مجلة جامعة تكريت للعلوم الزراعية المجلد ( 16 ) العدد ( 3 ) ( 1026 ) ISSN تقدير العناصر الثقيمة والمموثات المايكروبية في أغذية األطفال )*( ال

النسخ

1 تقدير العناصر الثقيمة والمموثات المايكروبية في أغذية األطفال )( المتوفرة في األسواق المحمية زه ارء ظافر عبد الحميد و ارفد خميل عبد الر ازق والهام إسماعيل طامي قس عمو االغذية كمية الز ارعة جامعة تكريت الكممات المفتاحية العناصر الثقيمة المموثات المايكروبية اغذية االطفاؿ. لممراسمة زه ارء ظافر عبدالحميد البريد االلكتروني الخالصة تضمنت الد ارسة إج ارء فحوصات كيمياوية وفحوصات مايكروبايولوجية لمكشؼ عف تواجد المعادف الثقيمة والمموثات البايولوجية في بعض نماذج أغذية األطفاؿ المتوفرة في األسواؽ المحمية. أظيرت نتائج الكشؼ عف وجود بعض المعادف الثقيمة كالحديد والخارصيف في غالبية أغذية األطفاؿ حيث كاف أعمى تركيزيف ت الحصوؿ عمييما ىو في منتج السيريالؾ )القمح و العسؿ( والرز بحميب والبالغ يف جزء بالمميوف و جزء بالمميوف عمى التوالي. أوضحت نتائج الكشؼ عف المموثات المايكروبايولوجية في أغذية األطفاؿ وجود بكتيريا E.coli وperfringens Clostridium وCl.difficile وsubtilus Bacillus وaureus Staphylococcus وB.subtilus في سيريالؾ )قمح وعسؿ( وسيريالؾ )حنطة وحميب وخميط فواكو( ورز بحميب وCornflilakes وCocopope عمى التوالي وبأعداد >?8 و> 8 ;8 وت./غ عمى التوالي في حيف بمغ العدد الكمي لألحياء المجيرية > 9 81 و@ 8 81 و 8 81 و= 81 8 و 81 8 وت./غ في ىذه المواد أما Nesquik وOsmospase أظيرت النتائج خموىا مف التموث بأي نوع مف أنواع األحياء المجيرية. بينت نتائج تأثير تغذية الفئ ارف بأغذية األطفاؿ الحاوية عمى العناصر الثقيمة في معايير صور الد لمفئ ارف أف العدد الكمي لكريات الد البيضاء WBC قد ارتفعت اعدادىا معنويا عند المستوى )0.05>P( حيث كانت 5.70 و خمية/مم. أما االعداد الكمية لكريات الد الحم ارء RBC فقد لوحظ عد حدوث تغيير معنوي في أعدادىا في الحيوانات المعطاة لمجموعة أغذية األطفاؿ حيث كانت و خمية/مم عمى التوالي مقارنة مع مجموعة السيطرة 7.12 خمية/مم. أما بالنسبة لحج الخاليا المرصوصة HCT فقد تأثرت في الفئ ارف المعطاة لمجموعة أغذية األطفاؿ حيث سببت ىذه األغذية انخفاض في حج الخاليا المرصوصة HCT مقارنة مع مجموعة السيطرة حيث كانت النتائج و %32.40 بينما مجموعة السيطرة كانت % أما قيمة معدؿ حج الكرية MCV فإنيا انخفضت معنويا في حالة الفئ ارف المعطاة لمجموعة أغذية األطفاؿ حيث كانت و µm 3 عمى التوالي مقارنة بمجموعة السيطرة والتي سجمت.µm كذلؾ بينت النتائج حصوؿ تغي ارت نسيجية في الكبد والكمى بعد تغذية الفئ ارف عمى مجموعة أغذية األطفاؿ الحاوية عمى العناصر الثقيمة حيث أف التأثي ارت النسيجية بدت واضحة مقارنة مع مجموعة السيطرة. The Concentration of Heavy Metals and Microbial Contaminants in Baby Food Zahraa Dhafer AbdulHameed; Rafid Khalil and Ilham I. Tami Food Science Dep. College of Agric. Tikrit Uni. ABSTRACT Key Words Heavy Metals, Microbial Contaminants, Baby Food Correspondence Zahraa D. AbdulHameed mooner_albkrh@yahoo.com Study involved carrying out chemical tests and microbiological tests to detect the heavy metals and biological pollutives are found in samples of baby food. So the results show the heavy metals such as iron and zinc are found in more than one type of baby food. The two highest amounts of concentration that had been obtained were in Cerelac, wheat and honey, products and rice with milk which came to a part per million and a part per million successively. The results of examination for microbiological pollutives in baby food show the existence of bacteria E.coli, Clostridium perfringens, Cl.difficile, Bacilluss, staphylococcus aureus, B.subtilus, in cirilac (wheat and honey) and )( البحث مستؿ مف رسالة ماجستير لمباحث األوؿ.

2 cirilac (eheat, milk, fruit mixture) and rice with milk and cornflakes and cocopope successively with amounts reached to 18.35, and gram/o.t.m, while the total amount of microbes 310, 610, 310, 910, gram/o.t.m, in these materials. But the results show that nesquik and Osmospase are free from the pollution by any kind of these microbes. The results of the infection on rat feeding with baby food, group of cereals and its products which contained on heavy elements show in standards pictures of rat blood that the total number of hemoleukocytes WBC has abstractly raised in number at level (P<0.05) when it was 5.70 and mm 3 / cell in sequence when the rats were feeding on baby food compared with group of control which were 3.90 mm 3 /cell. As to the size of closely packed cells HTC it was affected on rats given group of baby food as this food caused lower in the size of closely packed cell HTC compared with group of control as the results were 33.40% and 32.40% while group of control were 42.40%. As to the rate of size of globule MCV it has abstractly gone down in condition that rats given to group of baby foods as they were and µm 3 in sequence compared with group of control which recorded 50.0 µm 3 while there was abstract change an rats given to group of cereals and its products as they recorded 51.3, 51.7, µm 3, in sequence compared with the group of control which recorded µm 3. The results show many of tissue changes after the feeding of rats on baby food which contained heavy elements compared with group of control. المقدم ة تتنوع أغذية األطفاؿ بشكؿ كبير فمنيا ما يكوف مجففا مثؿ الحبوب والحساء وبعضيا يكوف بشكؿ خمطات جاىزة لمشرب مثؿ العصائر وأخرى قد تكوف مدمجة بمشتقات الحميب أو الصويا وخمطات مغمية جاىزة لألكؿ مف الفواكو والخض اروات وجميعيا تيدؼ إلى تغذية األطفاؿ وتحفيز النمو المناسب لي وتزويدى بالبروتينات والدىوف والسكريات واأللياؼ والمغذيات األخرى التي يحتاجوف إلييا Lloyd( وAndreia 9188(. يعد األطفاؿ وصغار السف مف أكثر الفئات الحساسة لمتعرض لمتموث البيئي إضافة إلى أنو صغر كتمتي ونمو وتطور أنظمتي بما فيو تطور الدماغ يوضح مدى التأثي ارت الصحية البيئية حتى مف الت اركيز المنخفضة مف التموث Gian( وآخروف أشار Salah وآخروف (2013) إلى احتمالية تموث العصائر وأغذية األطفاؿ الحاوية عمى فواكو مف الفواكو المزروعة في.)2009 ترب مموثة أو قد يحدث التموث أثناء م ارحؿ العممية التصنيعية. تعد المعادف الثقيمة مف المموثات العارضة ألغذية األطفاؿ المصنعة والجاىزة لمتناوؿ عندما تزيد عف الحدود المسموح بيا فقد أشار Tokalioglu وGurbuz (2010) إلى تواجد النحاس والحديد في العديد مف أغذية األطفاؿ المتكونة مف خميط مف الفواكو أو متكونة مف الدجاج أو مف األرز. أشار Navarro )911(Aluarez إلى احتواء بعض أغذية األطفاؿ الحاوية عمى السبانغ عمى عنصر األلمنيو في حيف ت الكشؼ مف و قبؿ )@911( Winiarska عف وجود الرصاص والكادميو بالحدود غير المسموح بيا في بعض خمطات أغذية األطفاؿ. تحتوي منتجات الحميب كافة مثؿ الحميب المجفؼ ومنتجات الحبوب لمرضع عمى مستويات عالية مف الكربوىيد ارت مثؿ Enterobacteriacea النشا والسكروز والالكتوز والمعادف والتي تعزز مف إنتاج وانتشار السمو الداخمية Reyes( وآخروف 2007(. تناولت العديد مف األبحاث تموث أغذية األطفاؿ الرضع باألحياء المجيرية المرضية والتي تشمؿ Entero bocte sakazakii وآخروف 2008(. بكتريا Shadlia( وspp Bacillus وspp taphylococcus المرضية مف األنواع االنتيازية والتي ي ارفؽ وجودىا عدوى غذائية حادة لدى الرضع واألطفاؿ في مدة الفطا وىي بكتريا عصوية ال ىوائية اختيارية وسالبة لصبغة ك ار موجودة في القناة اليضمية لمحيوانات وفي الطبيعة تتموث األغذية بيا تحت الظروؼ السيئة والتي تتضمف عوامؿ مختمفة مثؿ درجة الح اررة وانتقاؿ األحياء المجيرية عف طريؽ التالمس باليد والحش ارت والفقريات الصغيرة واألجيزة

3 إضافة إلى حصوؿ التموث أثناء اإلنتاج والتحضير وخزف الغذاء )2003 al.,.)alholy et al., 2011 Hamilton et أشار Anderson وآخروف (1995) إلى كثرة تموث أغذية األطفاؿ ومنتجات الحميب المجفؼ ببكتريا.B cereas إذ أاصبحت ىذه البكتريا مف األحياء المجيرية الميمة المسببة لمتسم الغذائي وعزلت مف الحميب في جميع م ارحؿ التصنيع وربما يصؿ أعدادىا إلى مستويات مرتبطة بإنتاج السمو الداخمية. تمتمؾ.B cereas أىمية خاصة في األغذية المجففة لكونيا ليا المقدرة عمى تكوف السبو ارت التي تتكوف مف البقاء في مستويات مختمفة مف مستوى الجفاؼ وفي المعامالت الح اررية المستخدمة في العمميات التصنيعية مثؿ البسترة. أشارت العديد مف األبحاث إلى قدرة السبو ارت عمى االلتصاؽ عمى المعدف المقاو لمصدأ Stainless steel ومقاومتيا لعمميات التنظيؼ في معامؿ األغذية Tauveron) وآخروف =911( وأكدت األبحاث وبصورة واضحة دور األجيزة في المشاركة في تمويث المواد مما ينتج عنو أعداد عالية مف السبو ارت المتواجدة في المواد الغذائية إذ تمتمؾ القدرة عمى مقاومة البسترة والخزف في بيئات جافة ولمدة طويمة وعند إعادة الترطيب تتحوؿ السبو ارت إلى خاليا ىذه السبو ارت خضرية منتجة لمسمو Tunio( وآخروف 2013(. أشار Ronald وSantos (2001) إلى تواجد بكتريا Staph. aureus في أغذية األطفاؿ وىي بكتريا عصوية موجبة لصبغة ك ار ال ىوائية اختيارية موجودة بصورة طبيعية في جمد اإلنساف خصوصا حوؿ األنؼ واألظافر وىي مف األحياء المجيرية المعروفة بإحداثيا لمتسم الغذائي وتمتمؾ القدرة عمى البقاء لمدة طويمة في المنتجات الغذائية المجففة. أوضح Shipra وآخروف (2004) إلى إمكانية تواجد المواد المسرطنة في المواد الخا المستخدمة في تحضير أغذية األطفاؿ أو مف الممكف أف تكوف موجودة في الغذاء المصنع ومف بيف المنتجات المستخدمة في تحضير أغذية األطفاؿ ىي الحبوب والحميب والتي تعد مف المواد المعرضة بصورة كبيرة لمتموث بالسمو الفطرية خصوصا تمؾ المنتجة مف.Aspergillus flavus A. parasitius, Penicillus, Fusarium الهدف من الد ارسة 8 التحري عف المموثات الكيمياوية والبايولوجية في األغذية الجافة وخاصة التي يت استيالكيا كثي ار ومتوفرة في األسواؽ المحمية. المختبرية وخاصة في معايير صور الد والصفات 9 التحري عف ما تسببو ىذه المموثات مف أض ارر لمحيوانات الكيموحيوية واألنسجة الداخمية. المواد وط ارئق العمل جمعت عينات أغذية األطفاؿ مف األسواؽ المحمية لمدينة بغداد والجدوؿ )8( يوضح تمؾ العينات. جدول )1( عينات المواد الغذائية التي جمعت من االسواق المحمية لمدينة بغداد. تاريخ االنتهاء تاريخ اإلنتاج العالمة المادة الغذائية 918=/89/@ 918;/</@ Nestle أغذية األطفال سيريالؾ )قمح عسؿ) 918</89/9 918;/=/9 Baby Care سيريالؾ )حنطة حميب خميط فواكو( 918</81/88 918;/;/88 نينوالؾ رز بحميب 918</;/ 918;/</ Kellogges الذرة المحمصة( )رقائؽ Corn flakes 918</</9> 918;/</9> Nestle Nesquik )ك ارت الحبوب الكاممة( 918</88/= 918;/88/= أوزمو Osmospace 918</@/8< 918;/@/8< Kellogges Cocopopce )ذرة بمشوكوالتة(

4 حيث لبكتيريا الفحوصات المايكروبايولوجية الفحوصات المايكروبايموجية ألغذية األطفال غير الممونة استخد جياز Tampo في إج ارء الفحوصات المايكروبايموجية ألغذية األطفاؿ غير الممونة والموضحة في الجدوؿ )9( أجريت الفحوصات المايكروبايولوجية والتي شممت العدد الكمي البكتيري (TBC) Total bacterial count القولوف (TC) Total coliform وبكتيريا E. Coli والمكو ارت العنقودية الذىبية والخمائر واألعفاف لجميع النماذج غير الممونة باستعماؿ جياز والعدد الكمي والبكتيريا المكونة لمسبو ارتBacteria Spore Forming Tampo والذي يعتمد عممو عمى االمتصاص الضوئي ويمثؿ الجدوؿ )9( جميع المواد التي أجريت الفحوصات المايكروبايولوجية ليا باستعماؿ ىذا الجياز وحسب الطريقة أدناه اعتمادا عمى تعميمات الشركة المنتجة لمجياز. 9< وزف 8 غ مف كؿ نموذج وأضيؼ إلى قنينة حاوية عمى جيدة لمحصوؿ عمى التخفيؼ 8/81. 99< 8 سحب 9 ممميتر مف النموذج في الفقرة )8( وأضيؼ إلى قنينة تحتوي عمى ممميتر مف الماء المقطر المعق ورجت القنينة بصورة المخصص لحساب كؿ نوع مف أنواع األحياء المجيرية المطموب حسابيا وحضر الوسط بإضافة ممميتر مف الوسط الزرعي السائؿ ممميتر مف الماء المقطر المعق إلى محتويات عمبة خاصة تحتوي مسحوؽ الوسط الزرعي المتخصص وأجريت العممية بأكمميا تحت ظروؼ معقمة. يعرؼ الجياز بالكارت لكؿ فحص حيث وزع النموذج المتكوف مف الفمر Filler عمى فجوات الكارت الصغيرة والبالغ عددىا?; فجوة. ; ; ت 8 ممميتر والمحضر في الفقرة )9( بواسطة جياز حضنت الكارتات في الحاضنات حسب الفحص المطموب مف درجة ح اررة ووقت إذ بمغت درجة الح اررة الحضف بالنسبة لمعدد الكمي البكتيري والمكو ارت العنقودية الذىبية والعدد الكمي لبكتيريا القولوف وبكتيريا E.Coli لمسبو ارت > مدة ;9 ساعة في حيف بمغت درجة الح اررة لحساب الخمائر االعفاف >9 لمدة 9< ساعة. جدول )2( أغذية األطفال التي أجريت لها الفحوصات المايكروبايموجية باستعمال جهاز Tampo 9 سيريالؾ )قمح وعسؿ( المادة سيريالؾ )حنطة و حميب وخميط فواكو( العالمة Nestle Baby Care ; رز بحميب Corn flaks )رقائؽ الذرة المحمصة( نينوالؾ Kelloggeg والبكتيريا المكونة الفحوصات المايكروبايموجية لمعينات الممونة استخدمت الطريقة التقميدية وىي طريقة صب األطباؽ Pour Plate مف قبؿ Ranjan )<911( المايكروبية لمعينات الغذائية الممونة بعد تحضير األوساط الالزمة في عممية العد والتي شممت 8 المرؽ المغذي الصمب Nutrint agar استعمؿ ىذا الوسط في حساب العد الكمي البكتيري. 9 وسط الماكونكي الصمب Maconkey agar استعمؿ في حساب العدد الكمي لبكتيريا القولوف و بكتيريا.E.Coli وسط صفار البيض الصمب Egg yolk agar استعمؿ في تنمية و تشخيص األنواع البكتيرية الالىوائية والمكونة لمسبو ارت. ; وسط الصويا تربتوف الصمب Tryptone soya agar في حساب األعداد

5 ح اررة استعمؿ في تنمية وعزؿ البكتيريا اليوائية المكونة لمسبو ارت. < وسط مستخمص البطاطادكستروز الصمب Poteto dextrose agar استخد في حساب عدد الخمائر واألعفاف. = وسط المانيتوؿ الممحي الصمب Mannitol salt agar استخد ىذا الوسط في حساب وعزؿ المكو ارت العنقودية الذىبية. عقمت جميع األوساط في المؤصدة بدرجة ح اررة 898 وضغط >8 < مدة 9 باوند/إنج ;?9; النامية وسجمت النتيجة. ساعة فيما عدا أطباؽ الخمائر واألعفاف حضنت بدرجة ح اررة لمدة >8 دقيقة وحضنت األطباؽ بدرجة 9< 1 لمدة تشخيص األحياء المجهرية المعزولة من أغذية األطفال االختبا ارت المظيرية ساعة. حسبت األعداد شخصت البكتريا المعزولة مف أغذية األطفاؿ اعتمادا عمى االختبا ارت المظيرية مف خالؿ مالحظة أشكاؿ المستعم ارت وألوانيا وقواميا عمى األوساط الزرعية المنماة عمييا كذلؾ لوحظت استجابتيا لصبغة ك ار وشكميا تحت المجير بعد التصبيغ وصبغت البكتريا المتوقع تكوينيا لمسبو ارت بصبغة Malachite green وحسب الطريقة التي أوردىا Winn وآخروف )=911(. الفحوصات البايوكيميائية أجريت العديد مف الفحوصات البايوكيميائية والتي شممت عمى 8 9 فحص الكاتميز أجريت حسب الطريقة التي أوردىا )9118(. Bensons اختبار IMVIC أجري فحص األندوؿ واستيالؾ الست ارت حسب الطريقة التي أوردىا Collee ; < = الفحوصات الكيمياوية وآخروف )=@@8(. في حيف أجري فحص المثيؿ األحمر والفوكسبروسكاور حسب الطريقة التي أوردىا )9118(. Bensons فحص تخمر السكريات أجري الفحص حسب الطريقة التي أوردىا )9111(. Macfaddin فحص التجمط أجري حسب الطريقة التي أوردىا Collee وآخروف )=@@8(. فحص إنتاج كبريتيد الييدروجيف أجري حسب الطريقة التي أوردىا Baron وآخروف )@@@8(. فحص تحميؿ اليوريا أجري حسب الطريقة التي أوردىا Atlas وآخروف )>@@8(. فحص الحركة أجري حسب الطريقة التي أوردىا Baron وآخروف )@@@8(. اختبار تخمر المانتوؿ أجري حسب الطريقة التي أوردىا )>911(. Alfred فحص إنتاج أنزيمي الميسيثيز والاليبيز اختبار قدرة البكتريا عمى إنتاج أنزيمي الميسيثيز والاليبيز. استعممت الطريقة المذكورة مف قبؿ Collee تقدير محتوى األغذية من العناصر الثقيمة قدر محتوى األغذية مف المعادف الثقيمة باستخدا جياز Atomic absorption spectrometer و ازرة العمو والتكنموجيا وحسب الطريقة المتبعة مف قبؿ Radwan و (2005). Salama التجربة الحيوية تهيئة الحيوانات المختبرية وآخروف )=@@8( في األمريكي الصنع في استعمؿ في ىذه التجربة?8 فار ذكور Male mouse بالغة مف نوع Albino Norvous norvegicous ت الحصوؿ عمييا مف المعيد العالي لتشخيص العق والتقنيات المساعدة عمى اإلنجاب/جامعة النيريف في منطقة الكاظمية وضعت بصورة انف اردية في أقفاص صغيرة بأبعاد )>5>9 98( س 8@ مصنوعة مف الحديد غير القابؿ لمصدأ.Stainless Steel قسمت

6 8 9 الحيوانات بصورة عشوائية إلى مجموعتيف وبواقع = مكر ارت لكؿ مجموعة وتضمنت المجاميع فحوصات الدم مجوعة السيطرة ت تغذيتيا عمى العميقة القياسية طواؿ الفترة مدة التجربة. المجموعة الثانية ت تغذيتيا عمى خميط متساوي وبوزف مساوي لوزف العميقة القياسية مف مجموعة أغذية األطفاؿ التي أظيرت نتائج فحص جياز Atomic absorption spectrometer احتوائيا عمى عناصر ثقيمة. سحب الد مف الحيوانات في اليو األخير مف التجربة و قس في مجموعتيف مف أنابيب الد احتوت إحداىما عمى مادة Ethyl dimaine tetraacetic acid (EDTA) المانعة لمتخثر إلج ارء فحوصات الد عمييا في حيف أجري لممجموعة االخرى غير الحاوية عمى مادة (EDTA) مباشرة طرد مركزي باستخدا جياز النبذ المركزي Centrifuge عمى سرعة 111 دورة/دقيقة لمدة >8 دقيقة لمحصوؿ عمى المصؿ الذي حفظ بدرجة ح اررة 91 لحيف إج ارء التحاليؿ Titez( >911(. معايير صور الدم ت قياس العدد الكمي لخاليا الد الحم ارء البيضاء (WBC) Total White Blood Cell نماذج الد الحاوية عمى المادة المانعة لمتخثر ox( 6 /مم ) Ride Blood Cell Count (RBC) والعدد الكمي لخاليا الد ( 81 /مم ) كما ت قياس خضاب الد (Hb) Hemoglobin غ/ديسيمتر في.EDTA قدر حج الخاليا المرصوصة Packed Cell Volume (PCV) باستخدا أنابيب شعرية زجاجية مفتوحة الطرفيف ممئت بمد إلى الثمثيف /9 وأغمقت إحدى نيايتييا بواسطة الصمصاؿ أجري ليا عممية الطرد المركزي بالجياز الخاص بيا عند سرعة دورة /دقيقة لمدة 111 8< ال ارسب الدموي Haematocrit reader ومثمت الق ارءة النسبة المئوية لحج الخاليا المرصوصة. حسب معدؿ حج كرية الد الحم ارء Mean Corpuscular Volume (MCV) (MCH) Corpuscularومعدؿ Hemoglobin تركيز خضاب الكرية دقيقة ث قرئ األنبوب الشعري في مق ارء ومعدؿ خضاب الكرية Mean Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration كنسبة مئوية كما أوردىا (2005) Titez في المعادالت اآلتية 10 MCV (Mm) 3 = PCV/RBC 10 MCH= Hb/RBC الد ارسات النسيجية Histological Studies أجريت د ارسة نسيجية فسمجية ألعضاء الكبد والكمى لمفئ ارف لمعرفة مدى تأثرىما بتناوؿ األغذية قيد الد ارسة إذ استعممت طريقة التحضير المذكورة مف قبؿ (1982) Steven and Bancroft إذ غسمت األعضاء المثبتة بمحموؿ بويف بالكحوؿ االثيمي )1<%( لعدة م ارت ث أجريت بعدىا عممية االنكاز شممت )1< 811(% ث أجري بعدىا عممية الترويؽ بإم ارر األعضاء عمى ت اركيز متصاعدة مف الكحوؿ االثيمي Clearing باستعماؿ ال ازيميف ث عممية التشريب Xylene Infiltration والطمر Embedding بقوالب خاصة مف شمع البا ارفيف بدرجة انصيار تت اروح بيف =>?> وتركت ىذه القوالب لتجؼ. حضرت مقاطع مستعرضة ومتسمسمة لألعضاء بسمؾ ش ارئح زجاجية بواسطة الصؽ ىاوبت المزدوجة < مايكروف باستعماؿ المش ارح اليدوي وثبتت ىذه النماذج عمى Haupt, s Adhesive وصبغت جميع المقاطع باستعماؿ صبغة ىاويسىيماتوكميف HarrisHaematoxyline and Eosin أجري بعدىا عممية التحميؿ Mounting بتغطية الش ارئح النسيجية بالغطاء الزجاجي باستعماؿ مادة الكامي ار المثبتة عمى المجير. التحميل اإلحصائي الكميسيريف. فحصت الش ارئح النسيجية باستعماؿ المجير المركب والتقطت العديد مف الصور باستعماؿ نفذت التجربة بموجب التصمي العشوائي الكامؿ باستعماؿ النموذج الخطي (CRD) Complete Randomized Design General linear Model ضمف البرنامج اإلحصائي الجاىز وأجري تحميؿ التبايف )9118( SAS واستعمؿ اختبار

7 (1955) Duncan لتحديد معنوية الفروقات في حالة وجودىا ما بيف المتوسطات المختمفة عند مستوى احتمالية >101. النتائج والمناقشة العناصر المعدنية المموثة ألغذية األطفال يوضح الجدوؿ )8( العناصر المعدنية المموثة لبعض أغذية األطفاؿ إذ يالحظ ظيور الحديد والخارصيف في غالبية نماذج أغذية األطفاؿ المفحوصة وبت اركيز مختمفة عدا منتج Cocopope الذي خال تماما مف كؿ أنواع العناصر المعدنية الثقيمة. يالحظ مف الجدوؿ أف أعمى تركيز لمحديد ظير في السيريالؾ )قمح وعسؿ( وبمغ جزء بالمميوف تاله Osmo space وNesquik ورز بحميب Corn flakes وسيريالؾ. جدول )1( العناصر المعدنية الثقيمة الموجودة في بعض أغذية األطفال تركيز العناصر المعدنية الثقيمة )جزء بالمميون( نماذج أغذية األطفال المفحوصة Ni Zn Pb Cd Fe Cu سيريالك )قمح وعسل( سيريالك )حنطة حميب خميط فواكه( رز بحميب Cornflakes )رقائق الذرة المحمصة( Nesquick )ك ارت الحبوب الكاممة( Osmospace Cocopope )ذرة بالشوكوالتة( )حنطة وحميب وخميط فواكو( والبالغة جزء بالمميوف عمى التوالي. أشار Johnson وSamson )918( إلى تواجد الرصاص Pb في نماذج مختمفة مف خالئط أغذية األطفاؿ الذيف تت اروح أعمارى ما بيف = إلى 89 شير بت اركيز ت اروحت ما بيف إلى جزء بالمميوف وقد أشار إلى أنو قد يكوف مصدر ىذه الكميات القميمة جاءت مف تموث المنتوج خالؿ م ارحؿ التصنيع أو مف مواد التعبئة والتغميؼ المستعممة وقد أشار إلى أف ىذه الت اركيز في غذاء األطفاؿ ال تشكؿ أي خطورة عمى األطفاؿ في حيف ت اروحت ت اركيز الكرو والنحاس والحديد )0.00 إلى 0.060( جزء بالمميوف و) إلى 5.04( جزء بالمميوف و) 1.04 الى 36.6( جزء بالمميوف عمى التوالي وقد أشار Kon وآخروف )9181( إلى حاجة جس األطفاؿ إلى كميات قميمة جدا مف الحديد لتطوير الجس واصالح األنسجة وىو يعد مف العناصر الضرورية لمجس وأشارت المواصفات القياسية الع ارقية بالرق 9?;8 لعا 9111 الخاصة بمواصفات رقائؽ الذرة Corn flakes إلى الحدود القصوى لبعض المموثات المعدنية ليا والتي شممت عمى النحاس والزنؾ والخارصيف والتي يجب أف ال تزيد ت اركيزىا عف 1.5 ممغ/كغ و 0.25 ممغ/كغ عمى التوالي. وعميو يحبذ التأكيد عمى الدور الرقابي لمجاز المركزي لمتقييس والسيطرة النوعية وتعزيز دور أجيزة الرقابة الصحية عمى جميع األغذية المصنعة محميا والمستوردة لضماف حماية المستيمؾ. ونظ ار لكثرة المنتجات المطروحة في األسواؽ ولصعوبة وضع مواصفة قياسية لكؿ منيا لذا نوصي بوضع مواصفات قياسية لممواد األولية الداخمة في عممية تصنيع تمؾ األغذية. األحياء المجهرية المموثة ألغذية األطفال يوضح جدوؿ )9( األحياء المجيرية التي عزلت وشخصت مف عينات خالئط أغذية األطفاؿ التي جمعت مف االسواؽ المحمية لمدينة بغداد إذ يالحظ مف الجدوؿ خمو منتجي Nesquik )ك ارت الحبوب الكاممة( وOsmospace مف األحياء المجيرية المموثة في حيف احتوت األنواع األخرى مف األغذية عمى أنواع مختمفة مف األحياء المجيرية.

8 يالحظ مف جدوؿ )9( احتواء منتج السيريالؾ )قمح وعسؿ( عالمة الفحوصات الشكمية والمزرعية والبايوكيميائية إذ ظير لوف المستعم ارت ورديا الالكتوز الموجود في الوسط وانتاج الحامض Nestle عمى بكتيريا E. coli عمى اعتمادا عمى وسط الماكونكي الصمب نتيجة تخميرىا سكر وكانت عصوية وقصيرة وسالبة لصبغة ك ار تحت المجير إضافة لقدرتيا عمى استيالؾ الكمكوز وانتاج الحامض. أظيرت نتيجة موجبة لفحص االندوؿ مف خالؿ ظيور حمقة حم ارء مف االندوفينوؿ عند إضافة كاشؼ الكوفاكس Kovaks داللة عمى قدرتيا عمى تحميؿ الحامض األميني التربتوفاف Farshed( في حيف تغيير لوف الوسط في فحص المثيؿ األحمر إلى أظيرت العزلة نتائج سالبة لفحص الفوكس بروسكور والستريت لعد تغيير الموف إضافة الكاشؼ في حيف ل يتغير لوف الوسط مف األزرؽ إلى الموف األحمر عند إضافة الكاشؼ داللة عمى إيجابية الفحص كما في األوؿ إلى الموف األحمر بعد األخضر بعد نياية مدة الحضف في الثاني 8< Vila).)9119 E.Coli دقيقة مف وآخروف ظيرت المستعم ارت ببريؽ أخضر لماع معدني عند تنميتيا عمى وسط االيوسيف مثميف األزرؽ مما يؤكد عائديتيا إلى واالوكسديز وعد إضافة لمفحوصات إمكانيتيا البايوكيميائية األخرى الموضحة في الجدوؿ والتي تؤكد عد قدرتيا عمى إنتاج مف إنتاج كبريتيد الييدروجيف الجدوؿ ظيور نوعيف مف البكتيريا الالىوائية وىي H 2 S Cl. Perfrengens في حيف أثبتت قدرتيا عمى إنتاج أنزي الكاتميز. وdifficile Cl. أنزيمي اليوريز يوضح كذلؾ في كؿ مف السيريالؾ )حنطة وحميب وخميط فواكو( والرز بحميب عمى التوالي فقد شخصت عمى أنيا Cl. perfrengens بعد التأكد مف صفاتيا المزرعية والمجيرية مف حيث الشكؿ إذ تميزت بأنيا بكتيريا عصوية موجبة لصبغة ك ار وخالؿ النتائج المستحصؿ عمييا مف الفحوصات البايوكيميائية إذ أعطت نتيجة سالبة لفحص الكاتميز مف خالؿ عد قردة العزلة عمى تكوف الفقاعات اليوائية الغازية وعد قدرتيا عمى تغيير لوف الكاشؼ المستخد في فحص االوكسيديز إلى الموف البنفسجي مما يدؿ عمى سالبية الفحص تميزت العزلة بقدرتيا عمى تخمير الكموكوز والسكروز والمالتوز والالكتوز والفركتوز مف خالؿ تغيير لوف الوسط إلى األصفر نتيجة تكوف الحامض إضافة إلنتاجيا لمغاز الذي تجمع في أنبوبة درىا كما أنيا غير مخمرة لسكر المانتوؿ وغير متحركة لعد انتشار النمو حوؿ مكاف الطعف ومولدة لكبريتيد الييدروجيف H 2 S لتكوف الموف األسود في الوسط الناتج مف تفاعؿ كبريتيد الييدروجيف المنتج مف البكتيريا مع الحديد الموجود في الوسط وتوليد كبريتيد الحديدوز األسود الموف ول تظير العزلة أي حمقة حم ارء في فحص االندوؿ مما يدلؿ عمى سالبيتيا ليذا الفحص في حيف كانت Cl. difficile غير منتجة لكبريتيد الييدروجيف وغير متحركة إضافة لعد إنتاجيا ألنزي الاليبيز ونوع واحد مف البكتيريا اليوائية وىي.B subtilus في كؿ مف Corn fleks وCocopope عمى التوالي إضافة لظيور بكتيريا Staph.aureus في Cocopope أيضا وقد شخص جنس Bacillus عمى أنو B.subtilus اعتمادا عمى بعض الفحوصات البايوكيميائية الميمة إذ تميزت بأنيا منتجة ألنزي الكاتميز وسالبة لفحص االوكسيديز واليوريز وذات قدرة عمى تخمر الكموكوز وعد إنتاج الغاز وعد قدرتيا عمى تخمر الالكتوز في حيف تمكنت مف تخمر الكالكتوز والكموكوز والمانتوؿ والسكروز والفركتوز والزيموز وعد قدرتيا عمى النمو في ظروؼ ىوائية. أشار Falegan وOluwaniyi )>918( إلى أنو ىناؾ العديد مف العوامؿ التي تحدد نوع وعدد األحياء المجيرية المموثة لألغذية ومنيا أغذية األطفاؿ أىميا مصادر المواد األولية المستخدمة وطريقة التصنيع ونوعية الميكروبي ألجواء مكاف التصنيع. الماء المستخد ومقدار التموث

9 جدول )2( نتائج الفحوصات المظهرية والمزرعية والتنمية لألنواع البكتيرية المموثة ألغذية األطفال IM Vic المادة الغذائية البكتريا المعزولة الصفات المظهرية والمزرعية التنمية مكونة لمسبو ارت الكاتميز الالبتيز الميسيننيز البوريز أنزيم التجمط إنتاج H2S النمو عمى وسط المنيتول الحركة األوكسيديز لوف المستعم ارت وردية عمى وسط الماكونكي الصمب جافة متوسطة الحج E. Coli سيريالؾ )قمح وعسؿ( محدبة منتظمة مستعم ارت بموف أخضر ب ارؽ معدني عمى وسط االيوسيف مثميف األزرؽ ىوائية موجبة لصبغة ك ار عصوية صغيرة غير مكونة لألبواغ Clostridium perfrengens سيريالؾ )حنطةحميبخميط فواكو( مستعم ارت كبيرة إلى متوسطة الحج ممساء موجبة لصبغة ك ار عصوية مكونة لألبواغ ال ىوائية سالبة لفحص األندوؿ Clostridium difficile بحميب رز مستطرقة ممساء ناعمة موجبة لصبغة ك ار مكونة لألبواغ متحركة ال ىوائية مسننة الحواؼ عمى األكر المغذي الصمب موجبة لصبغة ك ار عصوية منفردة أو بشكؿ سالسؿ قصيرة مكونة ألبواغ مركزية أو شبو مركزية ىوائية Bacillus sabtilus Cornflakes Nesquick Osmospasc دائرية ممساء ذىبية الموف كروية عنقودية موجبة لصبغة كرو غير مكونة لألبواغ Staphylo coccus oreous مسننة الحواؼ عمى األكر المغذي الصمب موجبة لصبغة ك ار عصوية منفردة أو بشكؿ سالسؿ قصيرة مكونة ألبواغ مركزية أو شبو مركزية ىوائية Bacillus sabtilus Cocopope يعني ل يجر الفحص إيجابية االختبار سالبة االختبار

10 شخص جنس Staphylococcus عمى مستوى النوع اعتمادا عمى صفاتو المزرعية وقدرتو عمى النمو وتحمؿ الت اركيز الممحية العالية لوسط النمو إضافة لصفاتيا المورفولوجية بعد تصبيغيا بصبغة ك ار إذ ظيرت تحت المجير بموف بنفسجي كروية بتجمعات عنقودية أما فيما يتعمؽ بالفحوصات البايوكيميائية فقد أثبتت قدرتيا عمى إنتاج أنزي الكاتميز والاليبيز والميسيثيز واليوريز وأنزي التجمط إضافة لقدرتيا عمى النمو في وسط المانتوؿ وكذلؾ إنتاج H 2 S وأعطت نتيجة موجبة لفحص.IMVIC أشار Kim وآخروف )9188( إلى احتواء = نماذج مف خالئط أغذية األطفاؿ الحاوية عمى حبوب مف أصؿ 811 نموذج عمى بكتيريا Cronobacter Spp في حيف > نماذج مف ; نموذج تعتمد باألساس في مكوناتيا عمى الرز احتوت عمى بكتيريا Bacillus cereus و 89 نموذج مف أصؿ 1 القولوف مف أغذية األطفاؿ الحاوية عمى الحبوب والعسؿ في حيف أشار والبعض منيا ممرضة مف والموز منيا وOso نموذج يحتوي عمى العسؿ احتوى عمى البكتيريا ذاتيا Ikeh وآخروف )9118( 8= نموذج مف أصؿ 811 Streptococcus وfaecalis Bacillus spp. في حيف عزلت بكتيريا إلى عزؿ العديد مف البكتيريا نوع مف أغذية األطفاؿ الحاوية عمى الذرة والحميب وفوؿ الصويا والبيض وStaph.aureus وKlebsiella وColi.E وأشار Fawole )8@?@( إلى أف بعض األحياء المجيرية النامية عمى الغذاء بسبب التسم و بعضيا بسبب فساد ىذا الغذاء ونوع األحياء المجيرية المسببة لمفساد يعتمد عمى الكائف الحي نفسو وعمى مكونات تركيب الغذاء. وأظيرت النتائج المستحصؿ عمييا عد تموث أغذية األطفاؿ بأي نوع مف أنواع الفطريات. ويوضح الجدوؿ )( االعداد البكتيرية التي ت الحصوؿ عمييا في خالئط أغذية األطفاؿ المختمفة إذ يالحظ انخفاض في األعداد المتواجدة في جميع النماذج عمى تنوعيا واقتصار األنواع المموثة عمى األنواع البكتيرية المكونة لألبواغ المتحممة لمظروؼ البيئية غير المالئمة لمنمو إذ تشترؾ جميع النماذج بانخفاض الفاعمية المائية الغير مالئمة لنمو غالبية األنواع البكتيرية. النماذج سيريالك )قمح وعسل( سيريالك )حنطةحميب خميط فواكه( رز بحميب العدد الكمي جدول )3( األعداد المايكروية المموثة لخالئط أغذية األطفال العدد الكمي لبكتريا القولون Clostridius. spp Bacillus subtilub Stoph.aureus E. Coli 9@ 7 x 10 2 خمائر وأعفان 8? 9? < 8? 8< 9 x x x x 10 1 Cornflakes Nesquick Osmospasc Cocopope تأثير العناصر الثقيمة في مجموعة أغذية األطفال في صورة الدم يبيف جدوؿ );( و جدوؿ )>( تأثير مجموعة أغذية األطفاؿ في معايير صور الد عمى الفئ ارف المعطاة لمدة يوما?9 وبينت النتائج أف العدد الكمي لكريات الد البيضاء WBC قد ارتفعت أعدادىا معنويا عند المستوى )0.05>P( حيث كانت 5.70 و خمية/مم عمى التوالي مقارنة مع مجموعة السيطرة التي كانت 3.90 خمية/مم. أما االعداد الكمية لكريات الد الحم ارء لمجموعة أغذية األطفاؿ حيث كانت 6.96 و 7.05 RBC فقد لوحظ عد حدوث تغيير معنوي في أعدادىا في الحيوانات المعطاة خمية/مم عمى التوالي مقارنة مع مجموعة السيطرة 7.12 خمية/مم.

11 جدول )4( يوضح تأثير العناصر الثقيمة في مجموعة أغذية األطفال عمى معايير صور الدم Treatments (metal) WBC (x 10 9 / L) Mean ± SD HGB (g/dl) RBC (x / L) Control مجموعة أغذية األطفاؿ (P<0.05), (P<0.01). جدول )5( يوضح تأثير العناصر الثقيمة في مجموعة أغذية األطفال عمى معايير صور الدم Mean ± SD Treatments (metal) HCT (%) MCV (fl) MCH (pg) MCHC (g/dl) Control ± ± ± ± مجموعة أغذية األطفاؿ (P<0.05), NS Nonsignificant. أما بالنسبة لقيمة خضاب الد HGB فقد انخفضت قيمتيا وحصؿ تغيير معنوي في مجموعة الفئ ارف المعطاة حيث كانت قيمتيا و سببت ىذه خمية/مم مقارنة مع مجموعة السيطرة التي قيمتيا خمية/مم. يتضح لنا مف النتائج أف حج الخاليا المرصوصة األغذية انخفاض في حج الخاليا المرصوصة HCT قد تأثرت في الفئ ارف المعطاة لمجموعة أغذية األطفاؿ حيث HCTمقارنة مع مجموعة السيطرة حيث كانت النتائج و %32.40 بينما مجموعة السيطرة كانت % أما قيمة معدؿ حج الكرية MCV فإنيا انخفضت معنويا في حالة الفئ ارف المعطاة لمجموعة أغذية األطفاؿ حيث كانت و µm 3 عمى التوالي مقارنة بمجموعة السيطرة والتي سجمت.µm وكاف ىناؾ فرؽ معنوي في معدؿ خضاب الكرية MCH في حالة الفئ ارف المعطاة لمجموعة أغذية األطفاؿ حيث كانت قيمتيا و Pg/cell وكانت في مجموعة السيطرة قد سجمت.Pg/cell ول يختمؼ معدؿ تركيز خضاب الكرية MCHC معنويا في حالة الفئ ارف المعطاة لمجموعة أغذية األطفاؿ حيث كانت و %33.00 عمى التوالي مقارنة مع مجموعة السيطرة والتي كانت % أوضح Dabeka وآخروف )=?@8( أف التعرض لمرصاص يؤدي إلى حدوث تخمؼ عقمي وخاصة في األطفاؿ ولو تعرضت األ المرضع لكمية ولو قميمة مف الرصاص تمر ىذه الكمية عبر حميب األ إلى المولود. الزنؾ يؤثر عمى أنسجة الجس الرخوة وكذلؾ عمى صورة الد Oishi وآخروف )9111(. كذلؾ أف الرصاص يؤثر عمى ىيموكموبيف الد مما يسبب فقر الد )9119(. GUO والكادميو يؤثر عمى وظائؼ الكمى كمما ارتفعت نسبتو حيث أف الكادميو مف المعادف متعددة األىداؼ داخؿ الجس ويزداد ترسب ىذا المعدف في hepto toxicity and Nephrotoxicity ويسبب نقص في نسبة الييموكموبيف والييماتوكريت الكبد والكمى مما يؤدي إلى حدوث تسم كبديكموي ElDemerdash وآخروف );911(. وأشار Choi وKim )>911( إلى عالقة المعادف الثقيمة بعممية التخميؽ الدموي ومستوى الحديد حيث وجد أف زيادة الرصاص سبب زيادة معنوية في عدد خاليا كريات الد البيض مع نقص محتوى الحديد في المصؿ بينما ل يظير أي اختالؼ معنوي في كريات الد الحم ارء والييمولكموبيف. ظيور حاالت ترسب لمحديد في الكبد بعد أسبوع وأسبوعيف مف المعاممة بالكادميو مما يدؿ عمى حدوث نوع مف السمية الشديدة وحدوث أنيميا بسبب نقص محتوى الحديد مف الييموكموبيف DjukicCosic وآخروف )?911(.

12 التأثير في أنسجة الكبد يتبيف مف النتائج حصوؿ تغي ارت نسيجية بعد تغذية الفئر اف عمى مجموعة أغذية األطفاؿ الحاوية عمى العناصر الثقيمة حيث أف التأثي ارت النسيجية بدت واضحة مقارنة مع مجموعة السيطرة كما في الصورة )8( إذ تبيف أف تغذية الفئ ارف عمى مجموعة أغذية األطفاؿ سبب في وجود تنخر Necrosis بؤري منتشر مع وجود ارتشاح إلى الخاليا االلتيابية المزمنة الصورة )9(. كما ىو معمو فإف جميع خاليا الجس تحتاج إلى عنصر الحديد لغرض إدامة الحياة وفي نفس الوقت فإف زيادة كمية الحديد يعتبر ضا ار البروتيف الذي يصنع (Toxic) وىناؾ مركب آخر يعرؼ بػ( Ferritin ) تخزيف الحديد عمى شكؿ وذلؾ مف خالؿ قابميتو عمى إنتاج جذور حرة في الكبد ويعرؼ بػ( Transferritin ) (Ferritin) radical).(free ينقؿ الحديد بواسطة نوع مف إلى خاليا الجس وىو مسؤوؿ عف امتصاص الحديد مف األمعاء يقو بتخزيف كميات الحديد الفائض عف حاجة الجس وعندما يصبح الجس عاج از عف فإنو يترسب عمى شكؿ ىيموسدريف (Himosiderin) وىو نوع آخر مف البروتيف ىذه المادة تترسب بشكؿ رئيسي في الكبد ومف ث في الطحاؿ ترسب مادة الييموسدريف في خاليا الكبد يحدث تنخر وارتشاح في الخاليا الكبدية كما نالحظ في الصورة رق )9( وجود ترسب لمادة الييموسدريف في خاليا الكبد ولكف ل نالحظ حدوث أي تغي ارت نسيجية في أنسجة الكمى )جابر وآخروف 9188(. التأثير في أنسجة الكمى ل تظير النتائج أثناء الفحص النسيجي لمكمى أي تغيي ارت لممجموعة المعطاة ألغذية األطفاؿ مقارنة مع مجموعة السيطرة كما في الصورة );(. حيث تظير الصورة )>( مقطع لكمية الفأر المتغذي عمى مجموعة أغذية األطفاؿ و يظير المقطع شكؿ يشبو الشكؿ الطبيعي والذي يتكوف مف الكبيبات الكموية والنبيبات الكموية )الدانية والقاصة(.

13 المصادر جابر عبد الواحد شمخي زيداف زى ارء كاظ وىشا دينا أحمد )9188( تأثير زيادة الحديد في األغذية عمى أنسجة الكبد الطحاؿ الكمية والقمب في الفئ ارف مجمة جامعة النيريف المجمد ;8 العدد 8. Alfred, E.B. (2005). Bensons Microbiological application in laboratory manual in general microbiology, 9 th ed.,mcgraw Hill Companies. AlHoly, M., Shin, J.H., Osaili, T. and Rasco, B. (2011) Evaluation of a new enrichment broth for detection of Cronobacter spp. In powdered infant formula. J Food Prot 74, Andersson, A., U. Ronner and P. E. Granum, (1995) What Problems does the food industry have with the spore forming Pathogens Bacillus cereus and Clostridium perfringens Int J Food Microbiol (28) Atlas, R. M., Brown, A. F. and Parks, L.C., (1995), Examperimental Microbiolgy, Mosby Year Book,Inc.ST.Louis,USA. Bancroft, J. and Steven, A., (1982). Theory and practice of histological techniques, 2 nd ed., Churchill Livingstone, London, No Baron, E J., Peterson, L. R and Fingld, S. M., (1999), Bailey Scott, s diangnostic microbiology, Mosby year book, New York252pp. Benson, H. F., (2010), Microbiological applications Laboratory manual in general microbiology, 8 th ed.,mcgrawhill companies, Inc.New York. Collee, J. G., Fraser, A. G., Marmian, B. p. and Simmons, A., (1996), Mackie and Mcarteny. Paractical Medical Microbiology, 14 th ed., Churchill Livingston, Inc., New York, pp Dabeka RW; McKenzie AD. and Lacroix GMA. (1988). Dietary intakes of lead cadmium, arsenic and fluoride by Canadian adults a 24hour duplicate diet study. Food additives and contaminants, Duncan, B., (1955). A methodological Analysis of Segregation Indexes. American Sociological Review, 20(2) Eldemerdash, FM, Youself, MI., Kedwany, FS., Baghidadi, HH. (2004). Cadmium induced chanfes in lipid peroxidation blood hematology. Biochemical parameters and semen quality of male rats protective role. Falegan,C.R. and Oluwaniyi,T.T.(2015)Microbial Composition, Antibiotic Sensitivity and proximate composition of popular imported powderd in fantmilk formulas sold in Ado Ekiti, Nigeria,International Journal of Micro_Biology,1,(1) 1024 Farshad,s. and Emamghorashi, F.(2009). The Prevalence of Uirulencegenes of E.col Stains isolated From children with urinary tract infection. Saudi J. Kidney Dis. Transpl.20(4) Fawole MO, Oso B A. Laboratory Manual of Microbiology. Ibadan Spectrum Books Limited, Gian C.; Zaheer D.; Christian D.; Angela M.; Eva M.; Hanna M.; Ma M. and Jennifer W. (2009). Analysis of Toxic Heavy metals (Arsenic, Lead, and Mercury) in selected infant formula milk commercially Available Research Journal, 1 (1) Hamilton, J.V., M.J. Lehone and H.R. Braiz. (2003). Isolation of enterobacter sakazaki from midgut of stomozys catcitrans. Emerging infections diseases, (9) Ikeh, ET.; Okwudili, PE.; Agina, ES, and Odmmodu, Cu, (2001). Microorganisms Associated with Locally Available Infant Wearning Foods injos and Enoirons, Nigeria. Negeria Journal of Paediatrics, 28(1) 713. Kim S.A.; Oh S.W.; Lee Y.M.; Imm J.Y.; Hwang I.G.; Kang D.H. and Rhee M.s. (2011). Microbial contamination of food products consumed by in fants and babies in korea. Applied Microbiology, 59, Kon, N. ; tanaka, K.;Sekigawa, M. ; Negishi, Y.; yoshikawa, N. and Hisata K.(2010).Association between iron status and neuro developmental outcomes amony VLBW infants. Brain and Development,32(10)

14 Lloyd B. and Andrea B. (2011). The Microbiology of cereal and cereal products. Food Quality and Safety magazine. Macfaddin, J. (2000). Biochemical test for indentification of medical bacteria Lippincott William and Wilkins. Philadelphia, USA. Navarro B. and Al Varez G. (2003). Aluminum constant of Spanish infant formula. Food additives and contaminants, Oishi, S. (2000). Culture and memory for emotional experiences Online vs. retrospective judgments of subjective wellbeing. Unpublished doctoral dissertation, University of Illinois, UrbanaChampiagn. Radwan M.A. and Salama A.K. (2006). Market basket survey for some heavy metals in Egyptian fruits and vegetables. Food and chemical toxicology. 44 (8) Ranjan,K.D. (2007). Diagnostic microbiology. Medical college and hospital, medical publishers (p) Ltd Newdelhi. PP 124. Ronald, G.L. and G. Santos (2001). Staphlylcouccus aureus' in guide to food borne pathogens John Wiley and Sons, Inc, New York, USA, 201. Salah F., Esmat I. and Mohamed A. (2013). Heavy metals residues and trace elements in milk powder marketed in Dakahlia Governorate. International Food Research Journal. 20 (4) Samson, R. A.; Hoekstra, E. S. and Oorschot, C. A. (2002).Introduction to foodborne fungi, Institute of the Royal Netherlands Academy of Arts and sciences. Baarn, Netherland. SAS. (2012). Statistical Analysis System, User's Guide. Statistical. Version 9.1 th ed. SAS. Inst. Inc. Cary. N.C. USA. ShadliaMatug, M., K., E. Aidoo, A. Candish and A. Elgerbi. (2008). Evaluation of some antibiotics against pathogenic bacteria isolated from infant foods in North Africa. Open food science journal. (2) Shipra R.; Premendra D.D.; Subhash K.K. and Mukul D., (2004). Detection of Aflatonion Contamination in Milk and in fant Milk produets Indian Markets by Elisa. Food control, 15(1) Tauveron, G., C. Slominany, C. Henry and C. Faille. (2006). Variability among bacillus cereus strains in spore surface properties and influence on their ability to contaminate. Food surface equipment int. j. food microbial. (110) Tietz, Y., (2005), Clinical Biochemistry, 6 th ed., McGraw Hill, New York.825. Tokaliogla S. and Gurbuz F. (2010). Selective determination of copper and Iron in various food samples by the solid phase extraction. Food chemistry. (123) Tunio S.A.; Banos.; JAtt AM; Mals.; Maeem M.; Naeem A.; Hashmis S. and Rohim A. (2013). Evaluation of Bacterial Coutamination of Powdered food prodcts Pakistam Sindhuniu Res. Jour., 45(1) Vila,J.K.; Simon,J. ; Ruiz,J. P.; Horcajada,M.; Barranco A. M. and Mensa,J.(2002).Are quinolone_resistant uropathogenic Escherichia Coli less uirulent? J.Infect.Dis., Winiarska M. (2009). Assessment of infant exposure to lead and cadmium content in infant formulas. Journal Elemental, Winn, J. W., Allen, S., Janda, W., Koneman, E., Procop, G., Schreckenberger, p., and Woods, G., (2006), Konemans Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, 6 th ed. Lippincott Williams and Wilkins, U.S.A.