mckinney, H. H. 19. Influence of soil temperature and moisture of infection of wheat seedlings by Helminthosporium sativum J. Agric. Res. 6: 156-17. 19. Meister, R. T. 000. Farm Chemical Handbook. Listing for Beltanol. Willough by OH 86. pp. 45. 0. Michel, B. E. and M. R. Kaufman. 197. The Osmotic potential of polyethylene glycol 6000. Plant Physiol. 51: 914-916. 1. Neergaard, P. 1977. Seed Pathology. Vol.I and II. MacMillan Press, London, pp. 1187.. Mohan, M. K., N. K. Sethiya and S. H. Mishra. 010. A comprehensive review on Nymphaea: A traditionally used bitter. J. of advanced Technol., Res. 1: 11-19.. Orlikowski, L. B. 001. Effect of grapefruit extract on development of Phytophthora cryptogea and control of foot rot of gerbera. J. of Plant Prot. Res. 41(): 88-94. 4. Patni, C. S.and S. J. Kolte. 006. Effect of some botanicals in management of Alternaria blight of rapeseed mustard. Ann. Pl. Prot. Sci. 1: 151-156. 5. Pinto, A., T. Rodrigues, I. Leite and J. C. Barbosa. 005. Growth retardations on development and ornamental quality of potted Zinnia elegans Jacq. Sci. Agric. 6(4): 7-45. 9 6. Pip, E., and K. Philipp. 1990. Seasonal changes in the chemical composition of Ceratophyllum demersum L. in small pond. International of Review of Hydrobiol. 75(1): 71-78. 7. Rishikesh, D. R., S. Miah, A. Haque and A. Islam. 01. Phytochemical and antimicicrobial of Nymphaea nouchali leaf national flower of Bangladesh J. of Drug Discovery and Therapeutics. 1(8): 64-69. 8. Seehachai, W. 009. Seed Transmission of Alternaria zinnia Causing Leaf Spot in Zinnia. M.Sc. Thesis, Graduate Kasetstart Univ. pp. 64. 9. Shafiei, M. and M. Ghobadi. 01. The effects of source of priming and post priming storage duration on seed germination and seedling growth characteristics in wheat (Triticum aestivum L.) J. of Agric. Sci. 4(9): 56-68. 0. Singh, A. K., M. B. Pandey and U. P. Singh. 007. Antifungal activity of an Alkalid Allosecurinine against some fungi. Mycobiology. 5(): 6-64. 1. Szopinsk, D. 011. Enhancement of Zinnia seeds by osmopriming and grapefruit extract treatment. Acta Sci. Pol. Hortorum Cultus. 10(): -47.. Szopinska, D. and A. Wojtaszek. 011. Effect of hydropriming on germination and location of fungi in Zinnia elegans Jacq. Seeds. Nauka Przyroda Technologie. 6: 1-1.. Szopinska, D. and S, Tylkowska. 009. Effect of osmopriming on germination, vigour and location of fungi in Zinnia elegans seeds. Phytopathologia. 54: -44. 4. Szopinska, D., H. Dorna and K. Tylkowska. 007. The effect of grape fruit extract on germination, vigour and health of cabbage, onion and Zinnia seeds. Rocz. AR Pozn. CCCT. XXXIII. Ogrodn. 41: 61-66. 5.Tabassum, N. and G. M. Vidyasagar. 01. Antifungal Investigations on plant essential oils. International J. Pharm., Pharmaceutical Sci. 5(): 19-8. 6. Tusanee, S. 1996. Selection and maintenace of male sterility on Pink Zinnia (Zinnia elegans ). Special Problem. Kasetastar University. pp. 19. 7. Van der Wolf, J., Y. Birnbaum, P. S. Zouwen and S. P. Groot. 008. Disinfection of vegetable seed by treatment with essential oils,
organic acids and plant extracts. Seed Sci. Technol. 6: 76-88. 8. Wei, Y., and H. Dorna. 006. Effects of priming, fungicide and biological treatments on onion (Allium cepa L.) seeds. J. Northwest Sci. Tech Univ. of Agric. 4(1): 54-66. 9. Wojdyta, A. 001. Grapefruit extract activity in the control of rose powdery mildew and black spot. Med. Fac. Landbouww. Univ. Gent. 66(): 167-177. 10