اسح بات األي با انحان ة نه سج histolytica( )Entamoeba ف و جشخ ص ان و انبكح ري ف انوسظ انسرع انسجاج زهراء عبذ انرح ى أح ذ عبذ هللا * آي ة ص ف جاسى* عه حس أدح ة** انخالصة ذاس خ قث و اي ؾش 2008 / 12/ 4 ذ ػضو ذ ر أدا ح اال ثا ايؽايح ي غط ؾ ايضظاض تاعرخذا اي عط ايضسػ Locke-egg (LEM).Liver infusion Agar medium (LIAM) medium أد م اي غمر ثد ي مذج 21 ؽم شا نما أؾنى قد ألدا ح ايطؿ نى 48 عاػح ػ ا تأ ايطؿ ؾ اي عط ايمضسػ أعمر ش ي مذج 13 م تذ أدا ح. ن ا ذعذس االؽاسج ا اي ػذ ذه أن اط خالو ؾرشج أعر ثاخ ايطؿ ؾ اي عمط ايمضسػ تايشغ ريم ي ؼع ذه أن اط ؾر ح ؾ عو LEM ريم ػ ذ ايرأخش ؾ ادا مح اي غمر ثد. ػ مذ ذؾمخ اي م ايثهر مش ؾم اي عمط ايمضسػ ؾمأ تهرش ما Escherichia coli م ايغماةذج ا ظ د ما ؾمهى ط ثما أعاع ا ي عاغ اعر ثاخ هؿ األ ثا ايؽاي ح ي غط ؾ اي عط ايضسػ. انكه ات ان فحاح ة : أسح بات االي با انحانة نه سج إ شكر ش ا انقونو ان قذية : ذظ ممممممممممش األ ثمممممممممما ايؽاي ممممممممممح ي غممممممممممط histolytica( ) Entamoeba خالو د سج ؼ اذ ما تصالشح أؽهاو ضج ظ ش ا ايؾهى اي رؽشل ايط س اي رػمز )Trophozoite( ايؾمهى ما قثمى ايرهم ظ )Precyst( ايؾمهى اي رهم ظ )Cyst( مم ايطممم س اي ؼمممذ stage( )Infective [1]. ذرممم ه األهممم اس اي رػز مممح ؾممم األ ؼممما ايػ ظمممح يإل غا إر ي ا ايكات ح ػ إؼذاز ايرؽ مى ايخ م )Cytolysis( ذؽ ى األ غعح) Histolysis ( ريم تممئؾشاص مم اد عمما ح ا ض ممح ذؽ ممى ذؽطمم ايطثكممح اي خاه ح يأل ؼا ش ذرػز ػ م األ غمعح اي رؽ مح نش اخ ايذ ايؽ ش ايثهرش ا ايطث ؼ ح ( Bacterial )flora ؾممم األ ؼممما [2]. ؽمممذز ايخ مممط تاأل ثممما ايؽاي ح ي غط ر عح ا رالل ايطؿ يؼ ا مى ايؿ ػمح قممذ غمماػذ ؾمم ريمم ظمم د تؼممل ايثهرش مما ايغممايثح ي غشا bacteria( )Gram-negative.[3] ه سخ ػذج أ اع األ عماه ايضسػ مح ش اة مح ايطم س يرؾم ى اي قم و األنماس أ خالفمح ايث ل ؾ اي عو اي اةى. ذ ظذ شالشح أ اع أعاعم ح يأل ظ ممح ايضسػ ممح مم Xenic ) مم ايطؿ مم ت ظمم د ظممشاش ؼ ممح هث ؼ ممح غ ممش ؽممذدج ) ) Monoxenic ايطؿ ت ظ د ع اؼذ ؾكو ممم ايثهرش ممما اي نممماؾح( Axenic ) ممم هؿ ممم تػ اب أ ظشش أ خ آخش( [4]. يزا أظش د مز ايذساعمح ت مذؼ ذ مح ايطؿ م ؾم اال عمماه ايضسػ ممح الهمم و ؾرممشج ه ممح ؼشؾممح ع ذأش ش اي ايثهر ش اي شاؾف ي اال ث. ان واد وطرائق انع م ج ع وعسل انطف ه ي ع ة انبراز Collection and Isolation of parasite from stool samples ظ ؼد ػ اخ ايثشاص م أؽمخاؿ تمايػ ؼمممما مممم ا عمممم او غ ممممش خامممممؼ ي ؼممممالض اي مممشاظؼ ي غرؾمممؿ اي ش ممم ل ايرؼ ممم. ذممم ايرأنذ م خ ع م تطؿ م األ ثما ايؽاي مح ي غمط م خالو ايؿؽم اي ع مش ي ثمشاص ذؾمخ هم س ايطؿ مممم اي رػمممز اي رهمممم ظ تطش كمممح ايرؽنمممم ش ايشهة preparation( )Wet [5]. ػضيمد األ ثما ايؽايمح ي غمط م ػ مح ايثمشاص تأخمز 1 غم م ايؼ مح خق فما اي طكمح ايؽا مح ػ م ايذ أ اي خماه الؼر ماو نصمشج ظم د ايطؿ م ؾ ما ش ضظد ايؼ ح تؾهى ظ مذ ت عماهح افمح تاعمر س غ 3 ى اي ؽ و اي ؽ ايؿغ ي ظ ايم أ أفثػ اي ض ط غرؽ ثا ش شس خالو هثكمح م ايؾماػ اي ؼكم أ ت ممؼ ؾم أ ث تمح اخرثماس ؼك مح تؾهى اةى ي ذج قؽ عاػح يػمشك إصايمح ايمذقاةف ايهث ممشج مم اي غممرؽ ة قثممى إممماؾر ايمم اي عمممو ايضسػ [6,4] تؼذ ػضو األ ثا ايثشاص أم ؽ ؼعمم ؼمم )0.5 ممى( مم اي غممرؽ ة ايمم أ ات ممة اي عو ايضسػ ش ؼن د أ ات ة األ عاه ايضسػ ح ت مممغ ػ مم د ؾمم ايؽاممم ح تؽممشاسج 37 ي ممذج 48 عمماػح[ 7,4 ] أعممر ذ ه ممح ممذج ايثؽممس ػ مم عاليح أ ث ح ػضيد ؾر تؼ ش 16 ػا ذ ايرأنمذ م خ عم أل تاأل ثما ايؽاي مح ي غمط نما ايثمشاص ر ق ا إع اي خاه غ ظ د ق ى ايذ. *قغ ػ ايؽ اج/ ن ح ايؼ ي ث اخ/ ظا ؼح تػذاد ** ؼذج األتؽاز ايثا ي ظ ح ي اهف ايؽاسج /ن ح ايؼ /ظا ؼح تػذاد 442
جحض راألوساط انسرع ةة Culture Media ؼنشخ ػ األ عاه ايضسػ ح ع Xenic culture media ير ح األ ثا ايؽاي مح ي غمممط مممز األ عممماه راخ ت طمممح ش اة مممح ايطممم س. )Diphasic media( أ- اي عو ايضسػ (LE) Locke- egg (LE) medium ؼنمش اي عمو ايضسػم ايمز رهم م هم س تؽغمممممممممة هش كمممممممممح (Boeck and Drobohlav,1925) 1. ايطم س ايقمم ة اي هم األعاعمم ي ممزا ايطم س ؽر ت ل ايذظاض ت كذاس 5 مى ايمز صمى ايغطػ ايق ة اي اةى. 2. ايط س ايغماةى ؽرم مزا ايطم س م ؽ م و يممم نظ solution( )Locke's صمممى ايطممم س ايغماةى ايؼ م إر أمم ؽ ت كمذاس 6 مى ايم ايطم س ايق ة اي اةى ؾ ا ث تح ايضسع [4]. ب- اي عمو ايضسػم ك مغ ايهثمذ مغ األنماس Liver infusion agar medium ؼنمش اي عمو تؽغمة هش كمح (Cleveland and Collier,1930) ره ا نا ه س : 1. ايطم س ايقمم ة اي هم األعاعمم ي ممزا ايطم س ممم ك مممغ نثمممذ ايثكمممش) infusion )Beef liver ت كذاس 5 ى ايز صى ايغطػ ايق ة اي اةى. 2. ايطممم س ايغممماةى رمممأيؽ مممزا ايطممم س ممم داسا اي ؽ و ايؿغ ي ظ اي قى اي ؼكم يمذ ايخمش ؼ تؼمممذ ذصثممم و اي مممر إر ضظممما ت غمممثح. 1:5 ذممم أممماؾح زا اي ممض ط ( 6 ممى( ايممز صممى ايطمم س ايغاةى اي ايط س ايق ة[ 7 ]. Antibiotics ان ضادات انح و ة Streptomycin أممممم ؿد نممممى مممم Procaine ت كممممذاس 2 ػ / مممممى Sulphate ؼممممممذج Benzylpenicillin ت كممممممذاس 1000 ػ / ممى ايمم د ي ممح/ ى Nystatin ت كممذاس 2 ايطم س ايغماةى ي عمو ايضسػم ي غم طشج ػ م م ايثهرش مما ي ممغ مم ايؿطش مماخ يهمم ذغمماػذ ػ مم ذع ض ايغاليح األ ث ح ؾ ايضسع [7,4] يحابعة يراحم و طف ه األي با انحان ةة نه سةج فة انوسط انسرع ذ راتؼح ايطؿ م ؾم نمال اي عمط ايمضسػ ه س رػز اي غرخذ ريم تر ك ػ 0.08 10 6 / ى ايط س ايغاةى ي عو ايضسػم ايم أ ات مة ايضسع ايؽا مح ػ م األ عماه ايضسػ مح شم ؼنم د تؽشاسج 37 قمذ ذم ذؽذ مذ ن مح ايؼمايف ايؽما ػ االه اس اي رػز مح ي طؿ م اي نماؾح يال عماه ايضسػ ممممممممح ت اعممممممممطح ؽممممممممش ؽح ػممممممممذ ايخال مممممممما Haemocytometer تاعمممرخذا اي ؼاديمممح ايراي مممح ؼغة اظا ؾ [ 8 ] ايؼمممذ ايه ممم يال ثممما )أ ثا/ مممى( د ع ممم ع أػمممذاد األ ثا ؾ اي شتؼاخ ػا ى ايرخؿ ؽ 10 4 تمذأ ايؿؽم تؼمذ اي م األ و )24 عماػح( ي ؽنم ريممم تممشض أ ق ممة أ ث تممح ايممضسع ت ممذ ي قممثػ ػايكمما شمم أخممزخ قطممشج مم ايؼممايف مممؼد ػ مم ؽش ؽح ايؼ ذ ذ ػذ ايخال ا غ اعرثؼاد ايخال ما ايرم ذ ممد تايرش ثمما ايضسقمما تؼممذ ريممم أػ ممذخ أ ث تممح ايمممضسع ايممم ايؽامممم ح تمممذ أ كمممى ي غمممر ثد ؾؽقمممد مممشج أخمممش ؾممم اي ممم ايصممما تممم ؿظ ايطش كح اعر شخ ايؼ ح يػا ح ا ر ا اي م تؾمهى اة ؾ األ عاه ايضسػ ح. جشخ ص ان و انبكح ري ف انوسط انسرع أخزخ غؽح نال اي عط ايمضسػ ( ت ظم د اي نممممماداخ ايؽ مممممح اي نممممماؾح ايممممم اي عمممممط ايضسػ ( صسػد ػ أستؼح أ اع م األ عماه ايضسػ مممح ايخافمممح تاألؼ ممما اي ع ش مممح ممم, Blood, MacConky agar, Chocolate Sabourauds agar agar شم ؼنم د تؽمشاسج 37 ي مممذج 24 عممماػح تؼمممذ ريمممم يممم ؼع ظممم د غمرؼ شاخ سد مح اي م ؾم عمو MacConky agar إممماؾح ايمم ظمم د مم مممؼ ؽ ؾمم عممو Blood agar Chocolate agar ؾم ؼم يم ؽمع أ م ؾم عمو Sabourauds agar تؼممذ ريممم أظممش اخرثمماس ايؿؽمم اي ع ممش ت مم غمشا االخرثماساخ ايه ؼ مح اي ر ص مح تاخرثماس األ ممذ و Indol test ايرمم ذمم أظشا مما ؾمم خرثشاخ غرؾؿ اي ش ل ايرؼ أظ مش ظم د ع اؼذ ايثهرش ا ايغايثح ي غشا. ان حائج : عمعى اي عمط ايممضسػ نؿمما ج عمماغ ر ماش ؾم ػمضو األ ثما م ايثمشاص نا مد غمثح ممم ؾممماه األ ثممما ركاستمممح ؾممم نمممال اي عمممط ايضسػ تؼذ 48 عاػح ؼنا ح ايؼضيح األ يم تؼمممذ كمممى اي مممضس ع ألنصمممش ممم 6-5 مممشاخ ذممم ايؽقمم و ػ مم أؾنممى مم ذؼممذاد يأل ثمما يهممال اي عممط ايممضسػ نممزيم يمم ؼع ؾمم ؼايممح ؾؾممى ذ ح األ ثا ؾكذ نا ريم ر ماشال ؾم نمال اي عمط ايمضسػ. تؼمذ عماغ ذ مح األ ثما ايؽايمح ي غمط ؾ اي عط ايضسػ ذ إدا ح اي غر ثد ي عمط نمممممى 48 عممممماػح إر يممممم ؼع تمممممأ أؾنمممممى كمممممى ي غممر ثد Xenic مم 72-48 عمماػح ريممم تؼممذ إمممممماؾح ؾممممما ايمممممشص ) قمممممذس ي هاست مممممذساخ( اي ناداخ ايؽ ح إر يم ؼع أ ؼمذو ايرنماػؽ قمى ايم أػ م غمر ؾم مز األ قماخ قمذ ذم إدا ح ذ ح ز ايغاليح األ ث ح ألنصش م عم ح )21 ؽ ش(. 443
إ اي نمماداخ ايؽ ممح ايرمم ذمم إممماؾر ا مم Procaine Benzylpenicillin ايرمم ذصممثو ايثهرش مممممممما اي ظثممممممممح ي مممممممم غممممممممشا نممممممممزيم Streptomycin Sulphate إمممممممماؾح ايممممممم Nystatin اي صثو ي ايؿطمش إر يم ؼع ذؽغمظ أ ثمم ػمماي ي مم ايؿطممش ايرمم أدخ ؾمم تؼممل ايؼ مماخ ايمم مم خ األ ثمما ؾمم األ عمماه ايضسػ ممح تغممثة اي م ايؿطممش نممزيم ايؽمماو تاي غممثح دا ممح اي غممر ثد إر يمم ؼع أ ايرممأخش ؾمم إدا ممح اي غممر ثد ؤد اي الل األ ثا ؾ نمال اي عمط ايمضسػ ت ؿظ اي قد. أ ذؾممخ األ ثمما ايؽاي ممح ي غممط ؼر ممذ ػ ظ د أه اس شاؼى ؼ اذ ما اي خر ؿمح خافمح ايطم س اي رػمز اي رهم ظ مزا ما الؼمع ػمادج ؾ ايثشاص أال أ تؼذ ذ ح األ ثما ايؽاي مح ي غمط ؾم اي عط ايضسػ ؾؽقم تؼمذ 48 عماػح األ يم ي ر مممح يممم ؼع ظممم د األهممم اس اي رػز مممح ؾكمممو ال ظ د يألن اط أ يؼ ح ايره ظ سغ ريمم يم ؼع ذه ا ؾ عو LEM ريم ػ ذ ايرمأخش ؾم إدا مح اي غمر ثد ألنصمش م خ غمح أ ما أر ذه مد أن ماط ؾر مح) cysts )Young تذا مح يرؾمهى ايهم ظ ؼا مح ػ ممم ؾعممم ج نال ه ظ مممح نث مممشج اي ممم اج ظا ث مممح اي قمغ نا مد ق ممح ايؼمذد ال ذرعمما ص ايصالشممح ؾمم ؼ ي ذؾا ذ إهالقا أه اس ره غح ستاػ ح اي اج. أظ شخ اي راةط ظم د ؾمش ؼ مح تم ؼمذو ايرنماػؽ ي عمط ايمضسػ ػ مذ غمر اؼر اي ممح 0.001 أر ت مممع ؼممذو ايرنممماػؽ ؾممم / ممى ت مما ت ممع ؾمم عممو 6 10 x 0.905 LEM / ممممى. عممممو 6 10 x 0.386 LIAM إمممماؾح ايممم ؼمممذو ايرنممماػؽ ؾكمممذ يممم ؼع ظممم د اخرالؼ ت ؼع ايطؿ يهال اي عط ايضسػ ؾؿمم عممو LIAM ا رمماصخ األ ثمما تهثممش ؼع مما )50-15 ما هش ( كاس مح مغ عمو )12- LEM 25 مما هش ( )ؽممهى ) 2 1 إممماؾح ايمم ق ممح أػمممذاد األ ثممما ؾممم عمممو LIAM كاس مممح ت عمممو LEM ػ ايشغ أ نال اي عمط ايمضسػ ؽ ا ؿمظ ايغماليح اي شمم ح اي ؼض يمح م تمشاص اي خ ط. إممماؾح ايمم اي مم األ ثمم ايؽافممى ؾمم اي عمممو ايضسػممم يممم ؼع ظممم د ممم تهر مممش ؾممم اي عط ايضسػ اي ظا ة اي م األ ثم )ؽمهى 3( يزيم ؾكذ أخزخ غؽح اي عمط ايمضسػ صسػممد ػ مم أستممغ أ مم اع مم األ عمماه ايضسػ ممح ايخافمح تاألؼ ما اي ع ش مح ػ مذ إظمشا اخرثماس ايؿؽمممم اي ع ممممش ت مممم غممممشا اممممماؾح ايمممم االخرثاساخ ايه ؼ ح أظ ش ظ د ع اؼذ م ايثهرش ا ايغايثح ي غشا م Escherichia coli يممم ؼع ظ د ممما تؾمممهى ر اشمممى ؾممم نمممال اي عط ايمضسػ ايخافمح تماي األ ثم همزا ظ مض اي عمط ايمضسػ تماي ايثهر مش تؾمهى ذ كاة ػ ح ايثشاص اي ضس ػح ذ إمؼاؼ مز ايثهرش مما اي ؼض يممح ممغ اال ثمما مم ايثممشاص تأممماؾح اي ناداخ ايؽ ح ه او ذج االعر ثاخ. ذث اي راةط ا ٠ ؿح ايزنش ظم د ؾمش ؼ ح ؾ ؼذو ايرناػؽ ت اي عط ايضسػ اي غمممرخذ يمممزيم ؾكمممذ ذممم ق ممماط شاؼمممى ممم األهمم اس اي رػز ممح يأل ثمما ايؽايممح ي غممط مم تذا ممح اير كمم ػ يػا ممح ممالل األ ثمما تؾممهى مماة يهممال اي عط ايمضسػ يكمذ أظ مشخ اي رماةط اخمرالؼ ؾممم ؼمممذو ايرنممماػؽ يأل ثممما ؾممم نمممال اي عمممط ايضسػ ه ح ذج اي راتؼمح إر يم ؼع اسذؿماع ؼمذو اي ؾ عو ا خؿام ؾ عو صسػم آخمش إال ا ؾ ايغاػح 48 )اي ايصا ( ؼنا ح تؼذ اير كم ػ يممم ؼع اسذؿممماع ؼمممذو اي ممم ؾممم نمممال اي عمممط ايمضسػ تؼمذ ريمم ؾم 72 عماػح )اي م ايصايمس( ي ؽنما ح يم ؼع اعمركشاس اي م ؾم عمو LIAM اسذؿاػ ؾم عمو LEM اعمر شخ راتؼمح اي م الؼظح ايرثما ؾم اي عمط ايمضسػ إر يم ؼع ذذ س اي تؼذ 72 عاػح )اي ايصايمس( ؾم عمو LEM ت مما ؾمم عممو LIAM نمما ذممذ س اي مم تؼذ 96 عاػح )اي ايشاتغ( اعمر ش ذمذ س اي م يػا ح اي ايصايس ػؾش ؼنا ح تؼذ اير ك ػ إر يم ؼع الل نا مى يأل ثما ايؽايمح ي غمط ؾم نمال اي عمط ايضسػ ت ؿظ اي قمد تؾمهى ر اشمى )ؽمهى 4(. ن ا ي ؼع ؾ عو LEM ظ س ؼايمح ذهم ظ ؾر مح ؼا ح ػ ؾع ج نال ه ظ ح إماؾح اي ا خؿماك ؼمممذو اال كغمما ممغ اي قمممد ذ ممم األ ثمما ت ممم ايرش ثا ايضسقا ؾكذا ا ي ؽر اذ ا ايذاخ ح. شةةكم )1(: األي بةةا انحان ةةة نه سةةج ان اي ةةة فةة انوسظ انسرع.LEM 444
ى عو صسػ شكم )2(: األي با انحان ة نه سةج ان اي ةة فة انوسةظ انسرع LIAM )يهو نش ا (. شةكم )3(: ان سةح بث األي بة فة انسجةاج جو ة وجود انبكحر ا ف انوسظ انسرع ) b ( ويبحهعةة ية قبم األي با )p(. شةةةكم ( 4 ) : يحابعةةةة ةةةو طف هةةة األي بةةةا انحان ةةةة نه سج عهى يةذ 33 ةوو فة انوسةط انةسرع ان سحخذي ان اقشة : ت د اي راةط عاغ ػضو األ ثا ايثمشاص ذ ر ممممما ػ ممممم اي عمممممط (LEM) (LIAM) ممزا مما ؤنممذ [7] ؾمم ؼمم أنممذ[ 9 ] تممأ عممو LEM أؼذ األ عاه ايز ظ ش دقمح ػاي مح ؾم ذؾممخ ايخ ممط تاأل ثمما ايؽاي ممح ي غممط ؾمم ايثممشاص. تؼذ عاغ ذ ح األ ثما ايؽايم ي غمط ؾم اي عمط ايممضسػ ذمم إدا ممح اي غممر ثد نممى 48 عمماػح ذمم ايؽقمم و ػ مم أؾنممى ذؼممذاد أ ثمم تؼممذ 5 ايمم 6 كممالخ صسػ ممح ممزا رؿممف ممغ [9] ن مما أظ ممشخ ايذساعح ص ادج ؼذو ذناػؽ األه اس اي رػز مح ؾم 72-48 عاػح تؼذ اير كم ػ يهمال اي عمط ايمضسػ تؼذ ريم تذأ تاال خؿاك مزا رؿمف مغ [9] إر أنمذ تأ ؼذو ايرناػؽ قى اي اػ غر ي تؼمذ 48 عاػح ي ر ك ػ ؾ ظ غ األ عاه ايضسػ ح نزيم أنذخ ػذد ايثؽ ز تأ 72 عماػح ؼنما ح ذ صمى ايطم س اي غمماس ر ايمز ممر ؾ م ؼقمماد األ ثمما [10,4]. نمزيم م األ م س األعاعم ح يم ؼع ؾكمو األه اس اي رػز ح ؾ اي عط ايضسػ ػمذ ظ د األن اط أ ؼذ ز ايرهم ظ مزا ما أنمذ نمى [12,11]. رنش [ 4 ]تمأ األن ماط قمذ ذؽمس ؾم األ عاه Xenic خافح ؾ عو LEM تؾمهى ذ كاة تأػذاد فمػ شج ظمذا أ ايمم شالشمح أ م س أعاع ح ي ؽق و ػ ايره ظ اي عو ايضسػ ايثهرش ما ايطث ؼ مح ؾما ايمشص أ تؼمل األ عماه ذه أؾنى غ ش ا ؾ زا ايػشك. ن ا أظ شخ ايذساعح أ نا تمأ األهم اس اي رػز مح ذ م ظ ثما ايم ظ مة مغ ايثهرش ما ايغمايثح ي مم غممشا مم.E coli ؾمم نممال اي عممط ايضسػ تؾهى رؾات زا رؿف غ ػذج تؽم ز إر رنش [13] تأ األهم اس اي رػز مح خافمح م عاليح HM1:IMSS األنصش ا رؾاسا ذرػمز تؾمهى اعمغ ػ م تهرش ما.E coli أ ما [3] ؾأنمذا ػ م أ ظ د ايثهرش ا ايغايثح ي غمشا مغ األهم اس اي رػز ممح يأل ثمما مم عمماليح HM1:IMSS د س أعاع ؾ ص ادج ػ ا ى ايؿ ػح يأل ثا زا اأنذ أ نا [14] نزيم أؽاسخ ػمذج تؽم ز ايم أ مح ذع ممض اي عممو ايضسػمم األ ثمم تايثهرش مما ايغممايثح ي مم غممشا إر ال همم أ ذ مم األ ثمما تػ مماب اي م ايثهر مش أ ايثهرش ما.E coli أنصمش أ م اع ايثهرش ممما اي الة مممح ي ممم األ ثممم ؾممم األ عممماه ايضسػ ممح [7,4] Xenic ذغممرخذ اي نمماداخ ايؽ ح ي غ طشج ػ اي ايثهر ش ال ذ غ م ايثهر ش ما ايطث ؼ مح ؾم ا غما تاػرثماس ظم د مز ايثهرش مما مممش س ا ي عمماغ اي مم ايضسػمم يأل ثمما عممة ؼممذ ز ؼايممح ذمم اص تمم ايثهرش مما األ ثمما ػادج ذؿنى عاليح اؼذج ايثهرش ما أ أنصش ما ؽمم ػا مم.E coli همم مم ايقممؼة مم األ ثمما ؾمم عمو صسػمم تممذ أ ع ممض تهاة مماخ ع ش مممح ؽمممذدج غممم طش ػ ممما تاي نممماداخ ايؽ مممح[ 14 ]. ؾممم ايذساعمممح ايؽاي مممح ؾكمممذ ظ مممض اي عمممط ايمممضسػ تثهرش ممما.E coli تؾمممهى ذ كاة تغثة ظ د ا ايطث ؼ ؾ تشاص اي خ ط. ؾ ا خ انرغاب ايػمزا ؾكمذ أنمذ[ 15 ] تمممأ األهممم اس اي رػز مممح ذؽمممشس ن مممح نث مممشج ممم أ ض ممماخ Cysteine Proteinase ؾممم داخمممى 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 0 2 4 6 8 10 12 14 LEM LIAM األ او ؼذو ػذد هؿ األ ثا ايؽاي ح ي غط 10 6 / 445
References 1. Espinosa-Cantellano, M. and Martinez-Palomo, A. 2000. Pathogenesis of intestinal amebiasis : From molecules to disease. Clin. Microbiol. Rev., 15:318-331. 2. Tanyuksel, M. and Petri, W.A. 2003. Laboratory Diagnosis of Amoebiasis. Clin. Microbiol. Rev., 16:713-729. 3. Bracha, R. and Mirelman, D. 1984. Virulence of Entamoeba histolytica trophozoites. Effects of bacteria, microaerobic conditions, and metronidazole. J. Exp. Med., 160:353-368. [Abstract]. 4. Clark, C.G. and Diamond, L.S. 2002. Methods for cultivation of luminal parasitic protists of clinical importance. Clin. Microbiol. Rev., 15:329-341. 5. Tanyuksel, M.; Yilmaz, H.; Ulukanligil, M.; Araz, E.; Cicek, M.; Koru, O.; Tas, Z. and Petri, W.A. 2005. Comparison of two methods (microscopy and enzyme-linked immunosorbent assay) for the diagnosis of amoebiasis. Exp. Parasitol., 110:322-326. 6. Ramos, F.; Moran, P.; Gonzalez, E.; Garcia, G.; Ramiro, M.; Gomez, A.; Garcia de Leon, MC.; Melendro, E.I.; Valadez, A..and Ximenez, C. 2005.Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar: Prevalence infection in aural mexican community. Exp. parasitol., 110:327-330. 7. Taylor, A.E.R. and Baker, J.R. 1968. The cultivation of parasites in vitro. Black Well Science Publ., Oxford.pp.120-144. 8. Brousseau, P.; Payette, Y.; Tryphonas, H. Blakley, B.; Boermans, H.; Flipo, D. and Fournier, M 1999. Manual of immunological methods. CRC Press LIC, United State of America, Florida.pp7-135. 9. Dagci, H.; Balcioglu, C.; Ertabaklar, H.; Kurt, O. and Atambay, M. 2003. Effectiveness of peptone- األ عمماه ايضسػ مممح ممز األ ض ممماخ ممح ألظمممى انرغمماب اي مم اد ايػزاة ممح ؼرمم مم ايطمم س ايغمماةى ايؽا ػ األ مالغ يم ؼع اعمر الل ايػمزا م األ عمماه ايضسػ ممح تغممشػح مما ممؤد ايمم ممالل األ ثا يزيم نا د االدا مح نمى 72-48 عماػح يرثمذ ى اي ممم اد ايػزاة مممح يأل عممماه ايضسػ مممح. أ ممما تاي غمممثح ي ناداخ ايؽ ح ؾكذ أنذخ ايهص ش ايثؽ ز اي أ مممحBenzylpenicillin Procaine Streptomycin Sulphate ؾ األ عاه ايضسػ ح ؾم ذصثم و ايثهرش ما اي ظثمح ي م غمشا ايغم طشج ػ ايثهرش ا ايغايثح ي غمشا إال أ م يم ؼع ؾمم تؼممل ايؽمماالخ ؼممذ ز ذ م ز ؾطممش أد ايمم الل األ ثا ؾم اي عمو ايضسػم قمذ ؼم د ايغمثة ايمم ؿممار اي مم اد ايػزاة ممح تغممشػح أ ايمم ايغمم األ نم ح ي ؿطش ماخ يمزيم ذم إمماؾح اي غمراذ ايم األ عاه ايضسػ ح ذع ثا يؽذ ز اير ز ايؿطش أ ا اي ايثهر ش ؾكذ أشثد أ ر ؾ ايرؿاػمى اي رثمادو تمممم ايثهرش مممما األ ثمممما إر ذكمممم ايثهرش مممما تأخممممز األ نغع اي ر اظذ ؾ اي عو ايضسػ ا اعة األ ثا اير ذه راخ ؼ ؾح ال اة مح إمماؾح ايم ايرؿمماػالخ األ نمم ح ي ثهرش مما ايرممم قممذ ذغمما ؾممم ذعضةح اي اد ايػزاة ح ؾ اي عو ايضسػ. ا ذمم ؾش اي مم اد ايػزاة ممح أػممذاد األ ثمما ايثهرش ممما اي ك ؼمممح ذمممؤشش ػ ممم إهايمممح أ ققمممش شاؼى اي األ ث إر أظ شخ اي راةط تأ ؼمذو ايرنماػؽ شذؿمغ ؾم نمال اي عمط ايمضسػ ؾم ايغمماػح 48 مم اير كمم ػ ممزا مما أنممذ [9] إر قمما تاخرثممماس شالشمممح أ عممماه صسػ مممح خر ؿمممح ممم ممم ع Xenic يػا ممح أستؼممح أ مما الؼممع اسذؿمماع ؼممذو ايرنماػؽ ايم غمر ايك مح ؾم ايغماػح 48 تؼمذ اير ك ػ تؾهى رغا يهى األ عاه ايضسػ ح شم تمذأ تمممماي ث ه رنمممممش [7] تممممأ اي ممممم ثممممذأ تطممممم س ايرطثمغ) phase )Lag ايمز هم ه مى غمث ا ( 24-12 عممماػح ) هممم ػمممذد ايطؿ ممماخ اي ا مممح ق مم ال خممالو 12-6 عمماػح األ يمم تؼممذ ريممم ممأذ ايطممم س اي غممماسذ phase( )Logarithmic تؼمممذ هممم س ايصثممم خ ايؼمممذد ( Stationary )growth غممممممم أ نممممممما تممممممماي ايغممممممم ث growth( )Negative شمم تؼممذ ريممم مم همم س اي خ ايغش غ. همممم ذؼ ممممى عممممثة ا خؿمممماك اي مممم ذذسظ اي ؼايح اي الل نصشج اي م اذط األ نم ح اي اد ايغا ح اير ذ رع ا األ ثا إماؾح اي ظ د ايثهرش ما اعمر الل اي م اد ايػزاة مح ما مؤد ايم الل األ ثا تؾهى ذذس ع يزا ت د اي راةط تمأ ايؼمايف األ ثم اي كم غ ايثمايع 10 0.08 6 هم س رػممز / ممى ؾمم عممو صسػمم ؼمما ػ مم 5 ممى هم س فم ة 6 مى هم س عماةى ه م م ايؼم ؼ تذ إدا ح ي ذج 13 ؾكو. 446
1983. Entamoeba histolytica. Phagocytosis as a virulence factor. J. Exp. Med., 158:1511-1521. [Abstract]. 14. Mirelman, D. 1987. Amoeba- Bacterium relationship in amebiasis. Microbiol. Rev., 51:272-284. 15. Que, X.and Reed, S.L. 2000. Cystine proteinases and the pathogenesis of amebiasis. Clin. Microbiol. Rev., 13:196-206. 16. Boeck,W.C.and robohlav,j. 1925.The cultivation of Entamoeba histolytica. Am.J.Hyg.,5:371-407.Cited by Clark, C.G. and Diamond, L.S. 2002. Methods for cultivation of luminal parasitic protists of clinical importance. Clin. Microbiol. Rev., 15:329-341. 17. Cleveland, L.R. and Collier, J. 1930.Various improvements in the cultivation of Entamoeba histolytica. Am.J.Hyg., 12:606-613. Cited by Taylor, A.E.R. and Baker, J.R. 1968. The cultivation of parasites in vitro. Black Well Science Publ., Oxford.pp.120-144. yeast extract (P-Y) medium in the cultivation and isolation of Entamoeba histolytica / Entamoeba dispar in turkish patients. Diagn. Microbiol. Infect. Dis., 45:127-130. 10. Mata-Cardenas,B.D.; Vargas- Villarreal,J.; Gonzalez- alazar, F. Martinez - Rodriguez,H.; orales- Vallarta, M. and Said-Fernandez,S. 2000.Entamoeba histolytica is unable to use freecholesterol,phospholipids, and fatty acids under axenic cultivation conditions. Arch. Med. Res., 31:S212- S213. 11. Makioka, A.; Kumagai, M.; Ohtomo, H.; Kobayashi, S. and Takeuchi, T. 2001. Effect of calcium antagonists, calcium channel blockers and calmodulin inhibitors on the growth and encystations of Entamoeba histolytica and E. invadens. Parasitol.Res., 87:833-837. 12. Eichinger, D. 2001. Encystation in parasitic protozoa. Curr. Opin. Microbiol., 4:421-426. 13. Orozco, E.; Guarneros, G.; Martinez- Palomo, A. and Sanchez, T. Cultivation of Entamoeba histolytica in vitro and diagnose the bacterial growths in culture media Zahra a Abdul-Raheem Ahmed* Amna N. Jasim * Ali H. Ad hiah ** *Department of Biology, College of Science for Women, University of Baghdad **Tropical-Biological Research Unit, College of Science, University of Baghdad. Key word: Cultivation, Entamoeba histolytica, Escherichia coli Abstract: The parasite was isolated from a stool sample, cultivated and maintained in vitro using Locke-egg medium (LEM) and Liver infusion agar medium (LIAM). The culture was maintained for up to 21 months, and the best time to maintain the parasite was every 48 hours, although the growth in the culture media continued for 13 days without a maintenance. Additionally, no cyst formation was observed during cultivation of parasite in the two culture media. Although, was observe young cyst formed in LEM media were deletion of maintained. The diagnosis of bacteria growth in the culture media, bacterial content (Escherichia coli) was an dominance and essential requirement for a successful cultivation of Entamoeba histolytica in the two culture media. 447