تأثير العوامل الحيوية على فسيولوجيا البكتيريا

النسخ

1 تأثير العوامل الحيوية على فسيولوجيا البكتيريا

2 توجد البكتيريا في بيئاتها مختلطه مع غيرها من الكائنات الدقيقه الحيه Mixed Culture. لمثل هذه تاثير المعيشه واضح على نمو تلك الكائنات وتأقلمها في بيئاتها مايكون غالبا للكائن الدقيق طرقا مختلفه للمحافظه على بقائه في مثل هذه البيئات.

3 انواع التضاد الحيوي أولا: التضاد الطبيعي: المضاد. للكائن نشط نمو وجود في ويتم ثانياا: المضادات الحيوية: التضاد دراسة باستخدام التحضيرات المضادات من التجاريه الحيويه.

4 المضادات Antibiotics الحيويه التضاد الطبيعي )الحيوي ) معيشة كائنين معا يعمل احدهما على احداث ضرر بالكائن الخر نتيجة لفرازه ماده كيماويه. عباره عن مواد كيماويه عضويه تتكون نتيجة للتفاعالت اليضيه لبعض الحياء الدقيقه والتي تكون ذات تاثير مبيد او موقف لنمو او نشاط غيرها من الكائنات الحيه الدقيقه بتركيزات قليله.

5 طريقة دراسة التضاد الطبيعي نمو الكائن المضاد المزارع تحت األختبار Lauria Bertani Agar (LB)

6 الطبق بعد التحضين Inhibition zone Inhibition zone

7 تأثير المضادات الحيوية على فسيولوجيا البكتيريا Effect of Antibiotics on Bacterial Physiology

8 طرق تأثير المضاد الحيوي على البكتيريا Mode of Action قد ي ؤثر على أحد العمليات التاليه في الخلية البكتيريه: Cephalosporin الجدار الخلوي )مثل: Penicillin تصنيع.)Vancomycin Bactiricin Tetracyclins Cholramphenicol البروتين )مثل: تصنيع.)Gentamycin Erythromycin Streptomycins )Quinolones الحمض النووي DNA )مثل: تضاعف )مثل: Rifampin ( RNA الحمض النووي تصنيع )Sulfanilamide بعض المكونات األيضية الرئيسية)مثل: تصنيع )Bolymyxin B : البالزمي )مثل الغشاء

9 اختبار الحساسية للمضادات الحيوية Antibiotic Sensitivity Test يهدف إلى تحديد حساسية عزلة من البكتيريا لمدى من المواد العالجيه. وقد تستخدم كوسيلة لدراسة ظهور طفرات مقاومة من البكتيريا لتركيزات محدده من المضاد الحيوي. له ارتباط وثيق مع تعريف األنواع البكتيريه. ت قاس الحساسية بتحديد أقل تركيز من المضاد الحيوي من ساعه 24 بعد البكتيريه السالله لنمو مثبط التحضين وهو ما ي سمى Minimum Inhibitory Concentration )MIC(

10 طرق دراسة تأثير المضاد الحيوي على البكتيريا ت ستخدم المضادات تأثيرها دون الحاجة الحيوية المحضرة تجارياا للتعرف لستعمال الكائن المضاد المفرز لها. طرق دراسة المضادات الحيوية المحضرة تجارياا:.1 طريقة األقراص Disk diffusion method وت سمى Bauer - Kirby method 2. طريقة التخفيف في وسط سائل. Broth dilution method أوفي وسط صلب Agar dilution method.3 إلى طريقة الطبق المتدرج Gradient Plate Method ويستخدم حالياا طريقة متطورة عنها تسمى.(Epsilometer) E-test

11 1- طريقة أقراص ورق الترشيح Disk Diffusion Method.1.2 تعتمد على استخدام أقراص مجهزة من ورق الترشيح محملة بتركيزات معلومة من المضاد الحيوي وهناك نوعان منها: األقراص المفردة Unidisk األقراص المتعددة Multidisc

12 1- طريقة أقراص ورق الترشيح Disk Diffusion Method األدوات المستخدمه: مزارع نقية حديثه ألنواع بكتيرية مختلفة أوساط غذائية مالئمة لدراسة حساسية المضاد ( media Mueller-Hinton أو )Blood Agar media أقراص محملة بمضادات حيوية مختلفة معلومة التركيز,ملقط. الخطوات: 1- بعد تعقيم الوسط لتتصلب تنقل على تحضن يلقح الغذائي األقراص باستخدام ملقط أبعاد متساوية تقريباا. م عند 37 الطباق بالبكتيريا معقم ثم بالتلهيب ي صب -24 ساعه. لمده 18 تدون 5- المالحظات Inhibition zone قطر بقياس وتسجل منطقة النتائج التثبيط حسب في الكحولي التالي. الجدول أطباق بحيث بتري يوضع معقمة, أكثر ثم من تترك قرص

13 اختبار النتشار خالل األقراص تظهر مناطق رائقه Inhibition zones حول األقراص المحملة كل منها بتركيز معروف من المضاد الحيوي.

14 جدول قياسي لتقدير درجة حساسية susceptibilityاو تأثر متوسط Intermediate أو مقاومة Resistant ألنواع مختلفة من المضادات الحيوية

15 - طريقة (Epsilometer) :E-test 2 تعتمد على مختلف من البالستيك. استخدام مجموعه معروفه من 15 تركيز المضاد الحيوي المختار محمله على شريط من يستخدم هذا الشريط لتحديد لنمو البكتيريا من المضاد. المثبط الدنى التركيز نطاق

16 خطوات إجراء اختبار :E-test بعد مرور فترة التحضين يالحظ ظهور شكل القطع الناقص حول الشريط بطريقة مرتبطه مع تركيز المضاد MIC )ميكروجرام /مل( وهذه القيمة تتوافق مع تركيز المضاد MIC المساعد لختيار العالج األمثل للمرضى.

17 مثال: اختبار E-test من المضاد الحيوي Vancomycin Staphylococcus aureus لبكتيريا من نوع

18 اختبار Etest باستخدام المضاد الحيوي Bio-Stat وهي تقنية تعطي تدريجاا من المضاد الحيوي وتعتمد على النتشار ويمكن تحديد MIC من خالل هذه التقنيه وموضحاا على الشريط عند نقطة اختفاء منطقة انعدام النمو.