مجلة ابن الهیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد 24 (1) 2011 تا ثیر الزیت الطیار لقشور ثمار نبات النارنج ثامر عبد الشھید محسن في نمو قسم علوم الحیاة كلیة التربیة- ابن الھیثم جامعة بغداد استلم البحث في 19 كانون الاول 2010 قبل البحث في 8 شباط 2011 بعض الفطریات الصفر L. Citrus aurantium الخلاصة أجریت دراسة مختبریة لمعرفة تا ثیر الزیت الطیار لقشور ثمار نبات النارنج الصفر.C aurantium تجاه النمو السطحي للفطریات Aspergillus flavus Penicillium expansum و Fusarium oxysporum أظھ رت نت اي ج الفعالیة التثبیطیة للزیت الطیار تا ثیرا معنویا متفاوتا في الفطریات المشمولة بالدراسة إذ كان الزیت الطی ار أكث ر ت ا ثیرأ في الفطر.P expansum تلاه الفط ر.A flavus في ح ین ك ان الفط ر.F oxysporum أقل حساس یة تجاه الزی ت الطی ار. بصورة عامة اظھر الزیت الطیار تا ثیرا تثبیطیا طردیا بزیادة التراكیز وص ولا ال ى التركی ز % (حج م/حج م) ال ذي اظھ ر تثبیطا تاما للنمو لجمیع الفطریات المدروسة. الكلمات المفتاحیة: Citrus aurantium الزیت الطیار الفعالیة المضادة للفطریات. المقدمة یع ود الفط ر.P expansum والفط ر.A flavus إل ى عاي ل ة Eurotiaceae ورتب ةEurotiales, وش عبة الفطری ات الكیس یة [1] Ascomycota. ویس بب الفط ر.A flavus س میة الحب وب والا ع لاف أذ ین تج س موم الا فلاتوكس ین( Aflatoxins ) أم ا الفط ر.P expansum فیس بب م رض العفن البن ي ف ي التف اح [2] إم ا الفط ر.F oxysporumفیعود الى عاي ل ة Tuberculriceae ورتب ة Moniliales الذي یس بب مرض الذبول ف ي بعض النبات ات الاقتصادیة مثل الطماطا والقطن وغیرھا وھو متخصص بالنسبة الى نبات العاي ل [1]. یعود نبات.C aurantium إلى عاي لة الحمض یات Rutaceae و رت بة Geraniales التابع ة لصف ذوات الفلقتین [3] Dicoty ledons یوصف ھذا النب ات با ن ھ ش جرة داي می ة الخضرة أوراقھ ا مركب ة تح وي عل ى تخصر واض ح بین النصل وعنق الورقة والا زھار ثناي یة الجنس والثمرة برتقالیة اللون وقشورھا تحوي على كمی ة كبی رة من الزی وت الطیارة والثابتة [4]. تس مى الزی وت الطی ارة oils) (Volatile ب الزیوت الا یثری ة أو الزی وت الا ساس یة oils) (Essential وتعود التسمیة لكون الزیوت الطیارة تمثل العطور( Essences ) أو المواد العطریة (Odoriferous) الموجودة في النب ات تتوافر الزیوت الطیارة في أجزاء متعددة من النبات مثل الاوراق و الا زھ ار والقلف والثم ار ومعظمھا غیر قابل ة للا متزاج مع الماء وھي عدیمة اللون عندما تكون طازجة وبمرور الوقت تتحول إلى لون قاتم بسبب الا كسدة وترس ب مواد راتنجی ة منھ ا لذلك وجب حفظھا في الظلام والبرودة وبما إن لھا خواص ا معقم ة ل ذا فا نھ ا تس تعمل ض دالبكتیریا والفطری ات [6 ]. تمثل الزیوت الطیارة نواتجا أیضیة ثانویة تحتوي على وحدات من Isoprene الت ي تتكون من خم س ذرات كاربون وثم ان ذرات من الھیدروجین CH8 واذا تحتوي على وح دتین منIsoprene تس مى التربین ات الا ولی ة M onoterpenes واذا تحتوي على ثلاث وحدات م ن Isop rene فتس مى بالتربین ات المسلس لة [7] Sesquiterpenes تح وي الزی وت الطیارة المستخلصة من قشور ثمار نب ات.C aurantium با س تخدام جھ از التقطی ر بالبخ ار steam distillation عل ى المرك ب الفعال -d limonene بنسبة %90 وھو یشبھ زیت البرتقال إلا أن راي حتھ أفضل وطعمھ مر ویحتوي على مركب ات عدی دة أخرى طعمھا مر[ 8 6 ] تش یر دراس ة [9] إلى ت ا ثیر الزی وت الطیارة لمجموع ة من الحمض یات من ض منھا نب ات.C aurantium في فط ر Penicillium digitatum وفط ر Penicillium italicum اذ أدى إل ى تثبیط ع ا ل تج اه نم و الفطرین الممرضین للنبات اذا یعزى سبب التثبیط إلى وجود علاقة بین التربین ات الا حادی ة مثل Limonene والتربین ات المسلسلة وبین الفطری ات الم ذكورة عند إص ابتھا للنب ات اذا إن لھذه التربین ات ق درة عالی ة على تثب یط الفطری ات. أظھ ر الزیت الطیار لقشور ثمار نبات.C aurantium الخض راء فعالی ة تثبیطی ة تجاه بعض أنواع البكتیری ا والفطری ات ومنھ ا فطرflavus.A حیث خفض الزیت الطیار نمو الفطر.A flavus ت دریجیا بزیادة تركی ز الزی ت الطی ار [10]. كم ا درس [11] تا ثیر التربینات الا حادیة الصناعیة على نم و الفط رflavus.A فلاحظ إن لھ ا ت ا ثیر تثبیطي ع ال في الفط ر.أش ارت دراس ة قام ا بھ ا [12] إلى ت ا ثیر الزی وت الطی ارة لمجموع ة من النبات ات بینھ ا نب ات.C aurantium في الفط رین.F oxysporum و Alternaria porri حیث لاحظا تا ثیرا تثبیطیا عل ى نمو الفط رین موض وع البح ث. وفي دراس ة [13] أوضح فیھا إن للزیت الطیار تا ثیرا على مجموعة من الفطریات وبضمنھا فطر.F oxysporum اذا أزداد تا ثیر تثبیط نمو
الفطر بزیادة تركیز الزیت الطیار وفي دراسة موسعة شملت تا ثیر الزی ت الطی ار تج اه مجموع ة من الفطری ات منھ ا.P.A flavus expansum وoxysporum.F كان للزیت الطیار لنبات النارنج تا ثیر تثبیطي لھذه الفطریات [14]. المواد وطراي ق العمل - جمع العینات النباتیة جمعت ثمار نبات.C aurantium الصفر من السوق المحلیة ف ي بغداد في ش ھر آذار ونظف ت الثم ار اخ ذت القش ور وقطعت واستعملت مباشرة من دون تجفیفھا [1]. -العزلات الفطریة تم الحص ول عل ى فط رflavus Aspergillus وoxysporum Fusarium من قسم علوم الحیاة في كلی ة العلوم/ جامعة بغداد أما الفطر Penicillium expansum فقد تم الحصول علی ھ من مختب ر الفطری ات للدراس ات العلی ا في قسم علوم الحیاة/ كلیة التربیة-إبن الھیثم/ جامعة بغداد. - تحضیر الزیت الطیار إتبعت طریقة [8] لا ستخلاص الزیت الطیار م ن قش ور ثم ار نب ات.C aurantium الصفر اذ تم وزن () غ رام من القشور وأضیف إلیھا لتر واحد من الماء المقطر ووضعت في جھ از التقطی ر بالبخ ار بدرج ة ح رارة (60) م مدة (2.- 3) ساعة. جمع الزیت المستخلص ووضع في قناني معتمة وحفظ في الثلاجة لحین استعمالھ خلال ایام. -تحضیر محلول أبواغ الفطریات إتبع ت طریق ة [16] اذا زرع ت فطری ات.F oxysporum.a flavus وexpansum.P على وس ط P.D.A. وبعد (6-) أیام أضیف مل من الم اء المقط ر المعقم إلى الطبق وت م فصل الا بواغ عن الھایف ات بواس طة ناق ل س حب محلول الا بواغ بواساطة ماصة ووضع إلى قنینة معقمة وحسب عدد الابواغ باستعمال ش ریحة الع د Haemocytometer واستعمل التخفیف (10³) بوغ/مل. -اختبار تا ثیر الزیت الطیار لقشور ثمار نبات.C aurantium الصفر في معدل نمو الفطریات بعد إس تخلاص الزی ت الطی ار وحس ب طریق ة [16] حض رت سلس لة م ن التراكی ز وكمای اتي ( 2. 1.2 0.6 ( (v/v)% وبثلاثة مكررات و أضیفت مادة Tween 80 بنسبة (%0.0) لعمل مستحلب یمكن إذابت ھ في الوس ط و م زج عالق الا بواغ بتخفیف (10 ( 3 بوغ/ مل مع كل تركیز من الزیت الطیار الم ذكورة في أعلاه و معامل السیطرة ثم حض نت بدرجة حرارة ) 28 ( م مدة (24) ساعة أخذ (0.) م ل من ع الق الا بواغ المعامل بالزی ت الطی ار ومعامل ة السیطرة بوساطة ماصة معقمة ووضعت في مركز الطبق الحاوي على وسط P.D.A. حضنت الا طباق بدرجة حرارة (28) م حسب قطر المستعمرة كل یومین بعد (3) أیام من الحضانة ولمدة (9) أیام وحسبت نسبة التثبیط كما في المعادلة الاتیة: % التثبیط = معدل القطر في عینة المقارنة معدل القطر في عینة المعاملة معدل القطر في عینة المقارنة - التحلیل الا حصاي ي استعملت طریقة [17] ANOVA للتحلیل الا حصاي ي وعند مستویات إحتمالیة (0.001 0.01 0.0) وذلك لغرض تقویم الا ختلافات في نتاي ج المعاملات من حیث كونھا معنویة أوغیر معنویة لغرض المقارنة بین تا ثیر الزیت الطی ار في أجن اس مختلفة من الفطریات. النتاي ج والمناقشة یلاحظ في الجدول (1) المتضمن تا ثیر تراكیز مختلفة من الزیت الطیار لقش ور ثم ار نب ات.C aurantium في النمو السطحي للفطرexpansum.P وجود تباینا بین التركیز والنمو الفط ري إذ أدت الزیادة في التركی ز إلى إنخف اض وبثلاث ة مك ررات ف ي أقط ار المس تعمرات وط وال م دة الحض انة عن دالتراكیز (0.6 (v/v)%(2. 1.2 أم ا التركی ز الا عل ى (v/v)%() فقد أظھر فعالیة تثبیطیة بلغت % جدول (1) وشكل (1) اذا لم یحصل أي نمو طوال مدة الحض انة وھذه النتیج ة تتواف ق م ع م اذكره [14 9] اذایع زى س بب التثب یط إل ى وجود التربین ات الا حادی ة مثل Limonene اذ إن لھ ذه التربینات قدرة عالیة على تثبیط نمو الفطر وتتباین درجة تاثیر ھذه التربینات الاحادیة با ختلاف انواع ج نس Penicillium.A flavus أما في جدول (2) الخاص بدراسة تا ثیر التراكیز المختلفة من الزیت الطیار في النمو السطحي للفط ر [9] sp. فقد أظھر تركیز( v/v)%( ) فعالیة تثبیطیة كاملة وكما موضح في الشكل (2) أما التراكیز الا دنى من ذلك (0.6 1.2 (v/v)%(2. فقد أظھرت إنخفاضا ملحوظا في أقطار المستعمرات وبزیادة التركیز وھذا یتوافق م ا أش ار إلی ھ [11 10] إن التربینات الا حادیة كان لھا تا ثیر تثبیطي عال في نمو الفطرflavus..A أظھر الجدول (3) وجود علاقة عكسیة بین أقطار المس تعمرات للفط ر.F oxysporum وتراكی ز الزی ت الطی ار اذا كلما ازداد تركیز الزیت الطی ار قل ت اقطار المس تعمرات وص ولا الى التركی ز ()% (v/v) ش كل (3) اذ انع دم فیھ ا نمو المستعمرات وھذه النتیجة تتفق مع [13 12].
وخلاصة لنتاي ج البحث ظھر ان جمیع الفطریات قد تا ثرت بالزیت الطیار وھذا یتف ق مع [14] والس بب في ذلك یعود إلى أن التربینات تعرقل تكوین الغشاء الخل وي للخلی ة الفطری ة لانھ ا محب ة لل دھون وت ذوب ف ي الا غش یة الخلوی ة (7) أو أن التربینات تغیر من نفاذیة الغشاء البلازمي للخلیة الفطریة وذلك ب اختزال محتوى الا ركسترول (Ergostrol) الموجود في الغشاء[ 18 ] وقد تبین من التحلیل الا حصاي ي وجود ف روق معنوی ة عالی ة وتح ت مس توى إحتمالی ة (0.001 0.01 0.0) وعند جمیع التراكیز ولجمیع الفطریات المدروسة. المصادر -1 علي بتول زینل وحبیب خالد عبد الرزاق ومحسن توفیق محمد( 2006 ). علم الفطریات. مطبعة جامعة بغداد بغداد: 323. 2 -ألشكري مھدي مجید( 1991 ). أساسیات الفطریات وأمراضھا النباتیة. مطبعة دار الحكمة للطباعة والنشر جامعة بغداد: 431. 3-Bhattacharyya, B. and Johri, B.M. (1998). Flowering plant taxonomy and phylogeny. Navosa publishing house, New Delhi: 73 http://liberherbarum.com4-gotfredsen, E.(2003). Citrus aurantium -Tyler, V.E.; Brady, L. B. and Robberes, J. E.(1988). Pharmacognosy, 9 th.lea & Febiger, Philadelphia: 19 للطباعة الموصل: 400 7-Cowan, M. M. (1999). Plant (4): 64-82. 6 -الشماع علي عبد الحسین (1989). العقاقیر وكیمیاء النباتات الطبیة. مطبعة دار الكتب product as antimicrobial agent. Clin. Microbial. Rev., 12 8-Carvalho-Freitas,M.I.R. and Costa,M. (2002). Anxiolytic and sedative effects of extracts and essential oil from Citrus aurantium L. Biol. Pharm Bull., 2(12): 1629-1633 9-Caccioni, D.R.L.; Guizzardi, M.; Biondi, D.M.; Renda, A. and Ruberto, G. (1998). Relationship between volatile components of citrus fruit essential oils and antimicrobial action on Penicillium digitatum and Penicillium italicum. Int. J. Food M icrobial., 43(1-2): 73-79. 10- القیس ي إس تبرق ع ز ال دین محم ود( 2004 ). ت ا ثیر مستخلص ات نب ات خن اق ال دجاج Zygophylum fabago. Lوالزیت الطیار لقشور ثمار نبات النارنج.L Citrus aurantium الخضراء في نمو وفعالیة بع ض الا حی اء المجھری ة. رسالة ماجستیر كلیة التربیة/ إبن الھیثم جامعة بغداد: 97 11-Lopez, M.A.; AL-Zamora, S.M. and Palou, E.(2002). Aspergillus flavus dose-response curves to selected natural and synthetic antimicrobial Int.J.Food M icrobial.,73(2-3): 213-218. 12-Pawar, V.C. and Thaker, V.C.(2007).Evolution of the anti-fusarium oxysporum f.sp cicer and anti-alternaria porri effects of some essential oils. World J. M icrobiol Biotechnol, 23:1099-1106. 13-Chutia, M.; Deka Bhuyan, P.; Pathak, M.G.; Sarma, T.C. and Boruah, P. (2009).Antifungal activity and chemical composition of Citrus reticulate Blanco essential oil against phytopathogens 777-780. from North East India.LWT-Food Science and Technology, 42: 14-Zabka, M. and Pavela, R.(2009). Antifungal effect of Pimenta dioica essential oil Against dangerous pathogenic and toxinogenic fungi. Industr. Crops And products,30(2):20-23. 1-Vekiari, S.A.; Protopapadakis,E.E.; Papadopoulou, P.; Papanicolaou, D.; Panon, C. and Vamovakias, M. (2002). Composition and Seasonal Variation of the essential oil from leaves and peel of acertain lemon Variety. J.Agaric. Food Cham., 0(1):147-13. 16-Chao, S. C.; Young, D.G. and Oberg, C.J. (2000). Screening for inhibitory activity of essential oils on selected bacteria, fungi and viruses. J. Essent. Oil Res., 12: 639-649. 17-ZAR, J. H. (1999). Biostatistical 4 th. Prentice hall upper saddle river, analysis. New jersey: 663. 18-Reichling,J.; Schnitzler,P.; Suschke,U.and Saller, R. (2009). Essential Oils of Aromatic plants with Antibacterial, Antifungal, Antiviral, and Cytotoxic Properties-an Overview. Forsch Komplementmed, 16: 79-90.
جدول (1) نسبة التثبیط % لتراكیز مختلفة من الزیت الطیار لقشور ثمار نبات النارنج الصفر.C aurantium النمو السطحي للفطر..P expansum في 9 7 3 عدد الایام 18 30 46 17.07 24.39 39.02 10.9 19.3 3.48 9.09 12.22 31.81 التركیز (v/v)% 0.6 1.2 2. جدول (2) نسبة التثبیط % لتراكیز مختلفة من الزیت الطیار لقشور ثمار نبات النارنج الصفر.C aurantium في النمو السطحي للفطر..A flavus 9 7 3 عدد الایام 19.6 27.27 36.36 14.8 2 3.41 12.38 23.07 33.3 12. 20 33.33 التركیز (v/v)% 0.6 1.2 2. جدول (3) نسبة التثبیط % لتراكیز مختلفة من الزیت الطیار لقشور ثمار نبات النارنج الصفر.C aurantium في النمو السطحي للفطر.F oxysporum 9 7 3 عدد الایام 23.3 30.86 46.33 19.23 26.92 39.3 13.1 24.39 31.71 12 24 30 التركیز (v/v)% 0.6 1.2 2. شكل( 1 ) تا ثیر التراكیز مختلفة من الزیت الطیار لقشور ثمار نبات النارنج الصفرaurantium.C expansum مقارنة بمعاملةالسیطرة (بعد خمسة ایام حضانة). في النمو السطحي للفطر.P
شكل (2) تا ثیر التراكیز مختلفة من الزیت الطیار لقشور ثمار نبات النارنجالصفرaurantium.C في النمو السطحي لفطر.A flavus مقارنة بمعاملة السیطرة ) بعد مرور خمسة ایام). شكل (3) تاثیر التراكیز مختلفة من الزیت الطیار لقشور ثمار نبات النارنجالصفر.C aurantium في النمو السطحي للفطر.F oxysporum مقارنة بمعاملةالسیطرة ) بعد خمسة ایام حضانة).
IBN AL- HAITHAM J. FO R PURE & APPL. SC I. VO L.24 (1) 2011 The Effect of essential oil extracted from yellow peel of Citrus aurantium L. on growth of some fungi Th. A. Muhsen Department of Biology, College of Education-Ibn Al- Haitham, University of Baghdad Received in,19,december,2011 Accepted in, 8, Feb,2011 Abstract The study was conducted to evaluate the effect of essential oil extracted from yellow peels of Citrus aurantium on the radial growth of all fungi. Penicillium expansum, Aspergilus flavus and Fusarium oxysporum. The results showed significant gradual reduction of the surface growth of fungi, P. expansum and A. flavus was more affected by the essential oil, while F. oxysporum showed less sensitivity towards the essential oil. The reaction of growth was inconcommitant with increasing concentrationsof oil, reaching concentration of ()% which showed complete inhibition. Key word : Citrus aurantium, Essential oils, Antifungal,