l^e^ãjö] Ãeæ á^ß ] ŒçŠjÖ íffš¹] ^è ÓfÖ] é~ iæ ÙˆÃÖ íéqçöçè Óe í ] ÜËÖ]æ ín Ö] عدي متعب هادي عدنان مهران زهير صادق رزاق كلية طب الاسنان/جامعة الكوفة كلية الطب/جامعة الكوفة الكلية التقنية الطبية/كوفة الخلاصة هدفت هذه الدراسة الى عزل وتشخيص الانواع البكتيرية الموجودة في الفم والمسو ولة عن حالات تسوس الاسنان والتهابات انسجة الفم كاللثة ومنطقة ما حول السناضافة الى عزل الانواع البكتيرية المتواجدة طبيعيا ذات النشاطات الحيوية والمتسببة في اصابة تجويف الفم. اظهرت نتاي ج هذه الدراسة وجود تنوع واسع وكبير من الاجناس البكتيرية شملت بكتريا spp. Streptococcus التي كانت تمثل اعلى نسبة معنوية بلغت ٣٣,٣% (0.001P ( تليها المكورات العنقودية Staphylococcus aureus بنسبة ٣١,٣% (P0.005) في حين كانت بكتريا Bacillus spp. اقل الانواع المتواجدة وبنسبة %١,٤ وتراوحت نسب تواجد الاجناس البكتيرية المعزولة الااخرىى %١٤,٨ %١٣,٢ %٧,٨ %٤,١ %٣,١ لكل من spp. Lactobacillus spp. Candida spp. Microccocus spp. Actinomyces وعزلات تابعةالى عاي لة Enterobacteriaceae على التواالي وكانت الانواع المعزولة التالية E. coli ) A. viscosus B.cereus S. mutans S. epidermidis E. agglumerans المتساويين بنسب العزل) والنوع.L acidophilus تمثل اعلى نسب الانواع التابعة الى اجناسها والمتواجدة في منطقة اللثة والاسنان وبنسب مختلفة تراوحت %٨٥,٥ %٥٤,٦ %٦٦,٦ %٣٣,٣ و %٧٢ على التوالي. Abstract The study aimed to isolate and identify of the types of bacteria that colonized in the mouth cavity which responsible for dental caries, gingivitis and periodontitis cases, moreover; isolating of microflora which have biochemical activities to cause other oral problem. The results show exciting o large varaity of bacterial genus included Streptococcus spp. which was represent the high significant ratio 33.3% (0.001p), followed by Staphylococcus spp. 31.3% (0.005p). Bacillus spp. was the less existence species 1.04%and the ratios of other bacterial genus were 14.8%, 13.2%, 7.8%, 4.1% and 3.1% for Candida spp., Lactobacillus spp., Actinomyces spp., Micrococcus spp. and isolates of Enterobacteriaceae and Pseudomondaceae. The isolate of S. epidermidis S. mutans, A. viscosus, E. coli, L. acidophilus were representing the higher percentage of species which founding in gingiva and teeth with different ratio about 58.5%, 54.6%, 66.6%, 33.3% and 72% in sequence. And the other species present in lesser ratios. المقدمة : Introduction ا حتل موضوع تسوس الاسنان اهتمام المختصين والباحثين في مجال طب الاسنان لكونه يعتبر مشكلة بالغة الصعوبة لذوي الختصاص علاوة على انه يسبب الما شديدا اكثر من الامراض المعدية الاخرى فضلا عن انه يبقى العامل المسو ول عن فقدان معظم الاسنان في الاعمار جميعها Fosdick et al., ) 1937 و al., 1944.(Becks et وقد وجد ان اكثر من ثلثي الاولاد بعمر (١٧-٥) سنة مصابون بتسوس الاسنان وحوالي (٩٤%) يعانون من تسوس غير معالج او ان اسنانهم محشوة وهو دليل على وجود تسوس مسبق. ويعد تسوس الجذر عند البالغين مشكلة خاصة اذ ان علاج التحطم لهذه المنطقة يعد امرا صعبا لكونها مكسوة باللثة وتبلغ نسبة التسوس عند هذه الفي ة (٢٠%). اما المشكلة الاخرى فهي الاصابة بالتهاب اللثة والتهاب ما حول السن. فالملاحظ ان اكثر من (٦٠%) ممن تتراوح اعمارهم بين (٥٤-٤٥) سنة يعانون من هذه الالتهابات اما من تجاوزت اعمارهم (٦٥) سنة ١٣٠٣
فان نسبة (٨٠%) منهم يعانون من اصابات مماثلة. واما البلغون فيعانون من اصابات اكثر حدة في التهاب اللثة وتحطمها بنسبة (%٥٠) 1997) magazine,.(consumers research يمكن ان تحدث اصابة تجويف الفم بسبب نشاط الجراثيم الموجودة طبيعيا في الفم (Oral) flora والخراجات (Abscesses) واصابات ما حول وتشمل هذه الاصابات تسوس الاسنان caries) (Dental.(Holt et al., 2000) تعد الجرثومة السبحية S. السن (Periodontitis) والتهاب اللثة (Gingivitis) بالاشتراك مع جرثومة عصيات الحليب mutans من اهم انواع الجراثيم المسببة لتسوس الاسنان Grindefjord and ) فقد عدت هذه الاجناس مسببات مهمة لامراض الاسنان Lactobacillus (Twetman, 1999 واحتملت الدراسات الحديثة اشتراك الجراثيم الخيطية Actinomycetes في تفشي مرض تسوس الجذر caries).( Quirynen et al.,1999 ) (Root بصورة شاي عة في الفم الا انها تعد ممرضا انتهازيا ( وعلى الرغم من وجود المبيضة spp. Candida وهي كذلك من اللعوامل المهمة المسببة لمرض Thornton and Terry, (1997 pathogen ان تسوس الاسنان مرض تسببه الجراثيم يصيب الانسجة السنية.(Sato et al., (1997 Candidiasis وهو مرض معد وقابل للانتقال الصلبة ويظهر في مناطق معينة من السن( 1982 (Nolte,.(Houte,١٩٩٤) ينتج التسوس بسبب حدوث تحطم موضعي للانسجة السنية بفعل افرازات الجراثيم الموجودة في الفم ويعتبر التهاب اللثة التهاب شاي ع يصيب الانسجة الرخوة ) الناعمة ( او حافات اللثة الملامسة للاسنان وان وجود انسلاخ في اللثة ناجم في حالات كثيرة عن التهاب ما حول الاسنان الذي ينتج عن تطور افات تسوس الاسنان على سطح الجذر (1997 Hix, (Leary and فصلا عن ان التهاب ما حول السن يكون مسبوقا بالتهاب اللثة 1997) magazine,.(consumers research وينعكس ذلك على تركيب النبيت الجرثومي ان الاختلافات البيي ية في الفم تختلف باختلاف العمر المجهري فعند الولادة يتكون الفم من الانسجة الناعمة فقط مثل اللسان والشفتين وسقف الفم والتي تحتفظ بالرطوبة بواسطة افرازات الغدد االلعابية ويكون الفم معقما عند الولادة لكن سرعان ما يستعمر من قبل.S الجراثيم المحيطة به خصوصا من الام في اثناء الرضاعة فتكون بذلك جرثومة المكورات السبحية salivariusهي الساي دة بنسبة ٩٨% من مجموع النيت الجرثومي وبعد ظهور الاسنان بعد مرور (٦-٩) اشهر يستعمر الفم من قبل جرثومة المكورات السبحية.S mutans وجرثومة.S Sanguis وتستعمر الثة اجناس مختلفة من الجراثيم اللتهواي ية وان هذا التعقيد يزداد بمرور الوقت (1990 al.,.(davis et Materials and Methods المواد وطراي ق العمل : Materials المواد اولا: ا ن جميع الا وساط الزرعية التشخيصية والعامة والكواشف المستعملة والمحاليل هي مصنعة من شركة. Mast وشركة Oxoid Methods طراي ق العمل ثانيا : جمع العينات samples collection -١ تم جمع ١٠١ مسحة من الفم والاسنان للمرضى المراجعين في وحدة تطبيب الاسنان في مستشفى الصدر التعلمي في محافظة النجف الاشرف وذلك للفترة ما بين تشرين الثاني ٢٠٠٦ و نيسان. ٢٠٠٧ ١٣٠٤
وتم اخذ مسحتان من كل مراجع للزرع الهواي ي واللاهواي ي على الاوساط الزرعية الخاصة. نقلت العينات الى المختبر باستخدام المسحة الحاوية على الوسط الزرعي الناقل swab with transport media للحفاظ على حيوية العينة وتجنب التلوث الخارجي. -٢ العزل والتشخيص Isolation & Identification زرعت العينات مباشرة على الا وساط الزرعية المحضرة مسبقا ثم ا جريت الفحوصات المختبرية لتشخيص البكتريا اعتمادا على طريقة كل من (2002, (Smith و ) 1996, al (Collee et المتبعة في التشخيص وكالاتي : ا / التشخيص الخلوي : وتم ذلك بفحص الشريحة المصبوغة بصبغة غرام لمعرفة شكل وتجمع الخلايا البكتيرية وطبيعة تفاعلها مع الصبغة. ب/ التشخيص الزرعي : تضمن تشخيص شكل وحجم المستعمرات البكتيرية وتا ثيرها على الا وساط الزرعية العامة والخاصة والا وساط التشخيصية. ج/ الاختبارات البايوكيمياي ية : يتضمن تشخيص البكتريا على اساس قابليتها على انتاج الانزيمات وفعاليتها الكيموحيوية. ٣- التحليل الاحصاي ي: تم تحليل نتاي ج العزل والتشخيص احصاي يا باستعمال اختبار مربع كاي ) Chi.(Daniel,1978) (square النتاي ج : Results يبين الشكل (١) النسب المي وية لاجناس الجراثيم المعزولة من اصابات الفم فقد تبين ان جراثيم المكورات السبحية spp. Streptococcus تمثل اعلى نسبة معنوية من نسب العزل ٣٣,٣% (0.001P) تليها جراثيم المكورات العنقودية spp. Staphylococcus بنسبة ٢١,٣% (0.005 P) اما اقل نسبة معنوية من نسب العزل فكانت ١,٤% و ١,٥ % لجنس. spp Bacillus والجرثومة Actinobacillus actinomycetemecmitansعلى التتالي (0.005P) في حين سجات باقي العزلات نسب متفاوتة كما في الشكل ادناه. شكل رقم (١): النسب المو ية لاجناس الجراثيم المعزولة من اصابات الفم ١٣٠٥
ويوضح الشكل (٢) النسب المي وية لانواع المكورات العنقودية المعزولة من اصابات الفم فقد سجلت جرثومة.S و جرثومة.S aureus بينما سجلت جرثومة (0.005P) اعلى نسبة ٥٨,٥%.S epidermidis % ٢٩,٢intermedius و ١٢,٢ % على التتالي. شكل رقم (٢): النسب المو ية لانواع المكورات العنقودية المعزولة من اصابات الفم وسجلت الجرثومة السبحية.S mutans اعلى نسبة معنوية ٥٤,٧% (0.005P) من بين مجموعة الجراثيم السبحية (الشكل ٣). شكل رقم (٣): النسب المو ية لانواع المكورات السبحية المعزولة من اصابات الفم ١٣٠٦
ويبين الشكل (٤) ان الجرثومة Actinomyces viscosus سجلت اعلى نسبة من نسب العزل ٦٦,٦% تليها الجرثومة Actinomyces odontolyticus بنسبة %٢٠ وجرثومة %١٣,٣ Actinomyces naeslundii من مجموع عزل الجراثيم الخيطية. شكل رقم (٤): النسب المو ية لانواع الجراثيم الخيطية المعزولة من اصابات الفم ويتضح من الشكل (٥) ان الجرثومة Enterobacter agglumerans وجرثومة.E coli متساويتان بنسبة العزل ٣٣,٣% اما بالنسبة لجرثومة المتقلبات Proteus mirrabilis فسجلت ١٦,٥% هي مساوية لنسبة عزل جرثومة الزاي فة الزنجارية.Pseudomonas aeroginosa شكل رقم (٥): النسب المو ية لانواع الجراثيم السالبة لصبغة غرام المعزولة من اصابات الفم ١٣٠٧
ومن النتاي ج المبينة في الشكل (٦) يتضح ان جرثومة عصيات الحليبacidophilus Lactobacillus سجلت اعلى نسبة من نسب العزل ٧٢% بينما سجلت جرثومة عصيات الحليب L.casei اقل نسبة من نسب العزل ٢٨%. شكل رقم (٦): النسب المو ية لانواع جراثيم عصيات الحليب المعزولة من اصابات الفم المناقشة: Discussion بشكل عام جاءت نتاي ج هذه الدراسة متفقة والدراسات السابقة مثل,(1964 al., (Gibbons et (1967 (Carlsson, (Socransky, (1970 و (1999 (Saini, حول سيادة المكورات السبحية في محيط الفم. وقد يعود سبب الختلاف في نسب العزل الى وجود التسوس او عدم وجوده فضلا عن عدد الاسنان المسوسة فقد لاحظ (١٩٩٢) Al-Mizrakchi ان اعداد جراثيم عصيات الحليب له علاقة بعدد الاسنان المسوسة. وقد اظهرت النتاي ج التي حصلت عليها Antilla وجماعتها (١٩٩٩) ان نسب تفشي جراثيم عصيات الحليب تختلف ما بين الذكور (٣١%) والناث (٢٢%). ووضح (١٩٥٤) Krass ان نسب عزل الجراثيم المسببة لامراض الفم تختلف تبعا لمنطقة العزل ونوع الاصابة فضلا عن وجود التسوس او عدم وجوده فذكر ان اعداد الجراثيم عصيات الحليب باللعاب يختلف بين الاشخاص المصابين بالتسوس والاشخاص الاصحاء وكذا الحال بانسبة لجراثيم المكورات السبحية والمبيضة spp. Candida فهي موجودة بنسبة اعلى في الاشخاص المصابين منه في الاصحاء. وقد اكدت نتاي جه على وجود اختلاف في نسب العزل تبعا لنوعية النموذج المفحوص. واشارت النتاي ج الدراسة التي قام بها Howell وجماعته (١٩٦٥) الى ان جراثيم المكورات السبحية Streptococci هي الساي دة في الصفيحة السنية المتكونة في يومين وقد انعكست النسبة بعد مرور ثلاثة اشهر اذ اصبحت انواع الجراثيم الخيطية هي الساي دة. ١٣٠٨
. ووجد Sulaiman كما (١٩٩٩)Al-Aswad ان نسب عزل الجراثيم ان الاختلاف في نسب العزل يتغير تبعا لتغير الاصابة.S mutans و. spp Candida و. spp Lactobacillus تزداد بازدياد (٢٠٠٠) اعداد الاسنان المسوسة. وقد تتاثر نسبة عزل الجراثيم بطبيعة المواد الغذاي ية التي يتناولها الفرد كما و يو دي تناول المواد الحاوية على نسبة عالية من الكربوهيدرات الى تزايد نسب الاصابة بتسوس الاسنان والاصابات الاخرى وهذا بدوره يو دي الى تغير نسب العزل ويعتقد ان لنوعية الوسط الزرعي المستعمل و طريقة العزل وعوامل اخرى غير معروفة تاثيرا كبيرا في اختلاف نسب العزل وكذلك ان الاختلاف في مستوى الوعي الصحي والعناية المستمرة بتنظيف الاسنان وثقافة المجتمع تاثيرا كبيرا في تنوع بكتريا الفم والاسنان. المصادر: References Al-Mizrakchi, A.S. (1992). The occurrence of Lactobacillus spp. in the mouth of children and its response to chlorohexidine. M.Sc. thesisiin prevention dentistry; College of dentistry. University of Baghdad. Antilla, S.S.; Knuttila, M.L. and Sakki, T.K. (1999). Depressive symptoms favor abundant growth of salivary Lactobacillus. Psychosom. Med. 61(4): 508-12. Biology of oral mucosal lesion in a sample of complete dentures wearers. M. Sc. Thesis in oral medicine; College of dentistry. University of Baghdad. Carlson, J.(1967). Presence of various type of non hemolytic Streptococci in dental plaque and in other sites of oral cavity in man. Odontol.Rev.18:55-62. Collee, J.G.; Fraser, A.G.; Marmion, B.P. & Simmons, A. (1996). Mackie & MeCartney practical Medical Microbiology. 14th ed., Churchill Living stone, U.S.A. Daniel, W.W. (1978). Biostatistics a foundation for analysis in health science 2 nd ed., Johan Wily and Sons Inc, Canada. Davis, B.D.; Dulbecco, R.; Eisen, H.N. & Ginsbery, H.S. (1990). Microbiology. 4th ed., J.B. Lippincott Co. London. Epstein, I.B.; McBride, R.C. and Stevenson-moor, H.S. (1991). The efficiency of chlorohexidine gelnin reduction of Streptococcus mutans and Lactobacillus spp. in patient treated with radiation therapy. Oral.surg.71(2):172-178. Gibbons, R. j.; Socransky, S.S.; DeAraujo, W.C. and Van Houte, J. (1964). Studies of the predominant cultivable microbiota of dental plaque J. Arch. Oral Biol.9:365-370. Hix, J.O.; and O'leary, T.J. (1976). The relationship between cemental caries, Oral hygiene status and fermentable carbohydrate intake. J.Perriodontal.47:398-404. Holt, R.; Robert,G. and Scully, C. (2000). Dental damage sequelae and prevention. B.M.J.6(Issue 7251):1717-20. Houte, J.V.(1994). Role of microorganism in caries etiology. J. Dent. Res.73:672-681. Howell,A.; Rizzo, A. and Paul, F. (1965). Cultivable bacteria in developing and mature human dental calculus. Arch. Oral Biol.10:307-13. Krass, B.O. (1954). The relationship between Lactobacilli, Candida and Streptococci and dental caries.odontol.rev.5:241-61. MacFaddin, J.F. (2000). Biochemical test for identification of medical bacteria 3rd ed., The Williams & Wilkins Co., London. Quirynen, M.; Gizani, S.; Mongardini, C.; Delclerck, D.;Vinckier.F. and Van Steenberghe, D. (1999). The effect of periodontal therapy on the number of cariogenic bacteria in different inter oral niches. J.Clin. Periodontol.26:322-327. ١٣٠٩
Sato, M.; O, M.; Tsuchiya, H.; Akagiri, M.; Takagi, N.and Linuma, M. (1997) Growth inhibition of oral bacteria related to denature stomatitis by anti-candidal chalcones. Aus.Dent.J.72(5):343-6. Sidiki, M.M. (1993). Actiomyces isolated from some Iraqi young adults and there relation to dental caries. M. Sc. Thesis in preventive dentistry, Baghdad University. Socansky, S.S. (1970). Relationship of bacteria to the etiology of periodontal disease. J. Dent. Res. 49(supple 2):203-212. Sulaiman, A.W. (2000). Quantitative measurement of urea content in saliva, acquired pellicle and dental plaque in relation to dental caries susceptibility in human adults. M. Sc. Thesis in preventive dentistry. College of dentistry. University of Baghdad. Thornton, M. and Terry, J. (1994). Investigation of the antimicrobial activety of mouth wash. J. Bio. Edu. 28(Issue3):181-5. Topping, J.W.; Popkes, D.J. and Disante D.A. (1974). Salivary Pseudomonas aeroginosa. Oral. Surg. 38:42-53. Twentman, S. and Grindefjorrd, M. (1999). Mutans Streptococci suppression by Chlorohexidine gel in toddlers. Am.J.Dent.12(2):89-91. Watts, T.L. (1998). Periodontitis for medical practitioners. B.M.J.316(Issue7136): 993-97. ١٣١٠