l مجلة دانشگاه علوم پزشكي كرمان، دورة دهم، شمارة 2، ص ،1382

النسخ

1 مجلة داوشگا عل م پسشكي كرمان ديرة بيستيس م شمارة 3 ص مقالة پژوهشي تأثير خشک کردن در خالء بر ميسان عبور نور از پردهي آمنيون: مقايسه با قرنيهي خرگوش *2 1 1 تينا ديهيم قاسم يزدان پناه حسن نيک نژاد خالصه مقذمه: آ ي ت ذت ط ال ي پغ اص پي ذ )ت ػ ا خاي ضي لش ي ( دس چ تالي ي ا ذ و ت ا دذ تش س ي يضا ػث س س )ؿفافيت( ؤثش تاؿذ. ذف اص اي طا ؼ تشسػي يضا ؿفافيت آ ي پدغ اص خه وشد دس خالء ) ي في يضاػي ( مايؼ ي تايح آ تا ؿفافيت لش ي خش ؽ ت د اػت. روش: ؿفافيت پشد آ ي ت دػت آ ذ اص احي ي ديؼه پشيفشا )خاسج اص ديؼه( خفت ت كد ست تاص ي في يض ؿفافيت لش ي خش ؽ ا ا ذاص يشي ؿذ. تشاي حزف الي ي ا يپ ت يا اص ض آ ضي ي اػتفاد ؿذ. ػاختاس پشد آ ي تا س آ يضي ات وؼي ي ائ صي اػ تشيىش پشي ديه اػيذ ؿيف فشاػاختاس ػطح آ ا تا يىش ػى ج ا ىتش ي اس اسصيا يت ؿذ. يافتهها: ضا ؿفافيت آ ي ي في يض تفا تي تا تافت تاص ذاؿت. يضا ػث س س اص احيد ي ديؼده آ ي و تش اص احي ي پشيفشا ت د. حزف الي ي ا يپ ت يا تاػث افضايؾ يضا ػثد س د س اص پدشد ي آ ي ؿذ ت ط سيو ؿفافيت آ ي ؼاد تا ؿفافيت لش ي ي خش ؽ ؿذ. تشسػي يىش ػى ج ا ىتش ي ا داد و تالي ا ذ ػ ا يپ ت يا تاػث پخؾ س پغ اص ي في يضاػي ؿ ذ. نتيجهگيزي: تايح اي طا ؼ ا داد و تشاي افضايؾ ؿفافيت آ ي تشاي پي ذ چ ي ت تش اػت تا ػ ا يپ ت يا لث اص ذاسي تافت ا ت س ؽ ي في يضاػي حزف ؿ ذ. واصهه يا کليذي: آ ي ؿفافيت خه وشد دس خالء ) ي في يضاػي ( لش ي 9- پسشک عم مي گري مهىدسي بافت ي طب بازساختي داوشكد فىايريه يا بافت طب بازساختي داوشكد فىايريه يا * نويسنده مسؤول آدرس پست الكتزونيک: niknejad@sbmu.ac.ir و يه پسشكي داوشگا عل م پسشكي شهيد بهشتي تهران ايران 2- داوشيار فارمااك و شي گاري مهىدساي و يه پسشكي ي مركس تحقيقات واو تكى و شي پسشكي ي مهىدسي بافت داوشگا عل م پسشكي شهيد بهشتي تهران ايران دريافت مقاله: 9314/3/94 دريافت مقاله اصالح شده: 9314/7/23 پذيزش مقاله: 9314/3/93 308

2 ي هجل دا طگا عل م پشضک کزهاى مقذمه آ ي داخ ي تشي الي ي پشد خ ي ي اػت )1(. اي تافت خ اف خت في اص خ ت ظي ػيؼت اي )2( ت ظي سي صايي )3( ضذ ا ت اب )4( ضذ فيثش ص )5( ضذ تاوتشي )6( ضذ ػشطا )7-9( داسد و تاػث ؿذ اػت اص آ تشاي اسد خت ف تا ي ي اص خ پ ؿؾ صخ ا د ر ت ست س م ضوار 3 ػ خت ي پ ػتي )10 11( تاصػاصي خشاحي )12( ذػي تافت )13( اػتفاد ؿ د. اي تافت اص 5 الي ؿا الي ي ا يپ غاي ػ.)14 15( پاي الي ي اص ػا ا خت ف چ تح دس صخ ت يا )حا ي ػ فشد الي ي ضا ي ي( الي ي لث اص )16-18( اػف دي ت يا ( ا يپ فيثش تالػت )حا ي آ ي تشاي اص خ تاصػاصي تىي ؿذ اػت خشاحي ػط ح لش ي لش ي ػ خت ػ ذس اػتي - خا ؼ اخ ه چ ت ع وشات پات اػتفاد ؿذ اػت ت ػ ا ػ 19-22(. چ ي ت تاص ي,1( حا ػ ت يا ا يپ ت يا يد ت يا ا يپ آ ي اص لش ي دس ص ا ث د اػتفاد ؿذ اػت.)23-25( آ ي غ ي اص فاوت س اي سؿذ ا اػت و ت ا ذ سؿذ ػ ؿثا ت تشاي دس ا مق خ ي ػاختاس )ت خل ف ا اع ا يپ تي لش ي - III I ت يا سا ح ايت و ذ )14,26(. آ ي لش ي اي تافت سا لش ي اػة ػاخت اػت. ث د ػش ق ا ذ دػتدات فيثشي ي والط )IV دس غاي پاي يه اپيت ي اصن تاػث ؿذ اػت تا آ ي ت ػ ا خاي ضي لش ي اػة تاؿذ )27 28(. لش ي ت ػ ا يه تافت ؿفاف اص ػاختاس اي داخ ي چ ت ػي ي خزب يا خ يشي اص س د تؼضي اص ط س حافظت ج يو ذ )29(. وذ ست لش ي آ ط يه آ ي خاي ضي لش ي تشاي پي ذ چ ي ا يت داسد. ا داد ؿذ اػت و آ ي ت ا ذ دس حا ت ا ي ي 10 حذال ا پغ اص پي ذ تالي خ د دس اػتش اي ت ا ذ لش ي تشاي )30(. چ ي ا ي و آ ي ت ػ ا داستؼت تشاي ذػي )1( تافت چ يا حا ػ سد )25( ت يا يد اػتفاد لشاس ي يشد ؿفافيت آ اص ا يت خاكي تشخ سداس اػت و يت ا ذ ويفيت ديذ سا تحت تأثيش لشاس د ذ. فشآي ذ اي آ ي پغ اص خذاػاصي خت ف ذاسي چ سد اػتفاد لشاس يشد. ذاسي تشاي freeze-drying( اص خفت ت ػط يؿ د تا دس خشاحي اص س ؽ يىي شػ آ ي خه وشد دس خالء يا ي في يضاػي ( اػت. دس اي س ؽ ذاسي آب تافت ت س ؽ تلؼيذ خاسج ي ؿ د. آ ي پغ اص ي في يضاػي ت ا ذ دس د اي اتاق تشاي ذت ط ال ي ذاسي ؿ د پغ اص اػتشي وشد تا اؿؼ سد اػتفاد لشاس يشد خ اف فيذ )31(. ا داد ؿذ اػت و آ ي پغ اص ي في يضاػي حفظ ؿ ذ يت ا ذ دس و ي يه اػتفاد ؿ د اي س ؽ تأثيش تاو تش س ي )32(. ي يضا ػث س س آ ي )ؿفافيت( سد تشسػي لشاس شفت اػت. چ ي ا داد ؿذ اػت و تفا ت ايي دس يضا وذ ست آ ي تش اػاع ح ي اص خفت و اص آ خذا ؿذ اػت خ د داسد و يت ا ذ ويفيت تي ايي سا پغ اص پي ذ چ ي د ذ لشاس تأثيش تحت )33(. تا ت خ ت طا ة روش ؿذ دس اي طا ؼ دس ظش اػت تا تأثيش س ؽ ي في يضاػي ت شا تغيش ايي اص خ ح خذاػاصي الي ي ا يپ آ ي اص خفت ) احي ي ديؼهيا پشيفشا ( ت يا دس يضا ػث س س اص آ ي سد 309

3 ي ا ي يشي يشي اثز ل ف ل شاس ى تز عث ر ر اس آه ى... تشسػي ت ػ ا ذ حي روش بزرسي اص پغ لشاس يشد تايح تا ؿفافيت لش ي ي تأي ذي مايؼ ؿ ذ. خش ؽ و يت اخالق دس پظ ؾ دا ا ػ پضؿىي ؿ يذ ت تي 30 ػذد خفت اص د ذ تاسداسي 36 تا 38 فت في اص ظش يش ع مق اي اوتؼاتي پاتيت B تا ػ د ن وکاراى C ت دػت آ ذ ذ. پغ اص ا تما خفت ا ػا تي شاد ت آص اي ا ؿذ ؿؼت داد ؿذ احي ي ػيف يغ پغ اص ػضاسي ا تخاتي 4 دس د اي.)34( ديؼه احي ي دسخ آ ي اص و سي خذا ػپغ پشد پشيفشا ت ا ذاص آ ي اص 2 5 ػا تي تش شتغ تشيذ ؿذ ذ. احي ي ديؼه تشاتش تا آ ي تش س ي ديؼه خفت احي ي پشيفشا ؼاد تا 2 ػا تي تش تيش اص ث ي ديؼه دس ظش شفت ؿذ ذ )ؿى 1 ا ف(. پشد آ ي لشاس شفت تش س ي ػش يىغ لؼ ت تحتا ي سح دس اي طا ؼ اػتفاد ذ ذ. خشک کزدن در خالء خه وشد دس خالء پشد آ ي ت ك ستي و دس لث ت ضيح داد ؿذ اػت )26( ك ست شفت. ت ط س خالك پشد 30 ت ذت اتتذا آ ي خذاػاصي دليم دس د اي -20 ؿذ پغ اص ؿؼت دسخ ي د ذ ؿذ ذ ػپغ دس دػت ا ي في يضات س ػا تي شاد (ModulyoD, Thermo Electron Corporation, USA) ػا تي شاد ت ذت 55- دس د اي 24 شفت ذ. لث اص ش آص ايؾ پشد 60 ت ذت آت يشي لشاس شفت ذ. دسخ ي ػاػت تحت ي في يضاػي لشاس آ ي ي في يض ؿذ دليم دس تافشفؼفات ػا ي دذدا دس ؼشم جذاساسي قزنيه خزگوش دس اي پظ ؾ اص لش ي 6 خش ؽ تا غ ػفيذ ظاد ي ص ذي )تا ص حذ د 2.5 وي ش ػ حذ د 4 ا ( اػتفاد ؿذ. خش ؽ ا تا اػتفاد اص تضسيك دس كفالي د ص تاالي ػذي پ ت تاستيتا وت ؿذ ذ. پغ اص خذاوشد دليك وش ي ش د چ لش ي اص تافت اطشاف خذاػاصي ؿذ دس تافش فؼفات ػا ي تا ص ا ا ذاص ؿذ. انذاسهگيزي ميشان عبور نور ا ذاص يشي تشاي آ ي لش ي ي يضا ػث س س اص ا ذاسي خش ؽ اص دػت ا اػپىتش ف ت تش UK( )Cecil, اػتفاد ؿذ. پغ اص لشاس داد آ ي لش ي دس تي د ال تاخ سد ي ج ت ك ست حثاب ا دسكذ ػث س س شئي 600 ا تش ا ذاص 450 شط ب تذ دس ط ؿذ. د ال شط ب ؿذ ت ػ ا تال ه دس ظش شفت ؿذ. يضا ػث س س ػ طم ي ا ذاص يشي ؿذ. ػث س س تفا ت اص ش دس ش ط ج آ ي چ ي ت ك ست ويفي تا اػتفاد اص ت ا ايي خ ا ا ت د يه و اص طشيك ؿذ. پشد آ ي تشسػي ػا تي تش 3 آ ي تاالي كفح داؿت ؿذ ذ ػىغ ا اص فاك ي ثاتت شفت ؿذ ذ. حذف اليهي ا يپ تليال تشاي حزف الي ي ا يپ %0/03 تشاي تشيپؼ ي - EDTA ت يا ا دس ح آ ضي ي 10 دليم لشاس داد ؿذ ذ. ػپغ تافت ا تا تافش فؼفات ػا ي ؿؼت ؿذ ذ ػ 310

4 )Sigma-Aldrcih( تشاي هجل دا طگا عل م پشضک کزهاى ا يپ ت يا ت آسا ي تا اػتفاد اص واسدن ػ تذ آػية ت غاي پاي حزف ؿذ ذ. بافت شناسي د ر ت ست س م ضوار 3 2 ػاػت دس د اي اتاق لشاس شفت ذ. ػپغ ا ت ذت 10 دليم دس ػشي غ ظت اتا %25( %50 %75 %95 )%100 تشاي آت يشي لشاس داد آ ي ي في يض ؿذ پغ اص فيىغ ؿذ دس فش ا ي %10 دس پاسافي غ ط س ؿذ ذ ت ػي ي ىش ت ت ضخا ت پغ اص آ ائ صي تشاي (Periodic acid-schiff) PAS تافتي 4 ىش تشي تشيذ ؿذ ذ. آ اد ؿذ تا اػتفاد اص ات وؼي ي س آ يضي ت تش ػ ا تشاي ايؾ غاي پاي اػ تشيىش تشاي ا ذ ي اػة ػ ا ت شا ػاختاس پاي س آ يضي غاي والط ي ؿذ تا اػتفاد اص ىش ػى ج سي تشسػي ؿذ ذ Japan(.)Olympus, انذاسهگيزي ضخامت ضخا ت اػتفاد اص ش افضاس ImageJ آ ي ي في يض ؿذ تا (National Institutes of Health, تشسػي Bethesda, Maryland, available at: ػىغ تافت ؿ اػي ت ي ؿذ ا ذاص يشي ؿذ. ضخا ت 5 طم اص ش ا ذاص يشي ؿذ يا ي آ ا ت ػ ا ضخا ت تافت دس ظش شفت ؿذ. ميکزوسکوپ الکتزوني نگاره ػطح ت ك ست آ ي تاص ي في يض ؿذ تذ ػ تا اػتفاد اص يىش ػى ج ا ىتش ي ا و لثال تيا ؿذ اػت )26( سد اسصيا يت شفت. آ ي دس تاسآ ذ يذ اس لشاس %2/5 تشاي 24 ػاػت دس د اي 4 دسخ ي ػا تي شاد فيىغ ؿذ ذ ػپغ تحت فيىؼياػ ثا ي دس تتشاوؼيذ اػ ي %1 ؿذ ذ. پغ اص آ critical point dryer آ ي دس دػت ا خه ؿذ ذ ػط ح آ ا تا اػتفاد اص الي ي 10 ا تشي اص طال پ ؿا ذ ؿذ. دس ايت ا تا اػتفاد اص يىش ػى ج ا ىتش ي اس ( Hitachi, Field )Emission Scanning Electron Microscope, Japan ا ذ ؿذ ذ. آناليش آماري تايح ت ك ست يا ي ± خطاي اػتا ذاسد اص يا ي ا داد ؿذ ا ذ. آ ا يض اي آ اسي تا اػتفاد اص ش افضاس graphpad prism ي شيؾا 5.04 آص ANOVAيه طشف پؼاآص Tukey s ك ست شفت. نتايج پغ اص آت يشي آ ي ي في يض ؿذ تشاي يه ػاػت دسكذ ػث س س اص آ ي خذاؿذ اص احي ي پشيفشا تشاتش تا %39/3±4/43 دس 450 ا تش ت د و تفا تي تا آ ي پشيفشا تاص ذاؿت )%42/63±3/82 دس 450 ا تش(. چ ي دس احي ي ديؼه ؿفافيت پشد مايؼ تا آ ي پغ اص ي في يضاػي دس تاص وا ؾ يافت ي ؼ اداس ث د )ت تشتية %15/59±3/17 دس مات %23/76±3/32 دس 450 ا تش(. ت ػال تايح ا داد ذ و آ ي خذا ؿذ اص احي ي پشيفشا ؿفافتش اص تافت احي ي ديؼه يتاؿذ و اي حا ت پغ اص ي في يضاػي يض خ د داؿت )ؿى 1 ب(. 311

5 اثز ل ف ل شاس ى تز عث ر ر اس آه ى... د ن وکاراى شکل 1: الف( اح ا جفت ک پزد آه ى اس آ ا جذاساس ضذ. پزد آه ى جذاضذ اس د سک تافت لزار گزفت تز ر د سک جفت ت د پزد آه ى پز فزال ت تافت تا حذالل فاصل 2 سا ت هتز اس لث د سک اطالق ضذ. ب( ضفاف ت )درصذ عث ر ر هزئ ( اح ا پز فزال د سک پزد آه ى تاس ل ف ل ش ضذ ن چ ي ضفاف ت لز خزگ ش. ضفاف ت پس اس ل ف ل شاس ى در ز د اح پز فزال د سک تغ ز کزد. حذف ال اپ تل لا افشا ص داد. ضفاف ت لز خزگ ش لاتل هما س تا و ا تذ ى سل ل ا اپ تل لا لثل اس ل ف ل شاس ى در و ا ز د اح ت ص رت هع ادار ضفاف ت آ ا را ت د. (**P<0.01, *** P < 0.001) الي ي غاي تشسػي اػف دي تافتي پاي الي ي ؼت ذ ا داد و ػ پشد آ ي سا و ؿا فشد الي ي آ ي ي في يض ؿذ پ ح يه الي ي سا ا داد. مايؼ ي ا يپ ت يا ا يپ فيثش تالػت الي ي تافت ؿ اػي احي ي پشيفشا تا ديؼه پغ اص ي في يضاػي ت يا احي ي ت ك ست ديؼه اػت ا اي ؼت ذ ؼت داسد. دس حا ي و ػ ت ك ست ىؼثي تا ؼت حزف ػ ذ اػت )ؿى 2(. آ ا دس ل ي ػ ا خ د ا يپ ت يا دس احي ي پشيفشا شوضي ت د ذ. چ ي ا يپ ت يا دش ت آػية ت غاي پاي 312

6 هجل دا طگا عل م پشضک کزهاى د ر ت ست س م ضوار 3 اپ تل لا شکل 2: عکس ا تافتض اس و ا پزد ا آه ى ل ف ل ش ضذ اس اح ا پز فزال د سک. پزد آه ى پز فزال تا سل ل ا ل ف ل ش ضذ )الف( پزد آه ى پز فزال تذ ى سل ل ا اپ تل لا ل ف ل ش ضذ )ج( پزد آه ى د سک تذ ى سل ل ا اپ تل لا ل ف ل ش ضذ )ب( پزد آه ى د سک تا سل ل ا اپ تل لا ل ف ل ش ضذ )د(. ت ي سل ل ا اپ تل لا اح د سک پز فزال تفا ت ساختار ج د دارد. ه ارد الف ب ر گ آه ش وات کس ل ي ائ س ي ه رد ج ر گ آه ش هاس ى تز کز م ه رد د ر گ آه ش اس ذ ض ف است ک عذم آس ة غطا پا را پس اس حذف ال اپ تل لا طاى ه د ذ. )تشرگ وا 444( تشاي تشسػي ػطح ا يپ ت يا آ ي پغ اص تي اس اي خت ف اص يىش ػى ج ا ىتش ي اس اػتفاد ؿذ. ا ط س و دس ؿى 3 ا داد ؿذ اػت تايح ىش ػى ج ا ىتش ي اس ا داد و آ ي تاص يه الي ييىپاسچ ي دػت خ سد اص ػ ا يپ ت يا آ ي داسد. پغ اص ي في يضاػي ماديش صيا يد اص تالي ا ذ ػ ي تش س ي غاي پاي ي آ ي ديذ ؿذ ي حزف ػ ي في يضاػي تاػث ايداد يه ػطح كاف ؿذ. ا يپ ت يا لث اص 313

7 ي ويف اثز ل ف ل شاس ى تز عث ر ر اس آه ى... د ن وکاراى شکل 3: تزرس تا ه کز سک ج الکتز گار اس سطح اپ تل لا تا حذف لثل سل ل ا اپ تل لا )ج(. پزد آه ى تاس ک ال کپارچ اس سل ل ا اپ تل لا دتز ا سل ل تز ر غطا پا ه ت ا ذ تاعث پخص ر ض د )ب( حذف سل ل ا اپ تل لا پزد آه ى تاس )الف( پس اس ل ف ل شاس ى )ب( پس اس ل ف ل شاس ى صاف ه ض د )ج(. آه ى طاى ه د ذ )الف(. جوع ضذى لثل اس ل ف ل شاس ى تاعث ا جاد ک سطح تا ت خ ت تأثيش احت ا ي ػ ا يپ ت يا آ ي تش س ي دسكذ ػث س س پغ اص ي في يضاػي اي ػ ا لث اص ا دا ي في يضاػي اص آ ي حزف ؿذ ذ. تايح ا داد و دس ش د احي ي ديؼه پشيفشا ؿفافيت آ ي افضايؾ يياتذ ت ط سيو يضا ػث س س اص پشد آ ي احي ي پشيفشا تا %95 دس 600 ا تش افضايؾيافت. چ ي اختالف ؿفافيت تي آ ي ديؼه پشيفشا و پغ اص ي في يضاػي ديذ يؿذ تا حزف ػ ا يپ ت يا لث اص ي في يضاػي اص تي سفت دسكذ ػث س س اص ش د احي ي ديؼه پشيفشا تشاتش ؿذ. ت ػال مايؼ ي دسكذ ػث س س اص لش ي ي خش ؽ تا آ ي ا داد و آ ي پشيفشا و لث اص ي في يضاػي ػ صدايي ؿذ اػت ضديه تشي ؿفافيت سا تا لش ي ي خش ؽ داسد. ػال تش تايح تيا ؿذ تشسػي مايؼ اي ػىغ شفت ؿذ تشاي ا داد ؿفافيت پشد يپ يپ يپ يپ يپ يپ ي آ ي ا داد ذ و ػث س س پغ اص حزف ػ ا ت يا آ ي ت ث د يياتذ. آ ي پشيفشا و ا ت يا آ لث اص ي في يضاػي حزف ؿذ ػ ت د ذ ؿفافتشي تافت سد اسصيايت ت د )ؿى 4(. پغ اص ي في يضاػي يا ي ضخا ت پشد آ ي ا ت يا وا ؾ يافت ي دس مايؼ تا تا ػ تاص اص ظش آ اسي ؼ اداس ث د. ت ػال ا ذ آ ي ديؼه تيتش اص تاص ضخا ت پشد پشيفشا ت د ) آ ي پشيفشا تا ػ ا ت يا ي في يض ؿذ 43/5±10/1 ىش تش دس مات ا ت يا ي في يض ؿذ 105/34±7/09 ديؼه تا ػ ىش تش ؿى 5(. چ ي حزف الي ي ا ت يا لث اص في يضاػي تاػث وا ؾ ؼ اداس ضخا ت آ ي پشيفشا ديؼه ؿذ ي اختالف ضخا ت تي ديؼه چ ا خ د داؿت. 314

8 هجل دا طگا عل م پشضک کزهاى د ر ت ست س م ضوار 3 شکل 4: تزرس ک ف پزد ا آه ى ت ا ا خ ا ذى کلو "Ophthalmology" را اس طز ك پزد آه ى ت ع اى ضاخص ضفاف ت پزد آه ى طاى داد. پزد آه ى پز فزال ک لثل اس ل ف ل شاس ى سل ل سدا ضذ ت د ت طتز ي ضفاف ت را داضت. شکل 5: تأث زات ت وار ا هختلف تز ضخاهت پزد آه ى. اح د سک ضخ ن تز اس اح پز فزال در ز د تافت تاس ل ف ل ش ت د است. حذف ال اپ تل لا تاعث کا ص ضخاهت پزد آه ى در اح د سک ل ف ل ش ضذ ه ض د. (0.05>p*) 315

9 ي ي ا اثز ل ف ل شاس ى تز عث ر ر اس آه ى... بحث ضاسؽ ت د ثا خ اف تؼياس فيذ ت شا صيؼتػاص اسي آ ي )35( اي تافت ت ك ست ؼتشد اي دس پضؿىي ت يظ چ پضؿىي اػتفاد ؿذ اػت دس اوثش اسد تش س ي ػطح چ پي ذ صد يؿ د )1(. تا ت خ ت تالي ا ذ آ ي ت ك ست ط ال ي ذت دس اػتش اي چ ؿفافيت آ مؾ ي دس ويفيت ديذ داسد. چ ي ا داد ؿذ اػت و احي اي اص خفت و آ ي اص آ خذا ؿذ اػت يت ا ذ دس ت ا ايي ػث س س اص داؿت تاؿذ تأثيش آ ي د ن وکاراى )30 33(. ت اتشاي پظ ؾ حاضش تا ذف تشسػي تأثيش ي في يضاػي ت ػ ا يه س ؽ اػتا ذاسد تشاي ذاسي ا يپ آ ي لث اص خشاحي تش يضا ؿفافيت آ ي ت شا تغيش اي احي ي خذاػاصي تافت الي ي ت يا ا دا ؿذ. ذف ا ي اص اي طا ؼ تشسػي تأثيش ي في يضاػي تش س ي ؿفافيت آ ي ت د. ي في يضاػي يه س ؽ اػتا ذاسد تشاي ذاسي آ ي لث اص پي ذ تاؿذ و اتشيىغ خاسج ػ ي اد ضش سي آ ي سا تشاي پي ذ چ ي حفظ يو ذ )36(. تا ت خ ت تايح س ذ ي في يضاػي ؿفافيت آ ي سا افضايؾ يد ذ حتي ؿفافيت آ ي ديؼه پغ اص ي في يضاػي وا ؾ يياتذ. دس مات ا ت اي تيد سػيذي و حزف ػ ؿفافيت پشد ا يپ ت يا لث اص ي في يضاػي آ ي ديؼه پشيفشا سا افضايؾ د ذ. ا ط س و دس تايح يىش ػى ج ا ىتش ي اس ا داد ؿذ اػت ت ظش يسػذ تالي ا ذ ػ ي تش س ي آ ي ي في يض ؿذ تاػث پخؾ ؿذ س وا ؾ ؿفافيت آ ي يؿ ذ. ت اتشاي تشاي ت ي وشد ػث س س اص آ ي ضش سي اػت تا آ ي لث اص ي في يضاػي ػ صدايي ؿ د. ت خي اختالف يضا ؿفافيت پشد ديؼه سا يت ا دس تشسػي آ ذ اص دس تاال تيا ؿذ اػت ػ آ ي پشيفشا تافت ؿ اػي ت ػ ي في يض ؿذ ت دػت آ سد. ا ط س و ا يپ ت يا آ ي احي ي ديؼه اص ظش ػاختاسي )اػت ا اي ؿى ( تا ػ احي ي پشيفشا ) ىؼثي ؿى ( تفا ت داس ذ. اي تفا ت ػاختاسي و پغ اص ي في يضاػي يض خ د داسد يت ا ذ دي اختالف ؿفافيت تي پشد آ ي ديؼه پشيفشا تاؿذ. ت اتشاي ا ط س و ا داد ؿذ اػت پغ اص حزف ػ ا يپ ت يا يضا ؿفافيت پشد آ ي پشيفشا ديؼه تايىذي ش تشاتش ي ؿ د. ا ثت اختالف ضخا ت تي پشد آ ي ديؼه پشيفشا ي ض ي ت ا ذ د ي ي تش اختالف ؿفافيت اي د تافت تاؿذ چ پغ اص حزف ػ ا يپ ت يا چ ا تفا ت ضخا ت تي اي د تافت خ د داسد دس تيد ت ظش يسػذ ضخا ت مؾ اػاػي دس ت ا ايي ػث س س اص پشد آ ي ي في يض ؿذ ذاسد. اي تايح تش خالف طا ؼ ي ػا 2010 و ىاسا )33( تاؿذ و تيا وشد ت د ذ و آ ي خه ؿذ دس خالء ت دي وا ؾ ضخا ت اص ؿفافيت تيتشي تشخ سداس اػت. تشسػي ػث س س ا دس اي طا ؼ چ ي تش س ي مايؼ ي خش ؽ ت ػ ا يه ذ حي آ ي تا ؿفافيت لش ي ي ت شوض داؿت اػت. تايح ا داد ا ذ و ؿفافيت ش د احي ي ديؼه پشيفشا آ ي تا ػ ا يپ ت يا )ت ك ست تاص يا ي في يض ( ت ك ست ؼ اداسي و تش اص لش ي ت د ي حزف الي ي ا يپ ت يا تاػث ػث س س ات تا ػث س س اص لش ي ي خش ؽ ؿذ. ت اتشاي تا ت خ ت اي تايح ت كي 316

10 هجل دا طگا عل م پشضک کزهاى ؿ د و ػ ا يپ ت يا آ ي لث اص ي في يضاػي حزف ؿ ذ تا ؿفافيت افضايؾ ياتذ. نتيجه گيزي اي طا ؼ ا داد و ي في يضاػي ؿفافيت پشد آ ي سا دس مايؼ تا حا ي و حزف ػ ا يت ي پ تاص تغييش يد ذ دس ا لث اص ي في يضاػي تاػث افضايؾ ػث س س اص آ ي يؿ د ت ط سيو ؿفافيت آ ي ؿثي ت ؿفافيت لش ي ي خش ؽ يؿ د. طا ؼات تيتشي تشاي ت ي وشد د ر ت ست س م ضوار 3 ؿفافيت آ ي طي ي في يضاػي پغ اص پي ذ سد ياص اػت. سپاسگشاري تذي ػي ا آيتهلل ك ي ا ػشفا تي اسػتا ػ اتاق واسو ا اص طا ما ي ت شا و دس ت ي تافت ىاسي د ذ لذسدا ي ي ايي. پضؿىي ػ ي اػتخشاج ؿذ اػت. اي ما اص تايح پايا ا References 1. Meller D, Pauklin M, Thomasen H, Westekemper H, Steuhl KP. Amniotic membrane transplantation in the human eye. Dtsch Arztebl Int 2011;108(14): Wolbank S, Peterbauer A, Fahrner M, Hennerbichler S, van Griensven M, Stadler G, et al. Dose-dependent immunomodulatory effect of human stem cells from amniotic membrane: a comparison with human mesenchymal stem cells from adipose tissue. Tissue Eng 2007;13(6): Niknejad H, Paeini-Vayghan G, Tehrani FA, Khayat-Khoei M, Peirovi H. Side dependent effects of the human amnion on angiogenesis. Placenta 2013;34(4): Hao Y, Ma DH, Hwang DG, Kim WS, Zhang F. Identification of antiangiogenic and antiinflammatory proteins in human amniotic membrane. Cornea 2000;19(3): Manuelpillai U, Tchongue J, Lourensz D, Vaghjiani V, Samuel CS, Liu A, et al. Transplantation of human amnion epithelial cells reduces hepatic fibrosis in immunocompetent CCl 4 -treated mice. Cell Transplant 2010;19(9): Tehrani FA, Ahmadiani A, Niknejad H. The effects of preservation procedures on antibacterial property of amniotic membrane. Cryobiology 2013;67(3): Niknejad H, Khayat-Khoei M, Peirovi H. Inhibition of MMPs might increase anticancer properties of amniotic epithelial cells. Med Hypotheses 2012;78(5): Niknejad H, Khayat-Khoei M, Peirovi H, Abolghasemi H. Human amniotic epithelial cells induce apoptosis of cancer cells: a new anti-tumor therapeutic strategy. Cytotherapy 2014;16(1): Niknejad H, Yazdanpanah G, Mirmasoumi M, Abolghasemi H, Peirovi H, Ahmadiani A. Inhibition of HSP90 could be possible mechanism for anti-cancer property of amniotic membrane. Med Hypotheses 2013;81(5):

11 اثز ل ف ل شاس ى تز عث ر ر اس آه ى... د ن وکاراى 10. Jasinkowski NL, Cullum JL. Human amniotic membrane. As a wound dressing. AORN J 1984;39(5):894-5, Quinby WC, Jr., Hoover HC, Scheflan M, Walters PT, Slavin SA, Bondoc CC. Clinical trials of amniotic membranes in burn wound care. Plast Reconstr Surg 1982;70(6): Kesting MR, Wolff KD, Mucke T, Demtroeder C, Kreutzer K, Schulte M, et al. A bioartificial surgical patch from multilayered human amniotic membrane-in vivo investigations in a rat model. J Biomed Mater Res B Appl Biomater 2009;90(2): Peirovi H, Rezvani N, Hajinasrollah M, Mohammadi SS, Niknejad H. Implantation of amniotic membrane as a vascular substitute in the external jugular vein of juvenile sheep. J Vasc Surg 2012;56(4): Niknejad H, Peirovi H, Jorjani M, Ahmadiani A, Ghanavi J, Seifalian AM. Properties of the amniotic membrane for potential use in tissue engineering. Eur Cell Mater 2008;15: Mamede AC, Carvalho MJ, Abrantes AM, Laranjo M, Maia CJ, Botelho MF. Amniotic membrane: from structure and functions to clinical applications. Cell Tissue Res 2012; 349(2): De Rotth A. Plastic repair of conjunctival defects with fetal membranes. Arch Ophthalmol 1940;23(3): Sorsby A, Symons HM. Amniotic membrane grafts in caustic burns of the eye (burns of the second degree). Br J Ophthalmol 1946; 30(6): Dua HS, Gomes JA, King AJ, Maharajan VS. The amniotic membrane in ophthalmology Surv Ophthalmol 2004;49(1): Prabhasawat P, Barton K, Burkett G, Tseng SC. Comparison of conjunctival autografts, amniotic membrane grafts, and primary closure for pterygium excision. Ophthalmology 1997;104(6): Azuara-Blanco A, Pillai CT, Dua HS. Amniotic membrane transplantation for ocular surface reconstruction. Br J Ophthalmol 1999;83(4): Kim JS, Kim JC, Na BK, Jeong JM, Song CY. Amniotic membrane patching promotes healing and inhibits proteinase activity on wound healing following acute corneal alkali burn. Exp Eye Res 2000;70(3): Honavar SG, Bansal AK, Sangwan VS, Rao GN. Amniotic membrane transplantation for ocular surface reconstruction in Stevens-Johnson syndrome. Ophthalmology 2000;107(5): Koizumi N, Inatomi T, Quantock AJ, Fullwood NJ, Dota A, Kinoshita S. Amniotic membrane as a substrate for cultivating limbal corneal epithelial cells for autologous transplantation in rabbits. Cornea 2000;19(1): Koizumi N, Inatomi T, Suzuki T, Sotozono C, Kinoshita S. Cultivated corneal epithelial stem cell transplantation in ocular surface disorders. Ophthalmology 2001; 108(9): Ti SE, Anderson D, Touhami A, Kim C, Tseng SC. Factors affecting outcome following transplantation of ex vivo 318

12 هجل دا طگا عل م پشضک کزهاى د ر ت ست س م ضوار 3 expanded limbal epithelium on amniotic membrane for total limbal deficiency in rabbits. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2002;43(8): Niknejad H, Deihim T, Solati-Hashjin M, Peirovi H. The effects of preservation procedures on amniotic membrane's ability to serve as a substrate for cultivation of endothelial cells. Cryobiology 2011;63(3): Ahn J-I, Jang I-K, Lee D-H, Seo Y-K, Yoon H-H, Shin Y-H, et al. A comparison of lyophilized amniotic membrane with cryopreserved amniotic membrane for the reconstruction of rabbit corneal epithelium. Biotechnology and Bioprocess Engineering 2005;10(3): Endo K, Nakamura T, Kawasaki S, Kinoshita S. Human amniotic membrane, like corneal epithelial basement membrane, manifests the alpha5 chain of type IV collagen. Invest Ophthalmol Vis Sci 2004;45(6): Griffith M, Osborne R, Munger R, Xiong X, Doillon CJ, Laycock NL, et al. Functional human corneal equivalents constructed from cell lines. Science 1999;286(5447): Connon CJ, Nakamura T, Quantock AJ, Kinoshita S. The persistence of transplanted amniotic membrane in corneal stroma. Am J Ophthalmol 2006;141(1): Rodriguez-Ares MT, Lopez-Valladares MJ, Tourino R, Vieites B, Gude F, Silva MT, et al. Effects of lyophilization on human amniotic membrane. Acta Ophthalmol 2009;87(4): Libera RD, Melo GB, Lima Ade S, Haapalainen EF, Cristovam P, Gomes JA. Assessment of the use of cryopreserved x freeze-dried amniotic membrane (AM) for reconstruction of ocular surface in rabbit model. Arq Bras Oftalmol 2008;71(5): Connon CJ, Doutch J, Chen B, Hopkinson A, Mehta JS, Nakamura T, et al. The variation in transparency of amniotic membrane used in ocular surface regeneration. Br J Ophthalmol 2010;94(8): Niknejad H, Deihim T, Peirovi H, Abolghasemi H. Serum-free cryopreservation of human amniotic epithelial cells before and after isolation from their natural scaffold. Cryobiology 2013;67(1): Kakavand M, Yazdanpanah G, Ahmadiani A, Niknejad H. Blood compatibility of human amniotic membrane compared with heparin-coated eptfe for vascular tissue engineering. J Tissue Eng Regen Med 2015; doi: /term Nakamura T, Yoshitani M, Rigby H, Fullwood NJ, Ito W, Inatomi T, et al. Sterilized, freeze-dried amniotic membrane: a useful substrate for ocular surface reconstruction. Invest Ophthalmol Vis Sci 2004;45(1):

13 اثز ل ف ل شاس ى تز عث ر ر اس آه ى... د ن وکاراى The Effect of Lyophilization on Light Transmission of Amniotic Membrane: A Comparison with Rabbit Cornea Tina Deihim, M.D. 1, Ghasem Yazdanpanah, M.D. 1, Hassan Niknejad, Ph.D. 2* 1. General Practitioner, Department of Tissue Engineering and Regenerative Medicine, School of Advanced Technologies in Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran 2. Associate Professor, Department of Tissue Engineering and Regenerative Medicine, School of Advanced Technologies in Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran * Corresponding author; niknejad@sbmu.ac.ir (Received: 3 June 2015 Accepted: 3 Nov. 2015) Abstract Background & Aims: Amniotic membrane persists for a long time after ocular transplantation (as corneal substitute) and can affect light transmission (transparency). The aim of this study was to evaluate the transparency of amniotic membrane after freeze-drying (lyophilization) and to compare the results with transparency of rabbit cornea. Methods: Transparency of rabbits corneas and fresh and lyophilized AMs from disk and peripheral (out of disk) regions of placenta were measured. The epithelial cells which have stem cell properties were removed with enzymatic digestion. The structure of amniotic membrane was evaluated using H&E, periodic acidschiff and masson s trichrome staining, and ultrastructural evaluation of surface was carried out using scanning electron microscope. Results: The transparency of lyophilized amniotic membrane was not different with that of fresh one. The light transmission of amniotic membrane from disk region was less than peripheral region. Removing of the epithelial layer improved the light transmission of the amniotic membrane up to the transparency of rabbit cornea. Scanning electron microscopy revealed that the epithelial cell remnants scatter the light after lyophilization. Conclusion: Based on the results of this study, it is recommended to remove the epithelial layer of the amniotic membrane before lyophilization to increase its transparency amniotic membrane for corneal transplantation and ocular tissue engineering. Keywords: Amnion, Transparency, Freeze-drying, Cornea Journal of Kerman University of Medical Sciences, 2016; 23(3):