INSO st.Edition 2018 Identical with ISO/TS 18827: 2017 خو ر اساله ا زاى Islamic Republic of Iran ساسهاى هل استا دارد ا زاى Iranian National Sta

النسخ

1 INSO 2264 st.edition 208 Identical with ISO/TS 8827: 207 خو ر اساله ا زاى Islamic Republic of Iran ساسهاى هل استا دارد ا زاى Iranian National Standardization Organization استا دارد هل ا زاى- ا ش 2264 چاپ ا ل 396 ف ا ر ا - تطد د اسپ ي الکتز ى( ) ب ػ اى ر ض بزا ا داس گ ز گ ا اکس ضى اک طگز ت ل دضد ب س ل ا ه اد اکس د فلش (ROS) Nanotechnologies Electron spin resonance () as a method for measuring reactive oxygen species (ROS) generated by metal oxide nanomaterials ICS:

2 ساسهاى هل استا دارد ا زاى ت طاى يلغ خ ة غطث ه ساى ه ذ بثبى ل ؼهط پالن 2592 ن س قپؿت : ت طاى- ا طاى تلفي: ز ض گبض: وطج ق ط ن ؼت ه ساى اؾتب ساضز ن س ق پؿت : وطج - ا طاى تلفي: )026( ز ض گبض: )026( ضا ب به : standard@isiri.gov.ir ثگب : Iranian National Standardization Organization (INSO) No Valiasr Ave., South western corner of Vanak Sq., Tehran, Iran P. O. Box: , Tehran, Iran Tel: + 98 (2) Fax: + 98 (2) , Standard Square, Karaj, Iran P.O. Box: , Karaj, Iran Tel: + 98 (26) Fax: + 98 (26) standard@isiri.gov.ir Website: ة

3 ب ام خدا آض ا با ساسهاى هل استا دارد ا زاى ؾبظهبى هل اؾتب ساضز ا طاى ث ه خت ث س ه هبز 3 لب ى انالح ل ا ي همطضات هؤؾؿ اؾتب ساضز تحم مبت ن ؼت ا طاى هه ة ث وي هب 37 ت ب هطخغ ضؾو وك ض اؾت و ظ ف تؼ ي تس ي كط اؾتب ساضز ب هل )ضؾمو ( ا مطاى ضا ثم ػ س زاضز. تس ي اؾتب ساضز زض ح ظ ب هرتلف زض وو ؿ ى ب ف هطوت اظ وبضق بؾبى ؾمبظهبى نمبحت ظمطاى هطاومع هؤؾؿمبت ػلو پػ ك ت ل س التهبز آگب هطتج ا دبم ه ق ز و قك وگبم ثب ههبلح هل ثب ت خ ث قمطا ت ل مس ف ب ض تدبض اؾمت وم اظ هكمبضوت آگب ب م ه همفب نمبحجبى حمك فمغ قمبهل ت ل سو مسگبى ههمط و مسگبى نبزضو سگبى اضزو سگبى هطاوع ػلو ترهه بز ب ؾبظهبى ب ز لت غ طز لتم حبنمل هم قم ز. پم ف م ؽ اؾتب ساضز ب هل ا طاى ثطا ظطذ ا ث هطاخغ ش فغ اػ ب وو ؿ ى ب هطث اضؾمب هم قم ز پمؽ اظ زض بفمت ظط ب پ ك بز ب زض وو ت هل هطتج ثب آى ضقت طح زض ن ضت ته ت ث ػ اى اؾتب ساضز هل )ضؾو ( ا مطاى امبح ه تكط ه ق ز. پ ف ؽ اؾتب ساضز ب و هؤؾؿبت ؾبظهبى ب ػالل ه س ش نالح ع ثب ضػب ت يم اث تؼ م ي قمس ت م هم و مس زضوو ت هل طح ثطضؾ زضنم ضت تهم ت ثم ػ م اى اؾمتب ساضز هلم ا مطاى امبح ه تكمط هم قم ز. ثمس ي تطت مت اؾتب ساضز ب هل تلم ه ق ز و ثط اؾبؼ همطضات اؾتب ساضز هل ا طاى قوبض 5 تس ي زض وو ت هل اؾمتب ساضز هطثم و زض ؾبظهبى هل اؾتب ساضز ا طاى تكى ل ه ق ز ث ته ت ضؾ س ثبقس. ؾبظهبى هل اؾتب ساضز ا طاى اظ اػ ب انل ؾبظهبى ث يالولل اؾتب ساضز ؾبظهبى ث يالولل ا ساظ ق بؾ لب 2 وو ؿ ى ث يالولل الىتط تى مه )IEC( (ISO) (OIML) اؾت ث ػ اى ت مب ضاثم وو ؿم ى ومسوؽ غمصا (CAC) زض وكم ض فؼبل ت ه و س. زض تس ي اؾتب ساضز ب هل ا طاى يوي تمم خ ثم قمطا ولم بظه مس مب ذمبل وكم ض اظ آذمط ي پ كطفت ب ػلو ف ن ؼت خ بى اؾتب ساضز ب ث يالولل ث ط گ ط ه ق ز. ؾبظهبى هل اؾتب ساضز ا طاى ه ت ا س ثب ضػب ت ه اظ ي پ فث قس زض لب ى ثطا حوب ت اظ ههط و سگبى حفظ ؾالهت ا و فطز ػوم ه حهم ا و مبى اظ و ف مت هحهم تت هالحظمبت ظ ؿمتهح م التهمبز اخمطا ثؼ م اظ اؾتب ساضز ب هل ا طاى ضا ثطا هحه تت ت ل س زاذل وك ض / ب الالم اضزات ثب ته ت قم ضا ػمبل اؾمتب ساضز اخجمبض و س. ؾبظهبى ه ت ا س ث ه ظ ض حفظ ثبظاض مب ثم يالوللم ثمطا هحهم تت وكم ض اخمطا اؾمتب ساضز وبت مب نمبزضات زضخ ث س آى ضا اخجبض و س. وچ ي ثطا ا و بى ثرك سى ث اؾتفبز و سگبى اظ ذسهبت ؾبظهبى ب هؤؾؿمبت فؼمب زض ظه هكب ض آه ظ ثبظضؾ هو ع نس ض گ ا ؾ ؿتن ب هس ط ت و ف ت هس ط ت ظ ؿتهح آظهب كمگب مب هطاوع اؾ د )وبل جطاؾ ى( ؾب ل ؾ دف ؾبظهبى هل اؾتب ساضز ا يگ ؾبظهبى ب هؤؾؿبت ضا ثط اؾمبؼ يم اث ظمبم تأ س نالح ت ا طاى اضظ بث ه و س زض ن ضت احطاظ قطا تظم گ ا به تأ س نالح ت ث آى ب اػ ب ثط ػولىمطز آى مب ظبضت ه و س. تط ح زؾتگب ث يالولل ىب ب اؾ د ؾب ل ؾ دف تؼ ي ػ بض فلعات گطا ج ب ا دبم تحم ممبت ومبضثطز ثطا اضتمب ؾ ح اؾتب ساضز ب هل ا طاى اظ ز گط ظب ف ا ي ؾبظهبى اؾت. - International Organization for Standardization 2- International Electrotechnical Commission 3- International Organization for Legal Metrology (Organisation Internationale de Metrologie Legals) 4- Contact point 5- Codex Alimentarius Commission ج

4 کو س ى ف تد ي استا دارد»تطد د اسپ ي الکتز ى( ) ب ػ اى ر ض بزا ا داس گ ز گ ا اکس ضى اک طگز (ROS) ت ل دضد ب س ل ا ه اد اکس د فلش «رئ س: ه طوبظو ؾ س هحو س )زوتط ه سؾ ه از هتبل ضغ ( سوت / ا هحل اضتغال: ػ ئت ػلو زا كگب ػلن ن ؼت ا طاى دب ز: زثبؽ وبقب فب و )زوتط ف ع ه( ػ ئت ػلو زا كگب ػلن ن ؼت ا طاى اػضا: )اؾبه ث تطت ت حط الفجب( اؾاله پ ض ال )وبضق بؾ اضقس ظ ؿتق بؾ ( تبجآثبز هط ن )زوتط ه سؾ پعقى - ث ه از( نبزق حؿ نس م )وبضق بؾ اضقس ق و تدع ( غ فط ؾ س هحو س حؿ ي )وبضق بؾ اضقس ب ه از( گلظضز ؾو طا )وبضق بؾ اضقس ب ه از( ه طظاخب فب و )زوتط ف ت ق و ( دنالس ي دو )زوتط ه سؾ ه از( وبضق بؼ وو ت اؾتب ساضزؾبظ - ؾتبز ػ ت ؾؼ ف ب ض ب ػ ئت ػلو زا كگب ػلن ن ؼت ا طاى ػ ئت ػلو پػ كگب ن ؼت فت وبضق بؼ احس اضظ بث هحه تت ؾتبز ب وبضق بؼ وو ت اؾتب ساضزؾبظ - ؾتبز ػ ت ؾؼ ف ب ض ب ػ ئت ػلو زا كگب ق س ث كت ػ ئت ػلو زا كگب آظاز اؾاله - احس ػل م تحم مبت زاستار: ؾ ف ه )وبضق بؾ اضقس هس ط ت ز لت ( وبضق بؼ اؾتب ساضز- ب ت ض ؽ وو ت ف هت بظط ف ب ض ب ز

5 ف زست ه درخات ػ اى پ فگفتبض همسه صفح ظ ح س زاه وبضثطز هطاخغ العاه ان الحبت تؼبض ف و ت قت ب -3 ان الحبت تؼبض ف 2-3 و ت قت ب ان 4-4 ول بت 2-4 ض ث تل ا ساظ اؾپ -2-4 ول بت تل DMPO تل BMPO تل TPC و تط هثجت ثطا ت ل س ضاز ىب -3-4 او ف ف ت ى ب آظاز ؾ ؿتن پ ظا ت ي- ظا ت ي اوؿ ساظ حؿبؾ ت ث ض ضظ ث گب او كگط ب زؾتگب ب و ثطزاض -7 آهبز ؾبظ آظهب )تؼل ك ب ه از اوؿ س فلع ( 2-7 آهبز ؾبظ هحل ثطا ت ل س ضاز ىب سض وؿ ل -2-7 هحل FeSO هحل H 2 O آهبز ؾبظ هحل ثطا ت ل س ضاز ىب آ ى ؾ پطاوؿ س -3-7 ثبفط فؿفبت هحل پ ظا ت ي هحل ظا ت ي اوؿ ساظ

6 ػ اى صفح )DMPO/OH( DMPO )BMPO/OOH( BMPO )TPC/ O 2 ( TPC 4-7 آهبز ؾبظ هحل ثطا ت ل س اوؿ ػى ه فطز 5-7 آهبز ؾبظ ػبهل ث تل ا ساظ اؾپ پب DMPO پب BMPO پب TPC -5-7 ول بت هحل هحل هحل 6-7 او ف آظهب ػبهل ث تل ا ساظ اؾپ -6-7 ول بت او ف DMPO او ف BMPO او ف TPC 7-7 او ف و تط هثجت ػبهل ث تل ا ساظ اؾپ -7-7 تطو ت هحه افعا ك ضاز ىب تطو ت هحه افعا ك ضاز ىب تطو ت هحه افعا ك ضاز ىب 8-7 آهبز ؾبظ و اؾتب ساضز ثطا هحبؾج اؾپ ي تساذل ب -8 و ثطزاض 2-8 ظهبى و ثطزاض ض وبض -9 ول بت 2-9 تعض ك و 3-9 ا ساظ گ ط هثب ب اظ تب ح DMPO/OH -0 BMPO/OOH TPC/ O 2 0 TEMPOL وتبة به

7 پ صگفتار اؾتب ساضز «تكس س اؾپ ي الىتط ى )( ث ػ اى ض ق ثطا ا ساظ گ مط گ م مب اوؿم ػى او كمگط )ROS( ت ل سقس ث ؾ ل ب ه از اوؿ س فلع «و پ ف م ؽ آى زض وو ؿم ى مب هطثم ثمط هج مب پص ط اؾتب ساضز ب ث يالولل /ه م ا ث ػ اى اؾتب ساضز هل ا طاى ث ض اقبض قس زض ه ضز الف ث س 7 اؾتب ساضز هل ا طاى قوبض 5 ت تس ي قس زض قهمت ؾم ه ي اخالؾم وو تم هلم اؾمتب ساضز ف ب ض ب ه ضخ 96 ته ت 2/23/ قس. ا ه ا ي اؾتب ساضز ث اؾت بز ث س ه هبز 3 لب ى انالح ل ا ي همطضات هؤؾؿ اؾتب ساضز تحم مبت ن ؼت ا طاى هه ة ث وي هب 37 ث ػ اى اؾتب ساضز هلم ا مطاى ه تكط ه ق ز. اؾتب ساضز ب هل ا طاى ثط اؾبؼ اؾتب ساضز هل ا طاى قوبض 5 )اؾتب ساضز ب هل ا مطاى- ؾمبذتبض قم گبض( تس ي ه ق س. ثطا حفظ وگبه وب گ ثب تح تت پ كطفت ب هل خ مب زض ظه م ن ب غ ػل م ذسهبت اؾتب ساضز ب هل ا طاى زض ن ضت لع م تدس س ظط ذ ا س قس مط پ كم بز وم ثطا انالح ب تىو ل ا ي اؾتب ساضز ب اضائ ق ز زض گبم تدس س ظط زض وو ؿ ى ف هطث هم ضز ت خم لطاض ذ ا س گطفت. ث بثطا ي ثب س و اض اظ آذط ي تدس س ظط اؾتب ساضز ب هل ا طاى اؾتفبز وطز. اؾت: ا ي اؾتب ساضز هل ثط هج ب پص ط اؾتب ساضز ث يالولل ظ ط ث ض»هؼبز ىؿبى«ت تس ي قمس قبهل تطخو ترهه وبهل هتي آى ث ظثبى فبضؾ ه ثبقس هؼبز ىؿبى اؾمتب ساضز ثم يالوللم هعثم ض ISO/TS 8827: 207, Nanotechnologies - Electron spin resonance () as a method for measuring reactive oxygen species (ROS) generated by metal oxide nanomaterials ظ

8 ه) هقده اذ طا اؾتفبز اظ ب ه از پب فلع ب پب اوؿ س فلع ب فلع ث قست زض ههبض ن ؼت ظ ؿت پعقى ضقس بفت اؾت. طا س هج ب ػلو ثطا ؾو ت بذت ا ؾو ت غ ت ى اوثط ب ه از ؾبذت قس وبهال لبثل زضن ؿت س. ى اظ ؾبظ وبض ب ه ن ب ؾو ت ت ل س گ ب اوؿ ػى )ROS( او كگط ه بلؼ ثط ض آثبض ذ ط بن ب ه از اوؿ س فلع ظ زض هطحل اثتسا ذ ز لطاض زاضز. ت ا ب ت ل س ه ه جغ ه ن اظ ؾو ت ب ه از اوؿ س فلع اؾت. ت ل س ث ف اظ حس ت د بت ا بذت ب زض حفظ وبضوطز ت ظ نقس اوؿب ف- ت د ا ي فطآ س هوىي اؾت ه دط ث ترط ت DNA اضؾب ؾل ل ؾو ت بذت ا هطي ثط به ض ع قس بذت ا )ذعاى خ ز زاض س و ه ت ا س ثط ض ت ل س شض ثبض ب هثجت ؾ ح اوؿ س ب ب فلع فؼ ب اؾت. ROS ROS ROS 5 گط ب ه خ ز ثط ؾ ح ؾبظ ض فطاث فف 2 ه ت ا س ت ف اوؿب ك زض 3 وب ف ف ع ل غ ج ؼ ضا تحو ل و س. زض ؾ گ ب ب به ظن ؾل ل تغ ط زض تحطن 4 بذت ا ( آغبظ ؾط بى ق ز. ػ اهل ه و تأث ط ثگصاض س. ػ اهل تؼ يو س ه ن هب س ا ساظ قىل ؾ ح ا ج ف ا حال ح شض ى فلع ثط وى ف ثب ض ب ف بفت 6 بذت ب الت بة اظ ب فلعات ph ؿت س []. ث بثطا ي ث ه ظ ض آقىبضؾبظ تؼ ي ه عاى تكى ل ROS اؾتب ساضز جك 7 ض تكس س اؾپ ي الىتط ى )( ضا پ ك بز ه ز س. ه بلؼبت )OH( ضاز ىب آ ى ث كتط زاض س. گؿتطز هطتج ظ ؿتق بؾ ا دبمقس زض ه بى گ ب هح ض ؾ ح ه از ب اوؿ س فلع ا ي ROS 9 ؾ پطاوؿ س -( 2 )O اوؿ ػى طا س آقىبضؾبظ هؿتم ن ثطذ ضاز ىب ب آظاز هحل زض زهب اتبق ثؿ بض هكىل ب غ طهوىي اؾت ه بلؼ ضاز ىب 8 ضاز ىب سض وؿ ل 0 )H ) سض غى پطاوؿ س 2 O 2 ( ه فطز ( 2 O آ ى )هب س ؾ پطاوؿ س.[2] ث تل ا ساظ ا و ت ضاز ىب سض وؿ ل( زض 2 اؾپ اثعاض اضظقو س زض 3 ب آظاز گصضا اؾت [3]. ث تل ا ساظ اؾپ ض ق اؾت و زض ا اذط ز 960 ت ؾؼ 5 4 بفت آى ه تط ى ب تطو ت زاضا تط ؾ ل تل اؾپ ي( ثب ضاز ىب آظاز س او ف - Reactive oxygen species 2- Oxidative stress 3 - Redox-regulated functions 4- Apoptosis 5- S-containing groups 6- Inflammation 7- Electron-spin-resonance 8 - Hydroxyl radical 9- Superoxide anion radical 0- Singlet oxygen - Hydrogen peroxide 2- Spin trapping 3- Transient free radicals 4- Nitrone 5 - Nitroso Compound ح

9 ثگ طز افعا ك تب ه ز س ه ضاز ىب آظاز پب ساض لبثل تكر م )هحه تت قىل اؾپ ي( ث ؾ ل فؾ د آقىبضؾبظ ق ز. هحه تت افعا ك اؾپ ث ن ضت هؿتم ن ث ؾ ل فؾ ح ا ي هحه تت افعا ك اؾپ ه حهطث فطز ث ز اثط ا گكت ثطا ح ض ا ي اؾتب ساضز ض ب آقىبضؾبظ ث ؾ ل لبثل هكب س ؿت س. ف ب ROS ض هحه افعا ك سض وؿ ل هحؿ ة ه ق س ز هت ل- - پ ط ل ي- N- اوؿ س )DMPO( هحه افعا ك ؾ پطاوؿ س 5- ت طت- ث ت وؿ وطث ل 5- هت ل - پ ط ل ي- پ ط ل ي N تكر م ت ل س اوؿ س )BMPO( تكى ل هحه افعا ك اوؿ ػى ه فطز وطث وؽآه س )TPC( ROS اظ ب ه از اوؿ س فلع ضا تؼ ي ه و س. ا ي اؾتب ساضز تتطاهت ل- 3 - ض ق ثطا ض ب ه از اوؿ س فلع زض قطا آظاز بذت فطا ن ه و س. ا ي ض هوىي اؾت ا الػبت اضظقو س ثطا پ فث ؾو ت بذت ا زض فبظ ؾ دف ف ع ى ق و ب اضائ ز س. -ROS 2 اؾ ثس ى بظ ث ثطضؾ ؾو ت بذت ا زض - Adducts 2 - ROS-mediated

10 ف ا ر ا - تطد د اسپ ي الکتز ى () ب ػ اى ر ض بزا ا داس گ ز گ ا اکس ضى اک طگز (ROS) ت ل دضد ب س ل ا ه اد اکس د فلش دف داه کاربزد ) ت ل سقس ث ؾ ل 2 س اظ تس ي ا ي اؾتب ساضز اضائ ض ق ثطا آقىبضؾبظ O ( ROS 2,O,OH ب ه از اوؿ س فلع زض هحل آث ثب گ ب اوؿ ػى او كگط- ػبهل ث تل ا ساظ اؾپ ػ ث ؾ ل و ق ز. اؾت ل ا ي اؾتب ساضز ض ب ضا و اظ ػبهل ث تل ا ساظ اؾپ اؾتفبز و و س قبهل 2 هزاخغ الشاه چ هطخغ العاه ثطا ا ي اؾتب ساضز خ ز ساضز. 3 اصغالحات تؼار ف ک ت ضت ا زض ا ي اؾتب ساضز ان الحبت تؼبض ف و ت قت ب ظ ط ث وبض ه ض س: ؾبظهبى بISO IEC پب گب ب زاز ب هطث ث ان الحبت ضا و ثطا اؾتب ساضزؾبظ اؾتفبز ه ق ز گ ساض ه و س آزضؼ ب آى ب زض ظ ط آهس اؾت: ه خ ز زض IEC Electropedia ؾبهب ثطذ ISO ه خ ز زض -3 اصغالحات تؼار ف --3 ا هاد nanomaterial هبز ا و ط ثؼس ذبضخ آى ب هم بؼ اؾت ب ؾبذتبض زاذل ب ؾبذتبض ؾ ح آى ب هم بؼ اؾت. ادآ ر - ا ي ان الح ػو ه قبهل ب ق ء هبز ب ؾبذتبض اؾت. ادآ ر 2- ب هبز ه سؾ قس ب هبز ؾبذت قس ب هبز تهبزف ع هكب س ق س. ] ه جغ: ثطگطفت اظ ظ طث س 4-2 اؾتب ساضز هل ا طاى- ا ع قوبض : ]

11 2--3 آسها test sample هبز افعاض ثرك اظ هحه خعء افعاض ثرك ب اؾترطاخ اظ آى و زض هؼطو ؾ دف ب آظه ى ق و ب ب ظ ؿتق بؾ لطاض زاضز. =ه جغ: ثطگطفت اظ ظ طث س 5-3 اؾتب ساضز 3--3 ک تزل هب ا صفز <ISO/TS :2009 zero baseline control هؼبز و تط هثجت و زض آى چ ضاز ىبل آقىبض و ق ز. ادآ ر - ث ػ اى هثب و تط هج ب ؾبهب پ ظا ت ي- ظا ت ي اوؿ ساظ (HX-XO) زض غ بة 5 ض ضظ ث گب ضظ ث گب TPC زض غ بة ض ذ ا س ث ز. 2 نفط ثطا و تط هثجت او ف ف ت ى 2 BMPO H 2 O DMPO 4 HX-XO پ ظا ت ي ک تزل هثبت زض غ بة آ ي اؾت ثطا ذ ا س ث ز ثطا حؿبؾ ت positive control هبز ب خؿن ث ذ ث هكره بث قس گبه و ثب ض آظه ى ذبن اضظ بث ه ق ز قب ؿتگ ؾبهب آظه ى ثطا زؾت بث ث ه پبؾد هثجت ب او ك ضا ث ن ضت ه بؾت تىطاضپص ط كبى ه ز س. =ه جغ: <ISO/TS :202, Device 2 - Fenton reaction 3- Hypoxanthine xanthine oxidase 4- Hypoxanthine 5 - Rose bengal photosensitization 2

12 2-3 ک ت ضت ا ROS Reactive Oxygen Species Electron Spin Resonance گ ب اوؿ ػى او كگط تكس س اؾپ ي الىتط ى DMPO 5,5-dimethyl--pyrroline-N-oxide ز هت ل- - N- پ ط ل ي اوؿ س BMPO TPC 5-tert-butoxycarbonyl-5-methyl-- pyrroline-n-oxide 2,2,5,5- tetramethyl-3-pyrroline- 3- carboxamide 5 -ت طت- ث ت وؿ وطث ل- 5 -هت ل- - پ ط ل ي- N- اوؿ س تتطاهت ل- 3 - پ ط ل ي- 3 - وطث وؽآه س DTPA diethylenetriaminepentaacetic acid اؾ س اؾ س ز ات ليتط آه ي اؾت ه پ تب ضاز ىب سض وؿ ل ى سض وؿ س ضاز ىب اوؿ ػى ه فطز آ ى ؾ پطاوؿ س تتطاهت ل پ پط س ي- - اوؿ ل OH OH - O 2 hydroxyl radical hydroxide ion superoxide anion radical singlet oxygen O 2-4 سض وؿ ل hydroxyl-2,2,6,6-tetramethylpiperidine- TEMPOL -oxyl اص ل کل ات 4-4 زض اغلت اتن ب ه لى ب الىتط ى ب خفت ؿت س. الىتط ى ب خفتقس ؾ گ ب زضحبل و اتن ب ه لى ب ثب الىتط ى ب خفت كس ه ؾ گ ب و ز س ه ز س. ظهب و ه اتن ب ه لى ثب ه الىتط ى خفت كس زض ه ساى هغ ب ؿ لطاض ه گ طز اؾپ ي الىتط ى خفت كس ه ت ا س نخ ت ب ذال خ ت ه ساى ت ظ ن ق ز. ا ي ز خ ت اؾپ ي الىتط ا طغ ب هتفب ت زاض س. وبضثطز 3

13 ه ساى هغ ب ؿ زض ه الىتط ى خفت كس حص حبلت ب اؾپ تج گي آى اؾت. فؾ د 2 خصة تبثف ض عه ج هطتج ثب گصاض ث ي ا ي ز حبلت اؾپ غ طتج گي ضا ا ساظ گ ط ه و س [4]. 2-4 ر ش ب تل ا داس اسپ -2-4 کل ات زض فؾ د ث تل ا ساظ اؾپ ثطا آقىبضؾبظ ق بؾب ضاز ىب ب آظاز ثب ػوط و تب اؾتفبز ه ق ز. ث ض ا س آ هحه افعا ك قىل گطفت ث ي ه ػبهل ث تل ا ساظ اؾپ ضاز ىب آظاز زاضا هكره ف ث ز ػ آى ضاز ىب آظاز اؾت. ه بلؼبت پ كطفت ػبهل ب تل -اؾپ ثطا تكر م ا اع هتفب ت ROS پص طفت قس اؾت. ثب ث وبضگ ط تل DMPO تل DMPO هعا ب ه و ؿجت ث ز گط تل ب اؾپ ي تط ى زاضز. ث ػ ثطا ق بؾب ضاز ىب اوؿ ػى هح ض ث ض هثب افعا ك اؾپ قىلگطفت آ ى ث ي ؿجت قست :2:2: تمؿ ن هحه افعا ك تل ضاز ىب ؾ پطاوؿ س DMPO ب سض وؿ ل ثؿ بض هف س ضاز ىب سض وؿ ل ه ؾ گ ب a H 3 ف قظط ف a N DMPO-OH ؾبظگبض اؾت هؿب ثطاثط ثب /49 mt تب mt ب ؿت س. هحه ا بض ثرك ثب /5.[5] زاضز و ثب تل BMPO تل BMPO ػوط و تب اؾت ثطا آقىبضؾبظ ثط ىت زض ىت ػ ضاز ىب ثب قىلگ ط هحه تت افعا ك لبثلتكر م ؾ دفپص ط ب سض وؿ ل آ ى ب ؾ پطاوؿ س ثب ث ؾ ل فؾ د.[6] ه بؾت ز گط تل ب اؾپ تط ى هب س تل DMPO ث آؾب ث ي ضاز ىب سض وؿ ل ؾ پطاوؿ س توب ع لبئل و ق س ظ طا هحه افعا ك سض وؿ ل 4 اپبق ذ زث ذ ز هحه افعا ك ؾ پطاوؿ س t /2 ( DMPO اظ 0/9 تب /3( ث DMPO اتفبق ه افتس. هحه افعا ك افعا ك سض وؿ ل اپبق س و ق ز نػوط ذ ل ت تط زاضز افعا ك ؾ پطاوؿ س BMPO ؾ پطاوؿ س BMPO t /2 ( =/8 H a ه جك اؾت mt a N = /34 ثب mt ث هحه اظ 8/5 تب 5/7([7]. هحه.[9] [8] - Degenerate 2 - Non- degenerate 3 - Hyperfine splitting 4 - Decay 4

14 4-2-4 تل TPC تل. ف TPC حؿبؾ ت گؿتط ز به ى ه بؾج ثطا آقىبضؾبظ تكى ل اوؿ ػى ه فطز زاضز [0] هحه افعا ك اوؿ ػى هحه افعا ك ادآ ر - ث ض هثب ه فطز- ؾ گ ب TPC ؾ تب كبى ه ز س :: ؾ گ ب ثب قست.[] TPC/ O 2 ه قىب ف قظط ف a N= 0/72 mt زاضز [2]. ث اثت خفتقسگ ف قظط ف ؿت ب هغ ب ؿ )a; قىب ف قظط ف ف ai و زض آى i ) H 3 C 4 N الگ ه ف قبهل ا الػبت زضثبض ؾبذتبض سؾ ا ي ضاز ىب ادآ ر 2- پ ب ذ ف هكره قطا تكس س خصة ثؿبهس- ا طغ اؾت [3]. ب ؿت س. ع ؿت ب 3-4 ک تزل هثبت بزا ت ل د راد کال ا آساد او ف ف ت ى ؾبهب پ ظا ت ي- ظا ت ي اوؿ ساظ )HX-XO( حؿبؾ ت ث ض ضظ ث گب ؾبهب ب ث ذ ث هكره بث قس ا ؿت س و ه ت ا س ث تطت ت ضاز ىب سض وؿ ل آ ى ب ؾ پطاوؿ س اوؿ ػى ه فطز ت ل س و س. ا ي ؾبهب ب ه بؾت ث زى ػبهل ب ث تل ا ساظ اؾپ ضا كبى ه ز س و ه دط ث الگ ب ؾ گ ب قىب ف قظط ف. تىطاضپص ط هتؼلك ث هحه تت افعا ك اؾپ ه ق س هب س ؿجت قست -3-4 اک ص ف ت ى [4] ى ب فلع اؾ ه ت ا س ضا قىل ز س. ا ي ؾبهب H 2 O 2 ضا فؼ ب ؾبظ س تب ضاز ىب ب سض وؿ ل و اوؿ س ب ل ؿت س او ف ف ت ى به س ه ق ز. آ ي )II( ) ى فط ؼ ) ث ؾ ل سض غى پطاوؿ س 2 اوؿ س ه ق ز تب آ ي )III( ) ى فط ه ( ه ضاز ىب سض وؿ ل آ ى سض وؿ ل ) او ف ( ت ل س ق ز. ضاز ىب سض وؿ ل ت ل سقس زض او ف ف ت ى هوىي اؾت ت ؾ افعا ك اؾپ DMPO/OH حبنل ق ز ) او ف 2(. DMPO ث تل افتس تب هحه Fe H O Fe +OH OH OH+DMPO DMPO OH + او ف او ف ساها پ سا ت ي- سا ت ي اکس داس [5] ؾبهب پ ظا ت ي- ظا ت ي اوؿ ساظ )HX-XO( ؾبهب ا اؾت و ث ذ ث هكره بث قس اؾت و ه ت ا س آ ى ب ؾ پطاوؿ س ضا ت ل س و س ) او ف 3 او ف 4(. آ ى ؾ پطاوؿ س ه ت ا س ث ؾ ل BMPO ث تل افتبز هحه افعا ك اؾپ BMPO/OOH ضا تكى ل ز س ) او ف 5(. Xanthine oxidase Hypoxanthine+H 2O+O 2 Xanthine+H 2O 2 او ف 3 - Ferrous ion 2- Ferric ion 5

15 Xanthine oxidase xanthine+h 2O+O2 Uric acid+o2 2 O +BMPO BMPO OOH او ف 4 او ف حساس ت ب ر رس ب گال [7] [6] ضظ ث گب ث ػ اى حؿبؼو س ض ثطا ت ل س اوؿ ػى ه فطز ق بذت ه ق ز. گبم ثطا گ رتگ ض ضظ ث گب ا طغ ذ ز ضا ث اوؿ ػى ه لس اوؿ ػى ه فطز ه تمل ه و س ) او ف 6 او ف 7 (. ؾپؽ TPC ثب ث تل ا ساذتي اوؿ ػى ه فطز ه ت ا س تكى ل هحه افعا ك TPC/ O 2 ضا ثس س ) او ف 8(. او ف 6 Light λ max =around550nm rose bengal rose bengal rose bengal O2 TPC TPC O2 rose bengal O 2 O2 او ف 7 او ف 8 5 اک طگز ا نطفب اظ او كگط ب ثب و س. زضخ تدع ا ق بؾب قس فم اظ آة هم ط ب آة ثب ذل ل اؾتفبز هؼبز -5 ػاهل اسپ ي-تل.TPC ث ػ اى هثب DMPO BMPO 2-5 اک طگز ا ک تزل هثبت ثطا و H 2 O 2 FeSO 4 ثبفط فؿفبت )4 )ph 7 / اؾ س ز ات ليتط آه ي پ تب اؾت ه اؾ س )DTPA( ب 2 ضظ ي تجبز ى ا گبل س پ ظا ت ي ظا ت ي اوؿ ساظ ضظ ث گب. آب ىسدا ضد MΩ( 8 / 2 در )25 C و استا دارد بزا هحاسب اسپ ث ػ اى هثب.TEMPOL - Analytical grade 2 - Chelating ion 6

16 6 دستگا ا زؾتگب آظهب كگب هؼو ل ه ضز بظ اؾت ث ػ ه اضز ظ ط: -6 تزاس آسها طگا. 2-6 ل ل سا تز ف ص / 5 ه ل ل تز..000 μl 3-6 پ پت ا ثب حدن تب 0μl تب μl 4-6 س سى ا پ پت ثطا حدن μl 5-6 نسى گزداب ا.. / سا تز ف ص ثطا ل ل ؾب تط ف غ ml 7-6 سل و )سل و هسغح ا ل ل و ضب ه ي اسک( ثطا و ب هحل ب آث هتكىل اظ و اضتع )ؾ ل ى ى ز اوؿ س ذبلم.)SiO ه بغ ر λmax حس ز 550 ب هتط. 9-6 ع فس ح تطد د اسپ ي الکتز ى. و بزدار آهاد ساس آسها )تؼل ق ا هاد اکس د فلش( 7-7 ب هبز اوؿ س فلمع ثم نم ضت تمبظ زض آة م ىظزا م قمس آهمبز قمس فم ضا زض مه منظى گطزاثم ا 2 ب ثب پ پتوطزى منظز هم قم ز. تمط جمب وك سى هبز ث ؾم ل پ پمتومطزى ثم ذم ث هرلم مم فطآ ممس ؾمم هوممطزى ضاز ىممب 500μl ثمطا مط و م تظم اؾمت. ثمب منظزى گطزاثم ا مب ممب همم ت ا ممس ت ل ممس قمم س 3 قم ز. ؾم هومطزى جب مس ا دمبم قم ز ظ مطا زض.[8] [9] OECD همبز ط ا اع ت ن ه ق ز ت ل س اظ ب ه از هطاخؼ ق ز. هطاخؼ ق ز. گ اوؿ ػى او كگط غلظت و ب ه از ROS ت ل سقس اظ ب ه از ث ن ضت تدطث تؼ ي ق ز. ثب غلظت ىؿبى ثط اؾبؼ ع گ اوؿ ػى ثمم ظ طث ممس -8 اؾممتب ساضز ثط اؾبؼ ع هبز ه ت ا س تغ ط و س. همبز ط او كگط گ اوؿ ػى همب ؿ ق ز. ث او كگط ظ طث س ROS Pippette tips 2- Pipetting 3- Sonicate 7

17 2-7 آهاد ساس هحل ل بزا ت ل د راد کال در کس ل -2-7 هحل ل FeSO 4 ثطا ؾبذت هحل ثب غلظت 0 / 0 mm زل مب 50 μl ه ضز بظ اؾت. فم اظ هحل FeSO 4 FeSO 4 ضا زض آة ىظزا قس ضل ك و مس. ثمطا مط و م و ث تبظگ آهبز قس اؾت اؾتفبز ق ز هحل ل H 2 O 2 ثطا ؾبذت هحل ثب غلظت H 2 O 2 0 / mm ضا زض آة ىظزا قس ضل ك و س. ثطا ط و زل مب μl 50 ه ضز بظ اؾت. ت ن ه ق ز اظ هحل ب H 2 O 2 و ث تبظگ آهبز قس اؾت اؾتفبز ق ز. آهاد ساس هحل ل بزا ت ل د راد کال آ ى س پزاکس د بافز فسفات هحل ثبفط فؿفبت ضا زض آة ىظزا قس و ى ب فلعات اؾ اظ آى ذبضج 70μl ه ضز بظ اؾت. ثطا ذبضج و زى ى ب فلعات اؾ )ph 7 / 4 00 mm( قس اؾت آهبز و س. ثطا ط و زل مب ث بزآ ض ب بزآ ض 2 هطاخؼ ق ز. ادآ ر - تطو ت DTPA فلع آل ز اؾتفبز ه ق ز. ثطا حص اوؿب ف بذ اؾت )و هوىي اؾت خ ز زاقت ثبقس( ث ؾ ل همبز ط ون ى ب ادآ ر 2- ضظ ي ب تجبز ى ا گبل س تجبز گط ب ب ا گبل س ب ذبل ؿت س. ه هحل ثبفط فؿفبت ضا ثب اؾتفبز اظ ضظ ي تجبز ا گبل س ت و س.[22] [2] هحل ل پ سا ت ي 0 / 25 حبنمل قم ز. ثمطا مط و م پ ظا ت ي ضا ثمبفط فؿمفبت 00 mm حمل و مس تمب غلظمت μm زل مب 00 μl تظم اؾت هحل ل سا ت ي اکس داس ظا تم ي اوؿم ساظ ضا زض ثمبفط فؿمفبت 00 mm حمل و مس تمب غلظمت زل مب / ml احمس 0 / 25 حبنمل قم ز. 0 ثطا ط و تظم اؾت. ت نم هم قم ز هحلم ت قس ا س اؾتفبز قس زض زهب 2 o C تب 8 o C گ ساض ق ز. μl مب ظا تم ي اوؿم ساظ وم ثم تمبظگ 4-7 آهاد ساس هحل ل بزا ت ل د اکس ضى ه فزد ضظ ث گب ضا زض آة ىظزا قس حل و س تب غلظت ق ز. زل مب حبنل 50μl ثطا ط و 00 μm ه ضز بظ اؾت. اظ لطاض گطفتي زض همبثل ض حفظ ق ز. 8

18 5-7 آهاد ساس ػاهل ب تل ا داس اسپ -5-7 کل ات ػ اهل ث تل ا ساظ اؾپ قبهل بذبلهم مب پبضاهغ ب ؿم ؿمت س وم ؾمجت پمؽظه م مب ظ مبز ؾ گ ب ب ف ا ه ق س. اظ ػ اهل ثم تلم ا مساظ اؾمپ ثمب ذلم ل ثؿم بض ظ مبز اؾمتفبز قم ز آظهب ف و تطل ا دبم ق ز و زض آى وم ػ اهمل ثم تلم ا مساظ اؾمپ مب ه از حمص قمس ثبقمس تمب ؾ گ ب ت ل س ق ز. ػ اهل ثم تلم ا مساظ اؾمپ ثمب ؾم گ ب مب فم ا بظه مس فطآ مس پم ف ذبلمؾبظ وچ ى ظغب ا ة فؼ ب قس ؿت س. هحل ل پا DMPO تطو مت DMPO ضا زض آة م ىظزا م قمس حمل و مس تمب غلظمت 500 mm حبنمل قم ز. ثمطا مط و م زل ممب 00 μl هم ضز مبظ اؾمت. اظ DMPO زهب 20- o C گ ساض اظ ض ض ثت هحبفظت و س. ثمب ذلم ل ثؿم بض ثمبت )99% ) اؾمتفبز و مس. زض هحل ل پا BMPO تطو مت BMPO ضا زض آة م ىظزا م قمس حمل و مس تمب غلظمت 500 mm حبنمل قم ز. ثمطا مط و م زل ممب 00 μl هم ضز مبظ اؾمت. اظ BMPO ثمب ذلم ل ثؿم بض ثمبت )99% ) اؾمتفبز و مس. زض زهب 20- o C گ ساض اظ ض ض ثت هحبفظت و س هحل ل پا TPC 400 حبنمل قم ز. ثمطا مط و م تطو ت TPC ضا زض آة ىظزا م قمس حمل و مس تمب هحلم mm زل مب 20 μl ه ضز بظ اؾت. اظ TPC ثب ذل ل ثؿ بضثبت )99% ) اؾتفبز و س. اک ص آسها ػاهل ب تل ا داس اسپ کل ات آظهب ػبهل ث تل ا ساظ اؾپ ضا ثب نظزى گطزاث ا ب ت ؾ پ پتوطزى هرل و س. ؾ ه ى س ظ طا ؾ هوطزى ه ت ا س ؾجت ت ل س ضاز ىب ب ق ز [8]. ث ظ طث س -8 هطاخؼ ق ز. و ثطزاض ضا زض هؼطو ض ا دبم س س. ضاز ىب ب ه ت ا س ت ؾ ض ت ل س ق س [23]. ه او ف هج ب نفط ثب توبم او كگط ب ث تل ا ساظ اؾپ ا دبم ق ز. غلظت ب او كگط ضا جك آ چ زض خس اضائ قس اؾت ث وبض ثط س. - Stock solution 9

19 خد ل - غلظت ا اک طگز غلظت ا 50 / 0 mm / 0 μm 0 / 0 μm 50 / 0 mm 62 / 5 μm μu 6 / 25 ml 0mM 25 μm -3 / 0 mm 0 mm DMPO FeSO 4 H 2 O 2 BMPO پ ظا ت ي ظا ت ي اوؿ ساظ TPC ضظ ث گب TEMPOL اک ص DMPO DMPO اظ هحل پب mm همساض μl ضا ث 450 اظ هحل ب هبز اوؿ س فلع ايبف وطز μl ثب نظزى گطزاث ا ب وك سى ت ؾ پ پت ذ ة هرل و س اک ص BMPO 450 اظ هحل ب هبز اوؿ س فلع ايبف وطز 50 اظ هحل همساض μl پب BMPO 500 mm ضا ث ثب نظزى گطزاث ا ب پ پت وطزى ذ ة هرل و س. μl اک ص TPC ثب 450 μl TPC 40 اظ هحل پب mm ضا ث اظ هحل ب هبز اوؿ س فلع ايبف وطز 50 همساض μl نظزى گطزاث ا ب پ پت وطزى ذ ة هرل و س. اک ص ک تزل هثبت ػاهل ب تل ا داس اسپ تطک ل هحص ل افشا ط راد کال )DMPO/OH( DMPO آة ىظزا قس ضا ث همساض μl ه ىط ل ل ايبف و س. - Microtube 0

20 FeSO 4 ث 20μl اظ 0 / 0 mm ايبف و س. 20 اظ هحل پب DMPO 500 mm همساض μl HO 2 20 / 20 اظ mm قط ع و س او ف ضا ثب μl تطک ل هحص ل افشا ط راد کال )BMPO/OOH( DTPA 25 μm )ph 7 / 4( اظ ثبفط فؿفبت 00 mm حب ث ه ه ىط ل ل همساض μl ايبف و س. 00 اظ هحلممممم پب ممممم μl 20 اظ هحلممممم پب ممممم BMPO 500 mm هممممممساض μl پ ظا ت ي 0 / 25 mm ايبف و س. 0 / 25 قط ع و س. U ml 0 ظا ت ي اوؿ ساظ او ف ضا ثب μl تطک ل هحص ل افشا ط )TPC/ O 2 ( TPC 00 آة ىظزا قس ضا ث نفحبت وكت همساض μl 96 اب ه ايبف و س همساض 50 μl اظ هحل پب TPC 40 mm ضا ث 50 μl اظ ضظ ث گب 00 μm ايبف و س. طا س ظهبى تبثفز ث ه جغ ض فبنل ث ي و ه جغ ض اثؿت اؾت اثجبت قس اؾت و ظهبى تبثفز 0 زل م زض ثؿ بض اظ ه اضز وبف اؾت. ث بثطا ي ت ن ه ق ز ظهبى تبثفز ث ث ن ضت آظهب كگب تؼ ي ق ز پؽ اظ تبثفز نفح ب تب ظهبى ا ساظ گ ط زض اتبق تبض ه زض زهب اتبق گ ساض ق س اه ب ظهبى ث ي تبثفز گطفتي ف تكس س اؾپ ي الىتط ذ ل و تب ثبقس. 8-7 آهاد ساس و استا دارد بزا هحاسب اسپ ي 500μl -3 حبنل / 0 mm 0 mm ق ز. زل مب هبز TEMPOL ضا زض هحل ث عى حل و س تب غلظت ه ضز بظ اؾت. TEMPOL ادآ ر - هبز TEMPOL زض ط ه لى ه ضاز ىب تط وؿ س پب ساض زاضز. ث بثطا ي ضاز ىب ػ اى خؿتد گط اؾپ ي ه بؾت ب و اؾتب ساضز اؾتفبز ق ز. ه ت ا س ث ثطاثط ثب 4 3 / 0sp 0 sp اؾت.[24] -3 ادآ ر -2 زض TEMPOL / 0 mm 0 mm تؼساز ضاز ىب - Well

21 تداخل ا و بزدار 8-8 ب ه از اگط ضؾب ب ثبق س افت ت اى ض عه ج حبنل ه ق ز. ثطا خل گ ط اظ ا ي ه ي ع گع ا ا ساظ گ ط زض زهب ثؿ بض پب ي )K 4( اؾت تب ضؾب سگ و وب ف بثس. زضن ضت اؾتفبز اظ ا ي ض ووتط ي زهب هوىي ؾل و ضا ثطا هحل ؾب تط ف غ و زى ب نبفف ثطا حص ض ظ نبف قطا ؾب تط ف غ ثب ثطا ذبضج وطزى ؾ گ ب ثطا ثبظث ضاز ىب ب ه از ب ه از ب آث ثطضؾ پؽ اظ او ف ثب ػبهل و س. گع ز م اؾتفبز اظ تل ا ساظ ث ض ب اؾپ اؾت. ا ساظ ا ساظ لبثل ت پطاو ف ب ه از تؼ ي ق ز. گع ؾ م ض تفط م به بؾت و ب ثب ػول بت ض بي اؾت.[25] ROS ب ت ل س ه ق س ت ل س قس اظ ذ ز ب ه از ثب ؾ ه وطزى ب ه از ضا پطاو س ى س ظ طا ثب ؾ هوطزى.[8] ث ض گؿتطز اؾتفبز پطاو ف فطان ت ب ه از و ثطزاض اظ ض هحبفظت ق ز زض ثؿ بض اظ آظه ى ب ؾو ت ه ق ز. ث بثطا ي تظم اؾت و قست ب ؾ گ ب ثبظث ق ز. ضاز ىب ب ه ت ا س بذت ا ض ؾ هوطزى ثطا پطاو ف ث ؾ ل.[27] [26] [23] ض ت ل س ق س لجل ثؼس اظ ح ي ث بثطا ي ادآ ر - نبفف ػول بت ف ع ى ثطا خسا و زى ب ه از اظ هب ؼبت ثب لطاض زازى غكب اؾت و اظ ه بى آى فم هب غ 2 ه ت ا س ثگصضز. پؽ اظ نبفف ثطا و ثطزاض اظ ا ي نبف س اؾتفبز و س. ادآ ر 2- ؾب تط ف غ ب ثطا ا ع ل وطزى خساؾبظ تؼل م اؾتفبز ب ه از ه ق س. ثطا و ثطزاض پؽ اظ 3 ؾب تط ف غوطزى اظ ا ي ض هب س اؾتفبز و س. و ب ضا اظ ؾ گ ب آى ب پؽ اظ ادآ ر 3- تفط ك ػول بت ض بي اؾت و ػول بت ذبضج و زى ؾ گ ب او ف ثب ػبهل ث تل ا ساظ اؾپ اضا ه ز س. 2-8 سهاى و بزدار ROS ت ل س فطآ س پ ب اؾت و زض آى ه عاى ا اع گ ROS قىلگطفت هؼو ت اثؿت ث ظهبى ؿت س. نػوط هحه افعا ك اؾپ ي هتغ ط اؾت. ث بثطا ي يط ض اؾت و ف ضا زض ا س ظهبى پؽ اظ و ثطزاض ا ساظ گ ط ق ز. ت ن ه ق ز ظهبى ث ثطا قط ع ا ساظ گ ط ب و ثطزاض ث ض تدطث تؼ ي ق ز. پؽ اظ - Dispersability 2- Filtrate 3 - Supernatant 2

22 ر ش کار کل ات 9-9 حؿبؾ ت ض ث ػ اهل زؾتگب اؾت زؾتگب ب هرتلف گ بگ ى وچ ى هحفظ گ ساض س ؾل و پبضاهتط غ ط هطتج ه ت ا س ت ظ وبت هتفب ت زاقت ثبق س. خس 2 پبضاهتط ب ثطا ا ساظ گ ط ب ضا فطا ن و ز اؾت. آى هطاحل و هطث ث فؾ ح و ه ضز اؾتفبز لطاض ا ساظ گ ط ب ضا كبى ه ز س. گطفت ا س ث ث تط ي ن ضت هثب ب اظ ت ظ وبت ثب اؾت ثب ضخ ع ث زؾت ضالؼول ب ػول بت ثطا فؾ ح قس ا س. قىل اضائ و زاض خط بىوبض )فل ابضت( خد ل 2 - ت ظ وات پاراهتز ا ع فس ح بزا ا داس گ ز راد کال در کس ل راد کال ى ه ف س پزاکس د اکس ضى ه فزد پاراهتز ا ه داى هغ اع س ه ساى هطوع پاراهتز ا ر شه ج ثؿبهس پاراهتز ا کا ال س گ ال ثؿبهس هس ل ؾبظ 00 KHz 9 GHz -0 GHz 320 mt -340 mt پ ب ض ثف ت اى پ ب هس ل ؾبظ 0 / 04 mt -0 / 25 mt 0 mw -40 mw ±5 mt - ±0 mt s زاه ثبثت ظهب 0 / 03 s -0 / 5 هس R ا فبظ ظهبى ض ثف 5 زل م - زل م Cavity 3

23 ول س ت اى فؾ ح ضا ض قي و س. هطحل -3-9 كب گصاض Mn 2+ Mn هطحل ضا زاذل و س. ؾل و ضا زاذل و س. قطا هطتج ثب احس ض عه ج ضا ت ظ ن و س. Mn كب گصاض ضا زاذل و س. 2+ Mn هطحل هطحل ت اى ض عه ج ضا ضˮ mw ت ظ ن و س. ثؿبهس ضا ت ظ ن و س فبظه ىط خفت قسگ ضا ت ظ ن و س هطحل پبضاهتط ب ضا ت ظ ن و س ا ساظ گ ط ث ن ضت هىطض ثب تغ ط و ب ا دبم ه ق ز. ه ساى هطوع پ ب ض ثف ظهبى ض ثف زاه ثبثت ظهب ثؿبهس هس ل ؾبظ پ ب هس ل ؾبظ ه س گ ط س فبظ ت اى هطحل ا ساظ گ ط ضا قط ع و س هطحل هطحل ؾ گ ب ضا نح گصاض و س و س ثجبت ضا ت ظ ن و س هطحل وو ؾبظ ROS هطحل ؾ گ ب ضا ض ثجبت ثجت و س هطحل -3-9 ؾبهب ض ذبه و س ضکل - هثال اس هزاحل ه رد اس بزا ب دست آ ردى ع ف 4

24 گ 2-9 تشر ق و و ضا ثب اؾتفبز اظ ػول ه گ ب تعض ك ثب اؾتفبز اظ ذ ضا ا دبز حجبة ب زض فطآ س تعض ك و اخت بة ق ز. )ا ػوت ض ( ث زاذل ؾل و ثىك س. اظ پؽ اظ اتوبم ا ساظ گ ط ثب اطذب سى پ چ ثط ض آزاپت ض گبظظزا ؾل ضا اظ ط ثبل هب س ا ترل وطز آى ضا ثب آة ىظزا قس قؿتك ز س. گبظظزا پبوؿبظ ضا ا س ي ثبض تىطاض و س. اگط همساض آة زض ؾل ثبل ثوب س ؾل ضا ث ن ضت ػو ز گ زاقت آة زاذل ضا ثب اؾتفبز اظ وبغص ذكه وي زض ز ب ؾل و ب ثب لطظا سى ظط ذبضج و س ؾپؽ ثب اؾتفبز اظ هىف ه و خس س ضا لطاض ز س. پؽ اظ او ف ب و تط هثجت او ف ب و اگط ثطذ اظ و ب قبهل ى ب فلع ب ه از زض ؾل ثبل هب س س ت ن ه ق ز ث ض وبهل ثب آة اؾ س )هحل سض ولط ه اؾ س ب تط ه اؾ س تب 30 ( آة ىظزا قس ث تطت ت ث بى قس قؿتك ق س. 3-9 ا داس گ ز -3-9 کل د ع فس ح را ر ضي ک د. اخبظ ز س آة ذ هؾبظ خط بى بثس. اق ب فلع ضا زض ا طا زؾتگب لطاض س س. طا گذار Mn 2+ را ارد ک د كب گصاض Mn 2+ ادآ ر - كب زض زاذل هحفظ لطاض ه گ طز. ص ضا ت و ي ه و س و تب ح ا ساظ گ ط ه ت ا س ث همبز ط هطخغ هطث ثبقس. ػال ثط ا ي اظ آى ب اغلت ثطا تؼ ي ػسم ل ؼ ت ا ساظ گ ط ثطا وبل جطاؾ ى اؾتفبز ه ق س. ادآ ر -2 ف هبز 2+ Mn ثطاثط ) / 98 0mT ± 0 / قبهل قف ذ ث ز ثبظ ث ي ؾ ه ي )ػبهل g ثطاثط 2( / 034 ا بضه ي ذ )ػبهل g 8 / 69 اؾت.[28] mt ثبظ ب ث ي ؾ گ ب ب ز گط ث خع ا ي ز ثطا وبل جطاؾ ى هح ض افم )پ ب ض ثك ( ضا و ت اى اؾتفبز وطز ظ طا آى ب جك ثؿبهس اؾتفبز قس تغ ط ه و س سل و را ارد ک د گطز غجبض ض ثت ؾب ط آت س ب ضا اظ ز اض ؾل و پبن و س ت اى ض عه ج ضا ثط ض نفط ه ل ات ت ظ ن و س ؾل و ضا ث زضؾت زض هؿ ط لطاضگ ط زض هحفظ تكس سگط لطاض ز س. ت ن ه ق ز ط ثبض ؾل و زض ه لؼ ت ىؿب زض هحفظ لطاض گ طز. ع هحفظ ه ت ا س تفب ت ظ بز زض ه عاى - Injector 5

25 حؿبؾ ت ا دبز و س. هحفظ ب ثب ػبهل و ف تكبى )ػبهل )Q هكره بث ه ز س كبى و ه ق س اگ هحفظ ا طغ ض عه ج ضا ث ض ه ثط شذ ط ه و س. ثب افعا ف ػبهل Q ه عاى حؿبؾ ت فؾ ح آة ه بثس. افعا ف خصة ه و س. اگط هحل هب غ تبثف زض حبلت ه ضز اؾتفبز ض عه ج ا ساظ گ ط ف ثطا ث قست ضا ب آث ه ضز آظه ى لطاض گ ط س ت ن ه ق ز و زض ه ؾل ترت و اضتع ث وطا لؿوت بظو اظ ؾل ث ن ضت ه اظ ثب خ ت ه ساى الىتط ى زض ن ضت ه اظ ثب خ ت ه ساى هغ ب ؿ ). لطاض گ طز هحفظ ث (هؼو ت ا و بى حبنل و س و و ث زضؾت زض هحفظ لطاض گطفت اؾت. ت ن ه ق ز و زض هطوع هحفظ لطاض گ طز. ا و بى حبنل و س و لسضت ض عه ج ط ثبض و و ب ضا لطاض زاز ب ذبضج ه و س ض نفط ه ل ات ت ظ ن قس ثبقس ضزا ظ هزب ط ب احد ر شه ج را ت ظ ن ک د لسضت ض عه ج ضا تب ه ه ل ات ت ظ ن و س ثؿبهس ضا ت ظ ن و س. ثؿبهس كبىز س ضا ض اؾت. ثؿبهس ض عه ج ؾبى ثؿبهس ت ظ ن و س تب فط ضفتگ تكس س زض هطوع لطاض گ طز. قىل 2 ضا هكب س و س. ضکل 2- ت ظ ن بساهد فبظ ه ىط ضا ت ظ ن و س. فبظ ه ىط ث ب گط فبظ ض عه ج اؾت. همساض فبظ ض عه ج احس ساضز. اگط فط ضفتگ تكس س هب س قىل 3 تغ ط قىل زاز ثبقس فبظ ه ىط ضا ض ت ظ ن و س و قىل فط ضفتگ وب س آ چ و زض قىل )o( 2 كب گصاض قس اؾت تغ ط بثس. - Q factor 6

26 ضکل 3 - تغ ز ضکل فز رفتگ تطد د خفتقسگ ضا ت ظ ن و س ا ي ه نتط ي هطحل زض زؾت بث ث ف ثب و ف ت )ثبت( اؾت. EPR زض اغلت ه اضز ت ظ ن ذ زوبض ث ذ ث وبض ذ ا س وطز اهب ثطا ثؼ اظ ه اضز هحفظ ث ن ضت زؾت ت ظ ن ه ق ز. قىل 4 ضا هكب س و س. وب ان ث ف خفتقس وب ان ت ج ك بفت وب ان ون خفتقس ضکل - 4 ت ظ ن درخ خفتضدگ )بد ى احد( ادآ ر - ه وب ان ث ف 2 خفتقس زاضا ػبهل Q پب يتط ذ ا س ث ز و ث حؿبؾ ت ووتط آى ه تح ه ق ز. ا ي تبث طات ظهب ز س ه ق س و هحل ب آث ب و ب ضؾب ب اؾتفبز ق س. اگط 3 ض ج س )اهپسا ؽ ) وب ان ه جثط ثب ىس گط ه جك جبق س ت اى ض عه ج ػج ض زض ه خجط ث ض خعئ ثبظتبة ه ق ز. ول ت اى اضز هحفظ و ق ز. اهپسا ؽ 4 هحفظ ث ؾ ل خفتو س ثب ه جثط ه جك ه ق ز. - Auto- tune 2 - Overcoupled cavity 3 - Impedance 4 - Coupler 7

27 پبضاهتط ب ضا ت ظ ن و س. 2 هطاخؼ ق ز ث خس.340 / ه ساى هطوع : 320 mt تب mt ث هطوع ه ساى هغ ب ؿ ث اذتهبض ه ساى هطوع گفت ه ق ز. ادآ ر - ه ض و ى زض هكب س هحس ز ه ساى هغ ب ؿ 5 تب 0 ثطاثط پ ب ذ ؾ گ ب اؾت اگطا ا ي ثب قىل ذ تغ ط ه و س ( ل ض تؿ گب ؾ ( پ ب ض ثف :)±( mt 5 تب 0 mt / 00 ث ب گط پ ب ض ثف پ ب ض ثك ه ساى هغ ب ؿ اؾت. ث ي هحس ز زض هتغ ط ث ز اگط ا ث ؾ ل ه ساى هغ ب ؿ هطوع پ ب ض ثف هحس ز ه ق ز ظهبى ض ثف: زل م تب 5 زل م زض هحس ز 0 ثب / تب 20 زل م هتغ ط اؾت. گبه و ظهبى ض ثف ث ي 20 ثب تب 20 زل م لطاض زاضز ثجبت ثب حطوت ذ ز پ ب ض ثف ضا ثب قىله ج ظهب و ض ثف ؾط غتط اظ 0 ثب ب ووتط ثبقس زاه : 50 تب 300 زاه كبىز س ث ط ث تط ي ؿجت ؾ گ ب ؾ گ ب هكرم ؿت. ث ف ثؿ بض پب ي و زض و زاض ضؾن قس اؾت وعهبىؾبظ ه و س. ه ل ثجبت زض هطوع ثبثت ه ق ز. تم تو س ث ز و زض هحس ز تب 0000 هتغ ط اؾت. ث ف )S/N( ثب ه ت ظ ن ث ث زؾت ه آ س. ت ظ ن ذ ل پب ي ه دط ث ؿجت ثب ت ظ ن قس ث ف اظ حس ثبت ف ث زؾت ه آ س و زض آى لل زض ثبثت ظهب : 0 / 03 تب 0 ثب / 5 ثبثت ظهب هست ظهبى پبؾد قسى ف ه ق ز ل پبؾد ذ ث تلم و ق ز. ثبثت ظهب ثطاؾبؼ ا ي و ث ا ظطافت ثرف ب ؾ گ ب ه ق ز ا ساظ ث زلت ا تربة وبف ق ز. 2 تم تو س زض حب لفل ضا كبى ه ز س. ظهبى پبؾد ت تط ثبػث ووتط ت ن ه ق ز و س ق ز زضغ طا ين ضت ؾ گ ب وطز. وچ ي اگط ثبثت ظهب ض همبز ط ثبت ت ظ ن زض گبم هكب س اظ ن خسا ه ق س ت ظ ن ه ق ز ت ن خساؾبظ پبؾد ذ ث ر ا س زاز ق ز و ثطا حص ف ف قظط ف قىله ج هؤثط ا ساظ گ ط ث ظهبى تغ ط )قىل( ذ ا س پبؾد ؾ گ ب اؾت و ستط ذ ا س ث ز هتؼبلجب ثبثت ظهب ت تط بظ اؾت. ث ب ثط آ چ شوط قس ت ن ه ق ز ظهبى ض ثف - Amplifier 2 - Lock- in amplifier 8

28 اثؿت ث و قطا پ چ سگ ؾ گ ب ثبثت ظهب اؾت زض ط ا ساظ گ ط ث ض هدعا ا تربة قس ت ظ ن ق ز فطوب ؽ هس ل ؾبظ : khz فطوب ؽ هس ل ؾبظ ث ب گط فطوب ؽ هس ل ؾبظ ه ساى هغ ب ؿ اؾت. هس ل ؾبظ ه ساى هغ ب ؿ ثطا زؾتگب ث ه ظ ض هكب س ف ثب حؿبؾ ت ثبت يط ض اؾت. قست هس ل ؾبظ ه ساى هغ ب ؿ ث ؿجت ؾ گ ب ث ف اثؿت اؾت قست ؾ گ ب هت بؾت ثب افعا ف زض پ ب هس ل ؾبظ افعا ف ه بثس ث بثطا ي حؿبؾ ت ع افعا ف ه بثس. 0 / 25 0 / 04 تب mt پ ب هس ل ؾبظ ) ب زاه هس ل ؾبظ (: mt 2 0 / 0002 پ ب هس ل ؾبظ قست هس ل ؾبظ ه ساى هغ ب ؿ ضا كبى ه ز س. هحس ز زض هتغ ط تب ث ز اگطا ثب ثؿبهس هس ل ؾبظ هحس ز ه ق ز. ادآ ر - اگط پ ب هس ل ؾبظ ثؿ بض ظ بز ثبقس )ث كتط اظ پ ب ؾ گ ب )EPR ؾ گ ب EPR ا و آقىبضؾبظ قس اؾت ػط ىتط قس اظ قىل ج ؼ ذبضج ه ق ز. طا س پ ب هس ل ؾبظ ون ع ه ت ا س ه دط ث ؿجت ؾ گ ب ث ف يؼ ف غ ط لبثل لج ثطا ؾ گ ب ق ز.[29-32] هس )حبلت وبض ( گ ط س : ا ل ي هكتك ا هؼو ل ف خصث اضائ ذ ا س قس. اگط ف زاضا ؿجت ؾ گ ب / ف ذ ل ذ ث ثبقس وچ ي زض ثطذ اح تفى هپص ط ه ل ةتط زاقت ثبقس هكتك ز م ف حبنل ه ت ا س هف س ثبقس فبظ: نفط زضخ فبظ ث ب گط فبظ )ت ظ وبت ض ع زضقت( تم تو س لفلقس اؾت. ث ض هؼو ض نفط زضخ ت ظ ن ه ق ز ت اى: mw تب 40mW ت اى ض عه ج ضا ض همساض ا ساظ گ ط ت ظ ن و س. ت اى ذط خ ض عه ج ه ضز بظ ثطا ا ساظ گ ط هت بؾت ثب ط و ه ضز ا ساظ گ ط هتغ ط ذ ا س ث ز ت ظ ن آى يط ض اؾت. ثب هكب س ؾ گ ب زض حبل و ت اى ذط خ ض عه ج تغ ط ه و س ت اى ذط خ ث تؼ ي ه ق ز. اگطا قست ؾ گ ب هت بؾت ثب ض ك ذط خ ض عه ج تغ ط ه و س و زض ثؼ و ب ثب افعا ف ذط خ ض عه ج اقجبع قست ؾ گ ب تغ ط قىل ه ج هكب س قس اؾت. و اض ذط خ ض عه ج ب )ت اى( ضا ثطا و ب و اقجبع قس ا س وچ ي و ب و بق بذت ؿت س )ا اقجبع ثبق س ب جبق س( اظ ووتط ي همساض قط ع و ز ا س هطحل تب ث ك همساض افعا ف 9

29 ه ز س زض حبل و و اض قست ؾ گ ب تغ ط قىله ج ه ضز ثطضؾ لطاض ه گ طز. ت ظ ن ت اى ح ي آظهب ف پب ا دبم قس ثطا آظهب ف ب ثؼس اظ وبى همبز ط اؾتفبز ه ق ز. ا داس گ ز را ضز ع ک د. س گ ال را صح گذار ک د اگط ؾ گ ب و س. زض هطوع پطز الغ كس ثبقس ب وال ض پطز لطاض گطفت ثبقس ؾ گ ب ضا ض هطوع ت ظ ن ثبات را ت ظ ن ک د. DMPO/OH ث ؾ ل ضاز ىب سض وؿ ل.[34] [33] تكى ل ث قىل 5 هطاخؼ ق ز. ادآ ر - ؾ گ ب ا بضثرك ثب ؿجت قست :2:2:. a H ; a N 5 / 0 تب ;4 / 9 G ادآ ر 2- زض زاذل آة ىظزا قس G ضکل 5- تطک ل هحص ل افشا ط (DMPO/OH) DMPO ث ؾ ل ضاز ىب آ ى ؾ پطاوؿ س.[35] [9] تكى ل BMPO/OOH ث قىل 6 هطاخؼ ق ز. 20

30 ادآ ر - زض ثبفط فؿفبت: = / 8 G. a N =3 / 4 G a H ضکل - 6 تطک ل هحص ل افشا ط راد کال (BMPO/OOH) BMPO تكى ل TPC/ O 2 ث ؾ ل اوؿ ػى ه فطز.[0] ث قىل 7 هطاخؼ ق ز. ادآ ر - ؾ گ ب ؾ گب ثب ؿجت قست :: ضکل -7 تطک ل هحص الت افشا ط راد کال (TPC/ O 2 ) TPC [36] اؾتب ساضز TEMPOL ث قىل 8 هطاخؼ ق ز. 2

31 ادآ ر - ؾ گ ب ؾ گب ثب ؿجت قست :: ادآ ر 2 - زض آة ىظزا قس ثطاثط 6. / 8 G a N ضکل - 8 استا دارد TEMPOL X B A D C sp sp همساض ROS ضا ثب اؾتفبز اظ ضاث وو ؾبظ و س. )( و زض آى ث ب گط هؿبحت لل خصة ثب ه ث ب گط هؿبحت لل خصة ثب ه و آظه ى اؾت. ث ب گط هؿبحت لل خصة كب گصاض -3 و اؾتب ساضز اؾت. TEMPOL / 0 mm 0 mm Mn 2+ ثب ه و اؾتب ساضز اؾت. A B C ث ب گط هؿبحت لل خصة كب گصاض +2 Mn ثب آظهب اؾت. D ث ب گط تؼساز ضاز ىب اؾپ ي اؾت. آظهب اؾت. X Sp غلظت ب ضاز ىب (TEMPOL) ف تؼ ي آظهب ) ب ه از( ث ؾ ل همب ؿ ثب هؿبحت ه ق ز. تؼساز ضاز ىب 3 / 0sp 0 4 sp و ب خصة لل -3 زض / 0 mm 0 mm و ثب ه TEMPOL اؾتب ساضز اؾت. ت ن ه ق ز و اؾتب ساضز آظهب ث تطت ت زض قطا ه ضز ا ساظ گ ط لطاض گ ط س و پبضاهتط ب كب گصاض خصة )ث خس 2 هطاخؼ ق ز( ىؿبى ت ظ نقس ثبق س. ؾ گ ب Mn 2+ ثب اؾتفبز اظ ا تگطا ز گب ف وو ؾبظ ب ثب اؾتفبز اظ هؿبحت لل.[37] تؼساز ضاز ىب تؼ ي هحبؾج ه ق ز [38] آظهب ه ت ا س ث ؾ ل همب ؿ ثب هؿبحت ؿج و ب اؾتب ساضز هحبؾج ق ز. -9.[40] [39] (0 اؾت M( nmol L ادآ ر - ض زاضا حس آقىبضؾبظ تمط جب 22

32 س گ ال را ر ثبات ثبت ک د. س ستن را خاه ش ک د ت اى ض عه ج ضا ض نفط ه ل ات ت ظ ن و س ذط ج ضا ا تربة و س زوو ض قي ذبه فؾ ح ضا ذبه و س. 0 هثال ا اس تا ح DMPO/OH -0 ث قىل 9 هطاخؼ ق ز. ضکل 9 ع ف هحص الت افشا ط راد کال (DMPO/OH) DMPO BMPO/OOH 2-0 ث قىل 0 هطاخؼ ق ز. ضکل 0 ع ف هحص الت افشا ط راد کال BMPO (BMPO/OOH) TPC/ O ث قىل هطاخؼ ق ز. 23

33 ضکل ع ف هحص الت افشا ط راد کال (TPC/ O 2 ) TPC TEMPOL 4-0 ث قىل 2 هطاخؼ ق ز. ضکل 2 ع ف استا دارد TEMPOL 24

34 کتاب اه [] Fu P.P., Xia Q., Hwang H.M., Ray P.C., Yu H. Mechanisms of nanotoxicity: Generation of reactive oxygen species. J. Food Drug Anal. 204, 22 () pp [2] Isaksen I.S.A., & Dalsoren S.B. Getting a better estimate of an atmospheric radical. Science. 20, 33 (603) pp [3] Hirota K., Sugimoto M., Kato M., Tsukagoshi K., Tanigawa T., Sugimoto H. Preparation of zinc oxide ceramics with a sustainable antibacterial activity under dark conditions. Ceram. Int. 200, 36 pp [4] ZAVOISKY E. Spin-magnetic resonance in paramagnetics. J. Phys. USSR. 945, 9 pp.245 [5] Li G.R., Hu T., Pan G.L., Yan T.Y., Gao X.P., Zhu H.Y. Morphology-function relationship of ZnO: polar planes, oxygen vacancies, and activity. J. Phys. Chem. C. 2008, 2 pp [6] Zhao H.T., Joseph J., Zhang H., Karoui H., Kalyanaraman B. Synthesis and biochemical applications of a solid cyclic nitrone spin trap: a relatively superior trap for detecting superoxide anions and glutathiyl radicals. Free Radic. Biol. Med. 200, 3 pp [7] Hawkins C.L., & Davies M.J. Detection and characterization of radicals in biological materials using EPR methodology. Biochim. Biophys. Acta. 204, 840 pp [8] Mitchell D.G., Rosen G.M., Tseitlin M., Symmes B., Eaton S.S., Eaton G.R. Use of rapidsan EPR to improve detection sensitivity for spin-trapped radicals. Biophys. J. 203, 05 pp [9] Keszler A., Kalyanaraman B., Hogg N. Comparative investigation of superoxide trapping by cyclic nitrone spin-traps: the use of singular value decomposition and multiple linear regression analysis. Free Radic. Biol. Med. 2003, 35(9):pp [0] Nakamura K., Ishiyama K., Ikai H., Kanno T., Sasaki K., Niwano Y. Reevaluation of analytical methods for photogenerated singlet oxygen. J. Clin. Biochem. Nutr. 20, 49 (2) pp [] Ishiyama K., Nakamura K., Ikai H., Kanno T., Kohno M., Sasaki K., Niwano Y. Bacterial Action of Photogenerated Singlet Oxygen from Photosenitizers Used in Plaque Disclosing Agents. PLoS One. 202, 7 (5) p. e3787m [2] Mizukawa H., & Okabe E. Inhibition by singlet molecular oxygen of the vascular reactivity in rabbit mesenteric artery. Br. J. Pharmacol. 997, 2 () pp [3] Robit B., Bernd G., Martin S. Calculations of Isotropic Hyperfine Coupling Constants of Organic Radical. An Evaluation of Semiempirical, Hartree-Fock, and Density Functional Methods. J. Phys. Chem. 996, 00 pp [4] Prousek J. Fenton chemistry in biology and medicine. Pure Appl. Chem. 2007, 79 (2) pp [5] Okuno T., Kawai H., Hasegawa T., Ueno H., Nakamura K. Enhancement of hydroxyl radical formation from superoxide anion radical in the presence of organic selenium compounds. J. Health Sci. 200, 47 (3) pp [6] Allen M., Lynch M., Lagos A., Remond R., Kochevar I.E. A wavelength dependent mechanism for rose Bengal-sensitized photoinhibition of red cell acetylcholinesterase. Biochim. Biophys. Acta. 99, 075 pp [7] Rozanowska M., Ciszewska J., Korytowski W., Sarna T. Rose-bengal photosensitized formation of hydrogen peroxide and hydroxyl radicals. J. Photochem. Photobiol. B. 995, 29 pp

35 [8] Keisuke M., Magdi M.M., Peter R. Chemical effects of ultrasound on aqueous solutions. Evidence for. OH and. H by spin trapping. J. Am. Chem. Soc. 982, 04 (2) pp [9] OECD Guidance on Sample Preparation and Dosimetry for the Safety Testing of Manufactured Nanomaterials. Series on the Safety of Manufactured Nanomaterials. (No. 36), Paris, France, pp. 93 [20] Lynch S.M., & Frei B. Mechanisms of copper- and iron-dependent oxidative modification of human density lipoprotein. J. Lipid Res. 993, 34 pp [2] Singh R.J., Karoui J., Gunther M.R., Beckman J.S., Mason R.P., Kalyanaraman B. Reexamination of the mechanism of hydroxyl radical adducts formed from the reaction between familiar amyotrophic lateral sclerosis-associated Cu, Zn superoxide dismutase mutants and H2O2. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 998, 95 (2) pp [22] Deterding L.J., Ramirez D.C., Dubin J.R., Mason R.P., Tomer K.B. Identification of free radicals on hemoglobin from its self-peroxidation using mass spectrometry and immuno-spin trapping: observation of a histidinyl radical. J. Biol. Chem. Mar 9; 2004, 279(2):600-7, [23] He W., Kim H.K., Wamer W.G., Melka D., Callahan J.H., Yin J.J. Photogenerated charge carriers and reactive oxygen species in ZnO/Au hybrid nanostructures with enhanced photocatalytic and antibacterial activity. J. Am. Chem. Soc. 204, 36 pp [24] Weihua L., Monhua W., Zhe X., Guozohong W. The free radical species in polyacrylonitrile fibers induced by g-radiation and their decay behaviors. Radiat. Phys. Chem. 202, 8 pp [25] Chen Z., Yin J.J., Zhou Y.T., Zhang Y., Song L., Hu S. Dual enzyme-like activities or iron oxide nanoparticles and their implication for diminishing cytotoxicity. ACS Nano. 202, 6 pp [26] Dodd A.C., McKinley A.J., Saunders M., Tsuzuki T. Effect of particle size on the photocatalytic activity of nanoparticulate Zinc Oxide. J. Nanopart. Res. 2006, 8 pp [27] Grela M.A., Coronel M.E.J., Colussi A.J. Quantitative spin-trapping studies of weakly illuminated titanium dioxide sols. Implications of the mechanism of photocatalysis. J. Phys. Chem. 996, 00 pp [28] Kim Y.C., Choi H.M., Lee B.Y., Abduriyim A. Identification of irradiated south sea cultured pearls using electron spin resonance spectroscopy. Notes & New Techniques. 202, 48 (4) pp [29] Bender C.J., & Berliner L.J. EPR: Instrumental Method. New York: Spring Science+ Business LCC (ISBN ), 2004 [30] Ikeya M. New applications of Electron spin resonance Dating, Dosimetry and Microscopy. London: World Science Publishing Co. Pte. Ltd. (ISBN ) [3] Eaton G.R., Eaton S.S., Barr D.P., Weber R.T. Quantitative EPR. Germany. Springer- Verlag, Wien, 200 [32] Riger P.H. Electron Spin Resonance Analysis and Interpretation. The Royal Society of Chemistry, Cambridge, 2007 [33] Sankarapandi S., & Zweier J.L. Evidence against the generation of free hydroxyl radicals from the interaction of copper, zinc superoxide dismutase and hydrogen peroxide. J. Biol. Chem. 999, 274 pp [34] Kagan V.E., Tyurine Y.Y., Tyurin V.A., Konduru N.V., Potapovich A.I., Osipov A.S., Kisin E.R., Schwegler-Berry D., Mercer R., Castanova V., Shvedova A.A. Direct and indirect effects of single walled carbon nanotubes on RAW macrophages: role of iron. Toxicol. Lett. 2006, ;65(): pp [35] Pristov J.B., Jovanovic S.V., Mitrovic A., Spasojevic I. UV-irradiation provokes generation of superoxide on cell wall polygalacturonic acid. Physiol. Plant. 203, 48 (4) pp

36 [36] Dhas M.K., Jawahar A., Benial A.M. Electron spin resonance spectroscopy studies on reduction process of nitroxyl radicals used in molecular imaging. EJB. 204, 2 () pp. 6 [37] Keiichi M., Yukio M., Masahiro K., Midori H., Akitane M. The application of spintrapping technique to the evaluation of SOD-like activity of biological substances. Bull. Chem. Soc. Jpn. 990, 63 pp [38] Nam S.N., Han S.K., Kang J.W., Choi H. Kinetics and mechanisms of the sonolytic destruction of non-volatile organic compounds: investigation of the sonochemical reaction zone using several OH. Monitoring techniques. Ultrason. Sonochem. 2003, 0 (3) pp [39] Nam S.N., Han S.K., Kang J.W. OH radical monitoring technologies for AOP advanced oxidation process. Water Sci. Technol. 2002, 46 (-2) pp. 7 2 [40] Cai H., Dikalov S., Griendling K.K., Harrison D.G. Detection of reactive oxygen species and nitric oxide in vascular cells and tissues: comparison of sensitivity and specificity. Methods Mol. Med. 2007, 39 pp [4] ISO/TS :205, Nanotechnologies Vocabulary Part : Core terms [42] ISO/TS :2009, Biological evaluation of medical devices Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity [43] ISO/TS :202, Biological evaluation of medical devices Part 2: Sample preparation and reference materials 27