حتùسني نùسبة اإنبات بذور اأربعة اأنواع من أاجرد الكماأة Helianthemum باSستخدام بع ض معامالت البذور Enhancement of Seed Germination for Four Species of Helianthemum Using some Seed Treatments )1( بùسام بياعة )2( حممد موفق يربق )3( فهد البيùسكي )4( حممد فواز العظمة )5( حجازي مندو H. M. H. Mando B. Bayaa M M. Yabrak F. Albiski M. F. Alazmeh )1( الهيئة العامة للبحوث العلمية الزراعية دمûشق Sسورية: hijaz.mando@gmail.com )2( قùسم وقاية النبات كلية الزراعة جامعة حلب Sسورية. )3( مركز البحوث العلمية الزراعية حلب الهيئة العامة للبحوث العلمية الزراعية Sسورية. )4( الهيئة العامة للتقانة احليوية دمûشق Sسورية. )5( قùسم وقاية النبات كلية الزراعة جامعة دمûشق Sسورية. امللخüص اأجريت الدراSسة على بذور اأربعة أانواع من جنùس الأجرد Helianthemum هي.H salicifolium.h ledifolium.h almeriense.h violaceum يف خمابر الهيئة العامة للتقانة احليوية )دمûشق Sسورية( يف املوSسم 2014/2013 بهدف حتùسني نùسب إانباتها وكانت املعامالت املطبقة كالتايل: - 1 اخلدTش - 2 املعاملة بحم ض الكربيت املركز % 95 3 - النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24-4 اجلمع بني اخلدTش والنقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24-5 اجلمع بني املعاملة بحم ض الكربيت املركز والنقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24-6 Tشاهد غري معامل. ح ùس ب ت قيم الإنبات التالية: نùسبة الإنبات الكلية واملدة الالزمة بالأيام لبلوغ الإنبات الكلي ومعدل الإنبات اليومي للبذور. اأظهرت النتائج تفوق معاملة اخلدTش مع النقع باملاء املقطر املعقم على باقي املعامالت بفروق معنوية باأعلى نùسبة اإنبات كلية )95.54 %( واأقüصر مدة لبلوغ الإنبات الكلي )5.88 يوم( واأعلى معدل اإنبات يومي للبذور )17.45 % يف اليوم(. يف حني كانت معاملة النقع باملاء هي الأSسواأ بني املعامالت باأدنى نùسبة اإنبات كلية )24.55 %( و أاطول مدة لبلوغ الإنبات الكلي )19.62 يوم( واأدنى معدل اإنبات يومي للبذور )1.19 % يف اليوم(. بني ارتفاع نùسب الإنبات بûشكل كبري بعد خدTش البذور ومتزيق اأغلفتها عند جميع الأنواع املدروSسة اأن Sسبب Sسكون البذور هو Uصالدة أاغلفتها وعدم نفوذيتها للماء حيث متنع هذه الأغلفة البذور فيزيائيا من امتüصاUص املاء الالزم لإنباتها مùسببة بذلك انخفاVضا يف نùسب إانباتها. الكلمات املفتاحية: أاجرد الكماأة حتùسني الإنبات معامالت البذور salicifolium Helianthemum.H almeriense.h ledifolium.h Abstract H. violaceum The enhancement of seeds germination for four Helianthemum species (H.salicifolium, H.ledifolium, H.almeriense and H.violaceum) was studied in the National Commission for Biothecnology laboratories (Syria) in 2013/2014 season. The six seed treatments were: 1- mechanical scarification, 2- chemical scarification by using concentrated sulfuric acid, 3- soaking in distilled sterilized water for 24h, 4- mechanical scarification + soaking in distilled sterilized water for 24h, 5- chemical scarification by using concentrated sulfuric acid + soaking in distilled sterilized water for 24h, 6- untreated control. The germination values recorded were: total germination percentage, germination period in days to reach the 2017 The Arab Center for the Studies of Arid Zones and Dry Lands, All rights reserved. ISSN:2305-5243 ; AIF(NSP)-316 48
total germination percentage and the germination rate. Results showed that the treatment of mechanical scarification + soaking in water was significantly superior with the highest germination percentage (95.54%), shortest germination period (5.88 day) and the highest germination rate (17.45%/day). While the soaking in water treatment was the worst treatment with the lowest germination percentage (24.55%), longest germination period (19.62 day) and the lowest germination rate (1.19 %/day). The increase of germination ratio after seeds scarification for all Helianthemum studied species indicates that the reason of seed dormancy is due to its impermeable coat, which prevents seeds physically.from absorbing water required for germination, causing poor germination of untreated seeds Keywords: Germination enhancement, Seed treatment, Helianthemum, H. almeriense, H. ledifolium, H. salicifolium, H. violaceum. املقدمة ينتمي نبات الأجرد للجنùس Helianthemum والفüصيلة الالذنية Cistaceae ورتبة اخلبازيات Malvales حيث ت ضم هذه الفüصيلة ثمانية اأجناSس و 165 نوعا وي عد جنùسا الأجرد Helianthemum والالذن )القري ضة( Cistus من اأهم اأجناSس هذه الفüصيلة. ي ضم جنùس الأجرد 44 Helianthemum نوعا تنتûشر يف نüصف الكرة الûشمايل و أامريكا اجلنوبية ومنطقة حوVض البحر املتوSسط إاذ يوجد نüصف اأنواع هذا اجلنùس تقريبا بûشكل رئيùس على Tشواطئ البحر املتوSسط Polunin( و Huxley 1972 López 1982 Brickell 1989(. تتمتع اأنواع جنùس الأجرد Helianthemum ب أاهمية اقتüصادية وUصناعية وطبية ورعوية كبرية ولها دور مهم يف مكافحة التüصح ر ملا تتùسم به من حتم ل للجفاف وقدرة على العيûش يف املناطق اجلافة وTشبه اجلافة. والأهم من ذلك يعد كثري منها عوائل اأSساSسية للكماأة الüصحراوية Desert(.)truffles تعاين بذور معظم أانواع اجلنùس Helianthemum من انخفاVض وUصعوبة يف الإنبات عالوة عن إانباتها غري املنتظم Polunin( و Huxley 1972 López 1982 Brickell 1989 Honrubia وزمالوؤه 1992 Pérez-García و González-Benito 2006( وتعاين البادرات امل ن ب تة من املوت الطبيعي خالل اأول Tشهرين بعد الإنبات وذلك بنùسب مرتفعة تüصل اأحيانا اإىل اأكرث من %. 70 لذلك اأدرجت هذه الأنواع Vضمن جمموعة الأنواع النباتية Uصعبة الإكثار إاذ تطبق على البذور عدة معامالت لتحùسني نùسب اإنباتها Morte( وزمالوؤها 2008 و 2009(..H منها: الأجرد املüصري العديد من اأنواع الأجرد يف Sسورية انتûشار الùسابقة إاىل العديد من الدراSسات بالإVضافة ج ل ت الفلورات الùسورية Sس H. kotschyanum Boiss. )2008 واأجرد كوتûشيني 1987 اأكùساد 1966 Sسنكري Mouterd 1932 Post( aegyptiacum (L.) Mill H. )1987 والأجرد 1966 Sسنكري Mouterd 1932 Post( H. vesicarium Boiss. )1987 والأجرد 1966 Sسنكري Mouterd( H. chamaecistus Mill. والأجرد H. lavandulifolium Mill. والأجرد H. ellipticum (Desf.) Pers. والأجرد umbellatum (L.) Spach. H. والأجرد H. racemosum (L.) Pau. والأجرد H. stipulatum (Forssk.) C. والأجرد H. kahiricum Del. والأجرد )1932 Post(.)1966 Mouterd( nummularium (L.) Mill. تتميز بع ض اأنواع الأجرد املنتûشرة يف Sسورية باأهمية خاUصة إاذ تتùسم بقدرتها على اإنûشاء عالقة تعايûش مع فطر الكماأة الüصحراوية وتù سهم بدور العائل الرئيùس لهذا الفطر. وقد أاثبتت قدرة العديد من أانواع الأجرد على إاقامة عالقة تعايûش مع الكماأة الüصحراوية من اجلنùس Terfezia واأTشارت أابحاث كثرية اإىل جناح إاقامة عالقة التعايûش هذه حتت ظروف م ت ح ك م بها وذلك بني عديد من اأنواع الأجرد Helianthemum من جهة اأوىل أاهمها: H. salicifolium H. sessiliflorum H. lippii H. almeriense H. violaceum H. guttatum H. ledifolium H. ovatum H. hirtum T. boudieri T. claveryi T. nivea, T. leptoderma, من جهة ثانية اأهمها: Terfezia وعديد من اأنواع الكم أاة الüصحراوية H. canariense Slama وزمالوؤه 2009 Torrente وزمالوؤها 2009 Morte وزمالوؤه 2003 Kovács 2001 Gutiérrez( T. arenaria T. terfezioides وزمالوؤها 2010 Andrino وزمالوؤه 2011 Zambonelli و Bonito 2012(. ومن اأهم اأنواع الأجرد العائلة للكم أاة الüصحراوية واملùستخدمة يف زراعتها اUصطناعيا الأنواع التالية: -أجرد Mill..H: almeriense (.L) من اأكرث الأنواع انتûشارا يف املناطق Tشبه اجلافة يف اإSسبانيا وله اأهمية كبرية يف التحريج كونه يقيم عالقة تعايûش مع الفطور الأSسكية من اجلنùسني Terfezia و Honrubia( Picoa وزمالوؤه 1992(. وهو أاول نوع من اأنواع اجلنùس Helianthemum القادرة على اإنûشاء عالقة تعايûش مع الكم أاة الüصحراوية جنح الإكثار الدقيق له يف املخرب Morte( و Honrubia 1992 و 1997 (. وينحüصر انتûشاره يف جنوبي اإSسبانيا وTشمايل أافريقيا )املغرب( Zamora( وزمالوؤه 2006(. وقد اSستخدم هذا النوع يف اإقامة أاول مزرعة اUصطناعية للكماأة الüصحراوية عام 1999 على مùستوى جتريبي ثم اSستخدم مع اأنواع اأخرى يف إاقامة اأول مزرعة اUصطناعية جتارية للكماأة عام 2008 يف اإSسبانيا ) 2 ( 1 - Environments10 The Arab Journal for Arid 49
Morte( وزمال ؤوها 2009(. -األجرد البنفسجي Mill..H: violaceum (.L) من الأنواع القادرة على إاقامة عالقة تعايûش مع الكماأة الüصحراوية وينتûشر يف موئل اأوSسع من املوئل الذي ينتûشر فيه النوع الùسابق ليùس يف اإSسبانيا فحùسب بل يف جنوبي أاوروبا وTشمايل اأفريقيا Zamora( وزمالوؤه 2006( واSستخدم اأي ضا يف اإقامة اأول مزرعة اUصطناعية جتارية عام 2008 يف اإSسبانيا Morte( وزمال ؤوها 2009(. تتجلى مما Sسبق الأهمية القتüصادية لنباتات جنùس الأجرد Helianthemum يف اإمكانية زراعتها كعائل لإنتاج الكماأة الüصحراوية من اجلنùس Terfezia يف مزارع اUصطناعية بغية الإنتاج التجاري للكم أاة الüصحراوية Kagan-Zur( وزمالوؤه 2014(. اإVضافة اإىل ذلك هناك ندرة يف الأبحاث التي ن ف ذ ت حول الكثار البذري والإكثار اخل ضري الدقيق لنبات الأجرد. اإVضافة اإىل أانه ل توجد اأية اأبحاث حول حتùسني نùسبة إانبات البذور والإكثار البذري لأنواع هذا النبات يف Sسورية حتى الآن وي عد حتùسني نùسبة إانبات البذور اخلطوة الأوىل لالإنتاج الكمي لûشتوله Sسواء بذريا يف املûشتل اأو لالإكثار اخل ضري الدقيق له يف املخرب حيث تùستخدم الûشتول الناجتة إاما يف مكافحة التüصحر اأو يف إانتاج نباتات معدية بالكماأة تنقل اإىل احلقل لإنتاج الكماأة جتاريا Kagan-Zur( وزمالوؤه 2014(. وبناء عليه هدف البحث اإىل دراSسة اإمكانية حتùسني نùسبة اإنبات بذور اأربعة اأنواع من اأجرد الكماأة Helianthemum باSستخدام بع ض معامالت البذور. مواد البحث وطرائقه المادة النباتية: مت احلüصول على عينات بذور للنوعني املنتûشرين يف Sسورية: Mill..H salicifolium (.L) و. Mill.H ledifolium (.L) وللنوعني املنتûشرين يف اإSسبانيا: Mill..H almeriense (.L) و. Mill.H violaceum (.L) من قùسم بيولوجيا النبات يف كلية البيولوجيا بجامعة مورSسيا)اإSسبانيا(. ون فذ البحث يف خمابر قùسم التقانات النباتية احليوية لدى الهيئة العامة للتقانة احليوية يف دمûشق Sسورية. ولكùسر طور الùسكون وحتùسني نùسبة إانبات البذور اعت مدت املعامالت التالية: - املعاملة الأوىل: اخلدTش )Scarification( باSستخدام ورق احلف )ورق الüصنفرة( Pérez-García( و González-Benito 2006(. - املعاملة الثانية: املعاملة بحم ض الكربيت املركز % 95 López( وزمالوؤه 2006 Pérez-García و González-Benito 2006(. - املعاملة الثالثة: النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24 López( وزمالوؤه 2006(. - املعاملة الرابعة: اخلدTش + النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة. 24 - املعاملة اخلامùسة: املعاملة بحم ض الكربيت املركز + النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24 López( وزمال ؤوه 2006(. - املعاملة الùسادSسة: زراعة البذور دون أاي معاملة )الûشاهد(. - تطبيق معاملتي الخدش والخدش مع النقع بالماء المقطر المعقم لمدة 24 ساعة: من اأجل خدTش البذور ميكانيكيا اSستخدمت ورقتا حف من النوع FUJI STAR Waterproof abrasive paper 400 CC-Cw ووVضعت ورقة احلف على الطاولة ثم وVضعت البذور فوقها ووVضعت ورقة حف ثانية فوق البذور بحيث يكون وجها احلف باجتاه البذور Pérez-García( وGonzález-Benito 2006( حفت البذور بني ورقتي احلف بحركة دائرية باليد دون Vضغط ملدة دقيقتني. بعد احلف ط ه ر ت البذور Sسطحيا كما يلي: وV ض ع ت بذور كل نوع يف ظرف Tشاي فارغ واأ غ ل ق الظرف بخرزة اأو اأكرث بوSساطة خرازة ورق مكتبية وك ت ب على الظرف رمز النوع. ثم ط ب ق بروتوكول التطهري الùسطحي للبذور وفق اخلطوات الآتية: - غ م ùس ت عينات البذور يف الكحول الإيثيلي % 70 ملدة دقيقة واحدة مع التحريك املùستمر بوSساطة حمرك مغناطيùسي - ن ق ل ت البذور اإىل حملول من هيبوكلوريت الüصوديوم % 1 + 20 Tween ملدة 20 دقيقة مع التحريك املùستمر مبحرك مغناطيùسي - ن ق ل ت البذور بعدها إاىل املاء املقطر املعقم ثالث مرات متتالية ملدة 5 دقائق يف كل مرة Morte( و Honrubia 1992 López وزمالوؤه 2004(. ج ف ف قùسم من البذور على ورق نûشاف معقم وزعت يف أاطباق برتي Sسم 9 حتوي 20 مل من مùستنبت موراTشيغ Sسكوغ MS مبعدل 14 بذرة/الطبق ومبعدل 8 مكررات لكل معاملة ثم ح ض ن ت الأطباق عند الدرجة Sºس 24 ودورة اإVضاءة/ظالم Sساعة. 8/16 ن ق ل القùسم الباقي من البذور اإىل دورق يحوي 200 مل ماء مقطرا معقما حيث أاغلق الدورق باإحكام وح ض ن ملدة Sساعة 24 يف الظالم عند Sºس 20 لتحفيز الإنبات Pérez-García( و González-Benito 2006(. ويف اليوم التايل ن ق ل ت البذور اإىل ورق نûشاف معقم وت ر ك ت لتجف ثم زرعت يف أاطباق برتي Sسم 9 حتوي 20 مل من مùستنبت MS مبعدل 14 بذرة/الطبق ومبعدل 8 مكررات لكل معاملة ثم ح ض ن ت الأطباق عند Sºس 24 ودورة اإVضاءة/ظالم Sساعة 8/16 Morte( و Honrubia 1992 López وزمالوؤه 2004(. 50
- تطبيق المعاملة بحمض الكبريت المركز) 95 %( والمعاملة بحمض الكبريت المركز مع النقع بالماء المقطر المعقم لمدة 24 ساعة: وV ض ع ت عينات البذور يف اأطباق برتية معقمة ثم اأVضيف حم ض الكربيت املركز % 95 فوقها ملدة دقيقتني اأزيل بعدها وغ ùس ل ت البذور باملاء املقطر املعقم ثالث مرات متتالية ملدة 5 دقائق لكل مرة للتخلüص من احلم ض وط ب ق بروتوكول التطهري الùسطحي Sسابق الذكر نفùسه ن ق ل قùسم من البذور اإىل ورق نûشاف معقم وت ر ك ليجف وزرعت البذور يف اأطباق برتي Sسم 9 حتوي 20 مل من مùستنبت MS مبعدل 14 بذرة/ الطبق و 8 مكررات للمعاملة. ون ق ل القùسم الباقي من البذور اإىل دورق يحوي 200 مل ماء مقطر معقم حيث أاغلق الدورق باإحكام وح ض ن ملدة Sساعة 24 يف الظالم عند Sºس 20 لتحفيز الإنبات Pérez-García( و González-Benito 2006(. ويف اليوم التايل ن ق ل ت البذور اإىل ورق نûشاف معقم وت ر ك ت لتجف ثم زرعت يف اأطباق برتي Sسم 9 حتوي 20 مل من مùستنبت MS مبعدل 14 بذرة/الطبق ومبعدل 8 مكررات لكل معاملة وح ضنت الأطباق عند Sºس 24 ودورة اإVضاءة/ظالم Sساعة 8/16 Morte( و Honrubia 1992 López وزمالوؤه 2004(. - تطبيق المعاملة بالنقع بالماء المقطر المعقم لمدة 24 ساعة: ط ب ق بروتوكول التطهري الùسطحي Sسابق الذكر على قùسم اآخر من البذور ثم ن ق ل ت البذور اإىل دورق يحوي 200 مل ماء مقطرا معقما وح ض ن ت عند Sºس 20 ملدة Sساعة 24 يف الظالم لتحفيز الإنبات Pérez-García( و González-Benito 2006(. ويف اليوم التايل ن ق ل ت البذور اإىل ورق نûشاف معقم وت ر ك ت لتجف ثم زرعت يف أاطباق برتي Sسم 9 حتوي 20 مل من مùستنبت MS مبعدل 14 بذرة/الطبق ومبعدل 8 مكررات لكل معاملة وح ضنت الأطباق عند Sºس 24 ودورة اإVضاءة/ظالم Sساعة) Morte 8/16 و Honrubia 1992 López وزمالوؤه.)2004 تطبيق المعاملة الشاهد: طبق بروتوكول التطهري الùسطحي Sسابق الذكر على قùسم اآخر من البذور ثم ن ق ل ت إاىل ورق نûشاف معقم وت ر ك ت لتجف وزرعت على اأطباق برتي Sسم 9 حتوي 20 مل من مùستنبت MS مبعدل 14 بذرة/الطبق و 8 مكررات للمعاملة وح ضنت الأطباق عند Sºس 24 ودورة اإVضاءة/ظالم Sساعة 8/16 Morte( و Honrubia 1992 López وزمالوؤه 2004(. بعد ذلك مت أاخذ القراءات التالية: - نùسبة الإنبات الكلي)%(: Sس ج ل عدد البذور النابته كل يومني ملدة Tشهر وح ùسبت نùسبة الإنبات الكلي باSستخدام املعادلة التالية: )2014 AOSA/SCST 1976 ISTA( 100x نسبة اإلنبات الكلي = عدد البذور النابتة في اليوم 30 عدد البذور الكلي - املدة حتى بلوغ الإنبات الكلي: وهي املدة )مقدرة باليوم( من يوم الزراعة وحتى اليوم الذي بلغت فيه نùسبة الإنبات الكلي حدها الأقüصى ثم ثبتت ومل ترتفع بعد ذلك إاذ عد يوم الزراعة هو اليوم 0 واليوم الذي مل تنبت بعده اأي بذرة جديدة هو اليوم النهائي واملدة بينهما هي املدة حتى بلوغ الإنبات الكلي. - معدل الإنبات اليومي للبذور: وقد ح ùسبت باSستخدام املعادلة التالية: 100x معدل اإلنبات اليومي للبذور )%/يوم( = النسبة المئوية لإلنبات الكلي المدة حتى بلوغ اإلنبات الكلي وVضعت التجربة وفق التüصميم العûشوائي الكامل )CRD( وح ل ل ت النتائج باSستخدام حتليل التباين )ANOVA( حùسب اختبار فيûشر عند مùستوى معنوية % 1 حيث متت مقارنة املتوSسطات باSستخدام قيمة أاقل فرق معنوي )L.S.D( وذلك باSستخدم برنامج GenStat V12 والقيم يف جميع اجلداول هي تقديرات املتوSسط ± اخلطاأ املعياري.)S.E.( Standerd Eror - نùسبة الإنبات الكلي )%(: النتائج واملناقûشة - 1 تأثير المعاملة: تباينت نùسب الإنبات الكلي حùسب املعامالت بغ ض النظر عن النوع إاذ تفوقت معاملة اخلدTش مع النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24 على باقي املعامالت بفروق عالية املعنوية اإذ بلغ متوSسط نùسبة الإنبات الكلي لهذه املعاملة % 95.54 تلتها معاملة اخلدTش مبتوSسط بلغ % 87.50 ويتوافق هذا مع Pérez-García وGonzález-Benito )2006( على خمùسة اأنواع من اجلنùس Helianthemum هي.H appeninum و. H almeriense وcinereum.H وhirtum.H وsquamatum.H ثم املعاملة بحم ض الكربيت املركز مع النقع باملاء املقطر املعقم ملدة 24 ) 2 ( 1 - Environments10 The Arab Journal for Arid 51
Sساعة مبتوSسط بلغ % 64.51 ويتوافق هذا مع نتائج López وزمالئه )2006( على النوع Helianthemum inaguae ثم املعاملة بحم ض الكربيت املركز مبتوSسط بلغ % 60.27 وكانت املعاملة الأخرية هي معاملة النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24 مبتوSسط بلغ % 24.55 ومعاملة الûشاهد مبتوSسط % 15.40 )جدول.)1 يالحظ مما Sسبق أان معاملة اخلدTش مع النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24 ح ùس نت نùسبة إانبات البذور مقارنة مبثيلتها يف الûشاهد بنùسبة بلغت % 80.14 كما ح ùس نت معاملة اخلدTش نùسبة اإنبات البذور مقارنة مع مثيلتها يف الûشاهد بنùسبة بلغت % 72.10 يف حني ح ùس نت املعاملة بحم ض الكربيت املركز مع النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24 نùسبة إانبات البذور مقارنة مبثيلتها يف الûشاهد بنùسبة بلغت % 49.11 كما ح ùس نت املعاملة بحم ض الكربيت املركز نùسبة اإنبات البذور مقارنة مبثيلتها يف الûشاهد بنùسبة بلغت % 44.87 ومل ترفع معاملة النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24 نùسبة الإنبات اإل مبقدار قليل بلغ % 9.15 )اجلدول 1(. الجدول 1. تأثير معامالت البذور في نسبة اإلنبات الكلي. المعاملة الخدش + النقع بالماء الخدش المعاملة بحمض الكبريت المركز+ النقع بالماء المعاملة بحمض الكبريت المركز نسبة اإلنبات الكلي )%( 95.54 ± 1.1 87.50 ± 1.9 64.51 ± 2.1 60.27 ± 1.8 النقع بالماء 24.55 ± 2.4 a 15.40 ± 1.1 الشاهد 2.885 النوع - 2 تأثير النوع: تباينت الأنواع فيما بينها بنùسبة الإنبات الكلي بغ ض النظر عن املعامالت فقد تفوق النوع.H almeriense على باقي الأنواع مبتوSسط نùسبة اإنبات كلي بلغ % 69.64 تاله النوعان.H ledifolium و.H violaceum ودون فروق معنوية فيما بينهما مبتوSسطني بلغا % 56.84 و % 55.36 على التوايل واأخريا النوع.H salicifolium مبتوSسط بلغ % 50.00 )اجلدول 2 والûشكل 1(. الجدول 2. تأثير األنواع في نسبة اإلنبات الكلي. نسبة اإلنبات الكلي )%( H. almeriense 69.64 ± 4.3 a H. ledifolium 56.84 ± 3.8 b H. violaceum 55.36 ± 4.8 b H. salicifolium 50.00 ± 4.8 2.356-3 تأثير المعاملة مع النوع: عند دراSسة تداخل املعامالت مع الأنواع كانت معاملة اخلدTش+ النقع مع النوعني.H almeriense و.H violaceum ومعاملة اخلدTش النوع.H violaceum النوع الإنبات الكلي لكل منها % 99.11 تلتها معاملة اخلدTش نùسبة الأف ضل على الإطالق اإذ بلغ متوSسط.H almeriense مبتوSسط بلغ % 95.54 ثم معاملة اخلدTش + النقع النوع.H salicifolium مبتوSسط بلغ % 94.64 ثم معاملة اخلدTش + النقع النوع.H.H almeriense مع جميع الأنواع Sساعة أا املعامالت هي معاملة النقع باملاء املقطر املعقم ملدة 24 بلغ % 89.28 وكانت اأSسو مبتوSسط ledifolium و H. ledifolium و H. violaceum و H. salicifolium اإذ بلغت متوSسطات نùسبة الإنبات الكلي % 8.93 20.54 25.0 43.75 على التوايل )اجلدول 3(. 52
الشكل.1 أحد مكررات معاملة الخدش مع النقع بالماء : يمين أعلى النوع H. almeriense يسار أعلى النوع H. violaceum يمين أسفل النوع H. salicifolium يسار أسفل النوع.H. ledifolium الجدول.3 تأثير التداخل بين معامالت البذور واألنواع في نسبة اإلنبات الكلي. األنواع المعامالت H. almeriense H. violaceum H. salicifolium H. ledifolium الخدش + النقع بالماء 99.11 ± 0.9a 99.11 ± 0.9a 94.64 ± 2.2ab 89.28 ± 2.3b الخدش 99.11 ± 0.9a 95.54 ± 1.3a 75.00 ± 1.3d 80.36 ± 1.8cd المعاملة بحمض الكبريت المركز + النقع c 81.25 ± 1.3 53.57 ± 2.3 58.92 ± 2.6 e 64.28 ± 0.0 المعاملة بحمض الكبريت المركز d 55.35 ± 1.2 ef 75.00 ± 1.3 gh h 50.00 ± 1.3 efg fgh 60.71 ± 1.3 النقع بالماء 43.75 ± 2.5 20.54 ± 0.9i 8.93 ± 2.6jk 25.00 ± 1.3i الشاهد 19.64 ± 1.2i 13.39 ± 0.9i 7.14 ± 0.0k 21.43 ± 0.0i 5.770 L.S.D0.01 المتوسطات المتبوعة بأحرف مشتركة ال يوجد بينها فروق معنوية. املدة حتى بلوغ الإنبات الكلي : - 1 تأثير المعامالت : تباينت املعامالت فيما بينها باملدة حتى بلوغ أعلى ن سبة للإنبات الكلي بغ ض النظر عن الأنواع حيث تفوقت معاملة اخلد ش مع النقع باملاء املقطر املعقم على باقي املعامالت بفروق معنوية عالية ومبتو سط بلغ 5.88 يوم ا تبعتها معاملة اخلد ش مبتو سط مدة بلغ 8.19 يوم ا ثم معاملة ال شاهد مبتو سط بلغ 13.19 يوم ا ثم أتت املعاملة بحم ض الكربيت املركز مع النقع باملاء املقطر املعقم مبتو سط مدة بلغ 14.81 يوم ا ثم املعاملة بحم ض الكربيت املركز مبتو سط مدة بلغ 17.56 يوم ا و أخري ا معاملة النقع باملاء املقطر املعقم مبتو سط مدة بلغ 19.62 يوم ا وتوافقت هذه النتائج ما أ شار إليه López وزمال ؤه ( )2006 يف درا سة م شابهة على النوع ( Helianthemum inaguae اجلدول.)4 ) The Arab Journal for Arid Environments10 ( 1-2 53 املجلة العربية للبيئات اجلافة ) 2-1 ( 10
وبناء على ما Sسبق ميكن القول أان معاملة اخلدTش مع النقع باملاء املقطر املعقم قللت املدة الالزمة لبلوغ احلد الأعلى لنùسبة الإنبات مبقدار 7.31 يوما مقارنة مبعاملة الûشاهد وتلتها معاملة اخلدTش مبقدار 5.00 اأيام يف حني اأطالت املعاملة بحم ض الكربيت املركز مع النقع املدة الالزمة لبلوغ احلد الأعلى لنùسبة الإنبات مبقدار 1.62 يوما مقارنة مبعاملة الûشاهد وكذلك كانت املعاملة بحم ض الكربيت املركز ولكن مبقدار اأكرب بلغ 4.37 يوما وكذلك معاملة النقع باملاء إامنا باملقدار الأكرب بني جميع املعامالت اإذ بلغت 6.43 يوما )اجلدول 4(. الجدول 4. تأثير معامالت البذور في المدة حتى بلوغ اإلنبات الكلي. المعاملة المدة حتى بلوغ اإلنبات الكلي )يوم( الخدش + النقع بالماء الخدش الشاهد المعاملة بحمض الكبريت المركز + النقع بالماء 5.88 ± 0.27 8.19 ± 0.26 13.19 ± 0.53 14.81 ± 0.66 المعاملة بحمض الكبريت المركز 17.56 ± 0.86 a 19.62 ± 0.88 النقع بالماء 0.6865-2 تأثير النوع: تباينت الأنواع فيما بينها بغ ض النظر عن املعامالت بالنùسبة للمدة بالأيام حتى بلوغ احلد الأعلى لنùسبة لالإنبات فكان النوع النوع.H salicifolium هو الأف ضل باأقل متوSسط مدة بلغ 9.75 يوما تاله النوع.H ledifolium مبتوSسط بلغ 11.58 يوما ثم النوع.H violaceum مبتوSسط بلغ 14.96 يوما واأخريا النوع.H almeriense مبتوSسط بلغ 16.54 يوما )اجلدول 5(. يù ستنتج مما Sسبق أان النوعني الùسوريني تفوقا على النوعني الإSسبانيني باملدة حتى بلوغ الإنبات الكلي حيث بلغا احلد الأعلى لنùسبة الإنبات الكلي مبدة أاقل من النوعني الإSسبانيني وبفروق عالية املعنوية مع تباين النوعني الùسوريني فيما بينهما حيث تفوق النوع.H salicifolium على النوع.H ledifolium بفروق عالية املعنوية وكذلك تباين النوعان الإSسبانيان فيما بينهما حيث تفوق النوع.H violaceum على النوع.H almeriense بفروق عالية املعنوية أاي ضا )اجلدول 5(. الجدول 5. تأثير األنواع في المدة حتى بلوغ اإلنبات الكلي )يوم(. النوع المدة حتى بلوغ اإلنبات الكلي )يوم( 9.75 ± 0.47 11.58 ± 0.55 H. salicifolium H. ledifolium 14.96 ± 0.72 a H. violaceum 16.54 ± 1.19 H. almeriense 0.5605-3 تأثير المعاملة مع النوع: عند دراSسة العالقة )التداخل( بني املعامالت والأنواع كانت معاملة اخلدTش + النقع جميع الأنواع.H almeriense و.H salicifolium و.H ledifolium و.H violaceum أاف ضل املعامالت مبتوSسطات بلغت 6.5 5.0 4.5 و 7.5 يوما على التوايل. وكانت معاملة النقع باملاء جميع الأنواع H. salicifolium و H. ledifolium و H. violaceum و H. almeriense اأSسواأ املعامالت مبتوSسطات بلغت 14.25 27.0 20.5 16.75 يوما على التوايل )اجلدول 6(. 54
الجدول 6. تأثير تداخل معامالت البذور واألنواع في المدة حتى بلوغ اإلنبات الكلي )يوم(. H. ledifolium H. salicifolium H. violaceum H. almeriense المعامالت األنواع 6.50 ± 0.33 b 5.00 ± 0.38 a 7.50 ± 0.33 bc 4.50 ± 0.33 a الخدش + النقع بالماء 7.50 ± 0.33 bc 7.25 ± 0.37 bc 10.00 ± 0.38 ef 8.00 ± 0.38 cd الخدش 12.00 ± 0.53 gh 9.25 ± 0.37 de 15.50 ± 0.33 ij 16.00 ± 0.38 j الشاهد 12.50 ± 0.33 h 10.75 ± 0.37 fg 16.00 ± 0.38 j 20.00 ± 0.38 k المعاملة بحمض الكبريت المركز + النقع 14.25 ± 0.25 i 12.00 ± 0.53 gh 20.25 ± 0.45 k ± 0.25 23.75 المعاملة بحمض الكبريت المركز 16.75 ± 0.53 j 14.25 ± 0.25 i 20.50 ± 0.33 k 27.00 ± 0.38 النقع بالماء 1.373 - معدل الإنبات اليومي للبذور )%/يوم(: - 1 تأثير المعامالت: تباينت املعامالت فيما بينها يف معدل الإنبات اليومي للبذور بغ ض النظر عن الأنواع اإذ تفوقت معاملة اخلدTش مع النقع باملاء املقطر املعقم على باقي املعامالت بفروق معنوية عالية ومبتوSسط معدل اإنبات بلغ 17.45 %/اليوم تبعتها معاملة اخلدTش مبتوSسط بلغ 10.91 %/اليوم ثم اأتت املعاملة بحم ض الكربيت املركز مع النقع باملاء املقطر املعقم مبتوSسط بلغ 4.53 %/اليوم ثم املعاملة بحم ض الكربيت املركز مبتوSسط بلغ 3.64 %/اليوم ومل تتفوق معاملة النقع باملاء املقطر املعقم على معاملة الûشاهد اإذ بلغ متوSسط معدل الإنبات فيهما 1.17 1.19 %/اليوم على التوايل ودون فروق معنوية. وبناء على ما Sسبق ميكن القول أان معاملة اخلدTش مع النقع زادت معدل الإنبات اليومي مبقدار 16.28 %/اليوم مقارنة مبثيلتها يف معاملة الûشاهد تلتها معاملة اخلدTش مبقدار 9.74 %/اليوم ثم املعاملة بحم ض الكربيت املركز مع النقع واملعاملة بحم ض الكربيت املركز دون فروق معنوية فيما بينهما مبقدار 2.47 3.36 %/اليوم على التوايل يف حني مل ت ؤوثر معاملة النقع باملاء يف معدل الإنبات )اجلدول 7(. الجدول 7. تأثير معامالت البذور في معدل اإلنبات اليومي للبذور. المعاملة الخدش + النقع بالماء الخدش معدل اإلنبات اليومي للبذور )%/يوم( 17.45 ± 0.90 10.91 ± 0.32 المعاملة بحمض الكبريت المركز + النقع بالماء المعاملة بحمض الكبريت المركز 4.53 ± 0.18 a النقع بالماء 3.64 ± 0.16 a 1.19 ± 0.09 b الشاهد 1.17 ± 0.08 b 0.989-2 تأثير النوع: تباينت الأنواع فيما بينها بالنùسبة ملعدل الإنبات اليومي للبذور بغ ض النظر عن املعاملة فقد تفوق النوع.H almeriense مبتوSسط بلغ %/ 7.56 اليوم تاله النوع.H salicifolium مبتوSسط بلغ 6.98 %/اليوم تبعه النوع.H ledifolium مبتوSسط بلغ 6.25 %/اليوم ثم النوع.H violaceum مبتوSسط بلغ 5.13 %/اليوم )اجلدول 8(. ) 2 ( 1 - Environments10 The Arab Journal for Arid 55
الجدول 8. تأثير األنواع في معدل اإلنبات اليومي للبذور. النوع معدل اإلنبات اليومي للبذور )% / يوم( 7.56 ± 1.16 a H. almeriense H. salicifolium 6.98 ± 1.01 ab H. ledifolium 6.25 ± 0.68 b H. violaceum 5.13 ± 0.70 0.808-3 تأثير المعاملة مع النوع: وجد عند دراSسة تداخل املعامالت مع الأنواع اأن أاف ضل معاملة من حيث معدل الإنبات اليومي للبذور كانت معاملة اخلدTش مع النقع باملاء مع جميع الأنواع H. almeriense و H. salicifolium و H. ledifolium و H. violaceum مبتوSسطات بلغت 13.39 13.91 19.79 22.69 %/يوم على التوايل وكانت اأSسو أا معاملة هي معاملة النقع باملاء املقطر املعقم ملدة Sساعة 24 جميع الأنواع.H almeriense و.H ledifolium و.H violaceum H. salicifolium مبتوSسطات بلغت 0.64 1.01 1.50 1.62 %/يوم على التوايل )اجلدول.)9 الجدول 9. تأثير تداخل معامالت البذور واألنواع في معدل اإلنبات اليومي للبذور)% / يوم(. H. ledifolium H. salicifolium H. violaceum H. almeriense المعامالت األنواع 13.91 ± 0.61 a 19.79 ± 1.70 13.39 ± 0.60 a ± 1.33 22.69 الخدش + النقع بالماء 10.86 ± 0.53 bc 10.53 ± 0.55 c 9.66 ± 0.44 c 12.60 ± 0.66 ab الخدش 5.16 ± 0.13 de 5.52 ± 0.30 d 3.36 ± 0.16 efgh 4.07 ± 0.10 defg المعاملة بحمض الكبريت المركز + النقع 4.26 ± 0.10 defg 4.65 ± 0.13 def 2.48 ± 0.11 ghij 3.16 ± 0.08 fghi المعاملة بحمض الكبريت المركز 1.50 ± 0.10 hij 0.64 ± 0.19 j 1.01 ± 0.05 j 1.62 ± 0.10 hij النقع بالماء 1.81 ± 0.08 hij 0.78 ± 0.03 j 0.86 ± 0.05 j 1.23 ± 0.08 ij الشاهد 1.978 املناقûشة Uص م م ت هذه التجربة واخ ت ري ت معامالتها بقüصد اختبار فرVضية اأن Sسبب Sسكون بذور اأنواع جنùس الأجرد وتدين نùسبة إانباتها يعود اإىل Uصالدة غالف البذرة وعدم نفوذيته للماء الأمر الذي مينع البذرة من امتüصاUص املاء الالزم لإنباتها والذي يخف ض نùسبة اإنبات البذور بûشكل كبري يف املûشتل وهذا قد يكون الùسبب الأكرث اأهمية يف Sسكون بذور أانواع اجلنùس Thanos( Helianthemum وزمالوؤه 1992(. حيث تكùسر احلرارة واخلدTش طور الùسكون لهذه البذور بجرح غالف البذور الüصلد والùسماح بدخول املاء الأمر الذي يù س هل حدوث الإنبات Thanos( وزمالوؤه 1992 Valbuena وزمالوؤه 1992(. ي الحظ عند دراSسة نتائج Sسلوك الأنواع الأربعة إازاء معامالت التجربة أان معاملة اخلدTش هي املعاملة الأف ضل بغ ض النظر عن نوع الأجرد تلتها املعاملة بحم ض الكربيت املركز واحتلت معاملة النقع مفردة املوقع الأخري ما مل تاأت بعد إاحدى معاملتي اخلدTش )ميكانيكي أاو كيميائي( حيث رفعت معاملة النقع باملاء بعد خدTش البذور نùسب الإنبات بغ ض النظر عن نوع اخلدTش ميكانيكيا كان باحلف اأم كيميائيا باحلم ض يف حني اأن النقع باملاء منفردا مل يرفع نùسب الإنبات بûشكل مهم ويتوافق هذا مع نتائج دراSسات Sسابقة على اأنواع اأخرى من اجلنùس Helianthemum Pérez-García( و González-Benito 2006 López وزمالوؤه 2004 2006 Corral وزمالوؤها 1990( ولSسيما عند الأنواع الùسورية. اأما Sسبب رفع معاملة النقع لنùسب الإنبات بعد اخلدTش بûشكل معنوي ورفعها لنùسب الإنبات بعد املعاملة بحم ض الكربيت املركز بûشكل غري معنوي فقد يعزى اإىل ت ضرر البذور بتطبيق بروتوكول التطهري الùسطحي بعد املعاملة بحم ض الكربيت املركز ورمبا كان من الأف ضل زراعة البذور بعد معاملتها بحم ض الكربيت املركز وغùسلها مباTشرة دون تطبيق بروتوكول التطهري الùسطحي وهذا الأمر قد ي فù س ر انخفاVض نùسب الإنبات بعد املعاملة بحم ض الكربيت املركز مقارنة مبعاملة اخلدTش وي ؤوكد هذا ما اأTشار إاليه López وزمالوؤه )2006(. الأمر الذي يدفعنا للتوUصية باإجراء جتربة اأوSسع حول 56
املعاملة بحم ض الكربيت املركز بحيث تûشمل معامالت مع بروتوكول التطهري الùسطحي املذكور يف هذه الدراSسة ومعامالت دون بروتوكول التطهري الùسطحي كما ي نü ص ح أان ت ضم املعامالت بحم ض الكربيت املركز جمال أاوSسع لزمن املعاملة باحلم ض فبدل من الزمن املعتمد يف هذه الدراSسة وهو دقيقتان ميكن اعتماد جمال أاوSسع مثال : 4 3 2 1 0.5 و 5 دقائق ملعرفة زمن املعاملة الأنùسب لكل نوع مع العلم أان تطبيق معاملة اخلدTش اأSسهل واأرخüص تكلفة من املعاملة بحم ض الكربيت املركز يف املûشتل. كل ما Sسبق يقود إاىل التاأكيد على أان الùسبب الأهم لùسكون بذور أانواع الأجرد املدروSسة وVضعف نù س ب إانباتها يعود إاىل Uصالدة غالف البذرة وانخفاVض نفاذيته للماء الأمر الذي مينع البذرة من امتüصاUص املاء الالزم لإنباتها وهذا يتوافق مع نتائج دراSسات Sسابقة Thanos( وزمالوؤه 1992 Valbuena وزمالوؤه 1992 Pérez-García و González-Benito 2006(. وهذه الSسرتاتيجية موجودة لدى عدد غري قليل من الأنواع النباتية التي تعيûش يف املناطق اجلافة وTشبه اجلافة حيث تùسهم هذه اخلاUصية بûشكل حاSسم يف حفظ النوع عرب Sسنوات القحط املتتالية ففي الطبيعة تنبت نùسبة قليلة من البذور دون احلاجة لكùسر Sسكونها ومتنع Uصالدة الغالف النùسبة الأكرب من البذور من الإنبات خالل املواSسم التالية لتûشكل البذور وانتûشارها من الثمار كون الغالف يحتاج للتعرVض لعوامل بيئية قاSسية لعدة Sسنوات حتى ي ت ه ت ك مفùسحا املجال للبذرة لالإنبات )مثل: تفاوت درجات احلرارة والغùسل مبياه الأمطار ودورة اجلفاف والرطوبة واخلدTش امليكانيكي بالحتكاك بحبيبات الرتبة والتعرVض حلموVضة اجلهاز اله ضمي للحيوانات التي تتغذى على هذه الأنواع النباتية وتطرح بذورها مع ف ضالتها( وي ؤوخر بذلك غالف البذرة اإنبات نùسبة من البذور من عدة Sسنوات وحتى عدة عقود الأمر الذي ي ضمن البقاء للنوع بعد عدة Sسنوات متتالية من القحط ) Sسنكري 1987 Baskin و Baskin 1998 Pérez-García وGonzález-Benito 2006 Ramos وزمالوؤه 2006(. الSستنتاجات واملقرتحات عندما اإVضعاف أاو متزيق غالف بذور أانواع الأجرد املدروSسة ب إاحداث جروح اأو Tشقوق فيها بعملية اخلدTش Sسرعان ما تتمكن هذه البذور من امتüصاUص حاجتها من املاء وتنبت بùسرعة كبرية وبزمن قياSسي )ل يتجاوز Sساعة 48 اأحيانا ( حمùسنة بذلك نùسب الإنبات بûشكل كبري عالوة على ذلك يزيد النقع باملاء نùسب الإنبات بûشكل ملحوظ ولكن فقط عندما ي أاتي بعد عملية اخلدTش وليùس دونها وعليه نقرتح اعتماد معاملة اخلدTش املتبوعة بالنقع باملاء ملدة Sساعة 24 يف معاملة بذور أانواع اجلنùس Helianthemum املدروSسة وذلك لرفع نùسب إانباتها يف املûشتل. وتوSسيع جتربة املعاملة بحم ض الكربيت املركز يف معاملة بذور أانواع اجلنùس Helianthemum املدروSسة يف املخرب مبجال زمني اأوSسع للمعاملة باحلم ض ودون املعاملة باأي مطهرات Sسطحية اأخرى بعد املعاملة باحلم ض. كلمة Tشكر: يتقدم فريق البحث بجزيل الûشكر لالأSستاذة اجلامعية الدكتورة Maria Asunción Morte Gomez من قùسم بيولوجيا النبات يف كلية البيولوجيا بجامعة مدينة مورSسيا الإSسبانية على تكرمها بتاأمني بذور أانواع نبات الأجرد التي اأجريت هذه الدراSسة عليها. كما يتقدم فريق البحث بالûشكر اجلزيل لالأSستاذ الدكتور عüصام قاSسم املدير العام للهيئة العامة للتقانة احليوية الذي اأتاح املجال لتنفيذ هذا البحث يف خمابر الهيئة واأمن كل املواد الالزمة لهذا العمل. املراجع - Sسنكري حممد نذير. 1987. بيئات ونباتات ومراعي املناطق اجلافة وTشديدة اجلفاف الùسورية حمايتها وتطويرها منûشورات جامعة حلب حلب Sسورية Uصفحة. 793 - اأكùساد. 2008. أاطلùس نباتات البادية الùسورية منûشورات املركز العربي لدراSسات املناطق اجلافة والأراVضي القاحلة )اأكùساد( دمûشق Sسورية Uصفحة. 513 - Andrino, A., A. Morte, and M. Honrubia. 2011. Method for the production of mycorrhizal Cistaceae plants with desert truffle. (Revisión) Spanish Invention Patent. Registry number: 201100216. - AOSA/SCST (The Association of Official Seed Analysts and The Society of Commercial Seed Technologists) AOSA/ SCST. 2014. Report of Analysis Handbook. P 18. - Baskin, C.C., and J.M. Baskin. 1998. Seeds: Ecology, Biogeography, and Evolution of Dormancy and Germination. Academic Press, San Diego, P 666. - Brickell, C. 1989. Gardeners encyclopedia of plants and flowers. Dorling Kindersley, London. - Corral, R., J.M. Pita and F. Pérez-García. 1990. Some aspects of seed germination in four species of Cistus L. Seed Science and Technology, 18: 321-325. - Gutiérrez, A. 2001. Caracterización, micorrización y cultivo en campo de las trufas de desierto. Doctoral thesis, University ) 2 ( 1 - Environments10 The Arab Journal for Arid 57
of Murcia, Spain. - Honrubia, M., A. Cano and C. Molina-Niñirofa. 1992. Hypogeous fungi from southern Spanish semiarid lands. Personia, 14: 647-653. - ISTA (International Seed Testing Association). 1976. International Rules for seed testing. Seed science and technology, 4: 3-49. - Kagan-Zur, V., N. Roth-Bejerano, Y. Sitrit and A. Morte. 2014. Desert Truffles: Phylogeny, Physiology, Distribution and Domestication. Springer- Verlag Berlin Heidelberg, P 354. - Kovács, G.M., C. Vagvolgyi and F. Oberwinkler. 2003. In vitro interaction of the truffle Terfezia terfezioides with Robinia pseudoacacia and Helianthemum ovatum. Folia Microbiol. 48 (3): 360-378. - López, G. 1982. La Guía de Incafo de los arboles y arbustos de la Península Ibérica. Incafo, Madrid, Spain. - López, I.S., F.V. González and J.C. Luis. 2006. Micropropagation of Helianthemum inaguae, a rare and endangered species from the Canary Islands. Bot. Macaronesica, 26: 55-64. - López, I.S., J.C. Luis, M.R. Armas and F.V. González. 2004. In - vitro propagation of Helianthemum bystropogophyllum Svent., a rare and endangered species from gran canaria (Canary Islands). Bot. Macaronésica, 25: 71-77. - Morte, A. and M. Honrubia. 1992. In vitro propagation of Helianthemum almeriense Pau (Cistaceae). Agronomie, 12: 807-809. - Morte, A. and M. Honrubia. 1997. Micropropagation of Helianthemum almeriense. In: Bajaj YPS (ed) Biotechnology in agriculture and forestry. High-tech and micropropagation, vol 40. Springer, Berlin/Heidelberg: 163-177. - Morte, A., A. Gutiérrez and M. Honrubia. 2008. Biotechnology and cultivation of desert truffles. In: Varma A (ed) Mycorrhiza: Biology, Genetics, Novel Endophytes and Biotechnology. 3 rd edition. Springer, Germany: 467-483. - Morte, A., M. Zamora, A. Gutiérrez and M. Honrubia. 2009. Desert truffle cultivation in semiarid mediterranean areas. in: Mycorrhizas Functional Processes and Ecological Impact, Chapter 15. C. Azcón-Aguilar, J.M. Barea, S. Gianinazzi, and V. Gianinazzi-Pearson. (eds.). Springer- Verlag Berlin Heidelberg: 221-233. - Mouterd, P. 1966. Nouvelle flore du Liban et de la Syrie. 3 Tome + Atlas: DAR El Mashreq, Beyrouth, Liban, P 563. - Pérez-García, F. and M.E. González-Benito. 2006. Seed germination of five Helianthemum species: Effect of temperature and pre-sowing treatment. Journal of Arid Environment, 65: 688-693. - Polunin, O. and A. Huxley. 1972. Flowers of the Mediterranean. Chatto and Windus, London. - Post, G. 1932. Flora of Syria, Palestine and Sinai. Volumes I: American Press, Beirut, P 928. - Ramos1 M.E., B. Robles and J. Castro. 2006. Efficiency of endozoochorous seed dispersal in six dry-fruited species (Cistaceae): from seed ingestion to early seedling establishment. Plant Ecology, 185: 97-106. - Slama, Z., Fortas, A. Boudabous and M. Neffati. 2010. Cultivation of an edible desert truffle (Terfezia boudieri Chatin). available online http://www.academic journals.org/ajmr. African Journal of Microbiology Research, 4 (22): 2350-2356. - Thanos, C.A., K. Georghiou, C. Kadis and C. Pantazi. 1992. Cistaceae: a plant family with hard seeds. I. J. of Botany, 41: 251-263. - Torrente, P., A. Navarro-Ródenas, A. Gutiérrez and A. Morte. 2009. Micropropagacion de Helianthemum hirtum y micorrización in vitro con micelio de Terfezia claveryi. VIII Reunión de la Sociedad Española de Cultivos in Vitro de Tejidos Vegetales, Murcia, Spain. - Valbuena, M.L., R. Tárrega and E. Luis. 1992. Influence of heat on seed germination of Cistus laurifolius and C. ladanifer. International Journal of Wildland Fire, 2: 15-20. - Zambonelli, A., and G.M. Bonito. 2012. Edible ectomycorrhizal mushrooms, current knowledge and future prospects. Springer-Verlag, Berlin Heidelberg. P 409. - Zamora, M., A. Morte, A. Gutiérrez and M. Honrubia. 2006. Helianthemum violaceum Pers., a new host plant for mycorrhizal desert truffle plant production. 5 th Inter Conf. Mycorrhiza, Granada, Spain, P 223. Nº Ref: 677 58